支气管哮喘（简称哮喘）是一种以气道炎症、气道高反应性和气道重塑为特征的常见的慢性呼吸系统疾病，其发病机制复杂且具有异质性，涉及遗传、免疫、环境等多种因素。目前针对哮喘的治疗手段相对有限，深入探究哮喘的发病机制、探寻有效的治疗方法以及开发新型药物已成为当务之急。因此，哮喘动物模型的建立至关重要。然而，至今仍没有一种理想的哮喘动物模型能够全面、准确地复刻人类哮喘发生与发展的所有特征。本文对近5年来哮喘动物模型建立方法的研究进展进行了系统梳理，详细综述了常见实验动物（如小鼠、大鼠、豚鼠）、常见致敏剂（包括卵清蛋白、屋尘螨、脂多糖、甲苯二异氰酸酯），以及用常见实验动物及致敏剂建立哮喘动物模型的方法，并对这些模型的优缺点和适用范围进行了客观评价。本文总结了哮喘模型的评价指标，涉及行为学、肺功能、病理学、免疫学、药效学等多个方面。难治性哮喘动物模型的建立方式虽尚未完善，但通过相关文献检索，总结了难治性哮喘动物模型造模的几种思路，旨在为相关研究提供有价值的参考。根据现有的科学技术，笔者推测未来哮喘动物模型的研究将更加聚焦于临床相关性、技术创新以及多学科融合。具体而言，未来哮喘动物模型将通过多重致敏原联合诱导并应用基因编辑等新技术，提升模型的临床相关性，实现模型的多样化与个性化，并使用生物成像、传感技术动态监测哮喘气道炎症及气道重塑等相关反应，甚至可利用芯片技术寻找动物模型替代方法，最终致力于开发出更能模拟人类哮喘复杂性和异质性的多因素复合模型。
目的 运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱（ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole electrostatic field orbital trap-mass spectrometry，UHPLC-QE-MS）非靶向代谢组学分析法探讨不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应性代谢变化的潜在机制。 方法 捕捉青海省果洛藏族自治州玛多县星宿海地区海拔4 360 m（MD组）和青海省海北藏族自治州门源地区海拔2 900 m（MY组）处的高原鼠兔各10只，经麻醉后采集血清样本，经安死术后采集肾脏样本，分别进行一般生理生化指标测定和代谢组学分析。其中一部分血清样本用于血液学分析，另一部分用于血气分析，剩余部分检测生化指标。肾组织样本中代谢物提取后，进行UHPLC-QE-MS分析，运用代谢组学主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）方法分析差异代谢物，筛选标准为变量投影重要度（variable Importance in the projection，VIP）>1.5且倍数变化（fold change，FC）>1.5或VIP>1.5且FC<1/1.5。利用相关性分析热力图、差异显著性分析火山图、信号通路识别气泡图和矩形图分别分析差异代谢物及相关信号通路。 结果 MD组高原鼠兔的红细胞计数、葡萄糖、尿素氮、尿酸和同型半胱氨酸含量高于MY组，而血红蛋白、血细胞比容、肌酐和二氧化碳结合力低于MY组，这表明不同海拔的高原鼠兔血液携氧能力存在明显差异。经主成分模式识别分析和OPLS-DA置换检验显示，MD组和MY组高原鼠兔肾脏代谢物具有明显的聚类型分布（R2Y=0.930，Q2=0.655）。按照筛选标准，并经数据库比对发现，不同海拔高原鼠兔的肾脏代谢物差异分子有46个，其中MD组高原鼠兔的蟾蜍二烯羟酸内酯、腺苷、腺嘌呤、薯蓣皂苷、盐酸小檗碱、鼠尾草酚和虾青素表达水平均显著升高（VIP＞1.5，P＜0. 05），花生四烯酸、组胺和香豆素水平显著下降（VIP＞1.5，P＜0.05）。相关信号通路分析显示，缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成通路具有最大影响因子（P＜0.05），而泛酸盐和辅酶A生物合成通路呈现最显著富集（P＜0.05）。 结论 不同海拔高原鼠兔肾脏差异代谢物氨基酸、泛酸盐及辅酶A通路可能参与高原鼠兔高原低氧适应代谢机制。
目的 为保证研究数据的可靠性，建立SD大鼠90 d喂养试验的背景数据。 方法 汇总2020—2023年国家药物安全评价监测中心的6个独立的SD大鼠90 d喂养试验中空白对照组动物（120只SPF级4周龄SD大鼠，雌雄各半，仅给予普通鼠全价颗粒饲料）的背景数据。检疫期结束后，继续观察大鼠90 d，之后腹腔注射舒泰（50 mg/mL）麻醉、取血、处死并解剖。通过分析空白对照组数据，建立SD大鼠相关背景数据库。 结果 雄性和雌性大鼠的平均体重均稳步增长，雄性大鼠体重增长幅度更为明显。90 d内雄性和雌性大鼠平均体重分别增长至500 g和300 g以上。3周后，雄性大鼠每日平均摄食量基本稳定在25~28 g/只，雌性大鼠每日平均摄食量基本稳定在16~19 g/只。所有动物的食物利用率自实验第1周开始逐渐下降。白细胞分类计数结果中，雌性与雄性白细胞（white blood cell，WBC）、中性粒细胞（neutrophil，Neut）、淋巴细胞（lymphocyte，Lymph）、单核细胞（monocyte，Mono）的数值差异有统计学意义（P <0.001），但中性粒细胞百分率（neutrophil percentage，%Neut）、淋巴细胞百分率（lymphocyte percentage，%Lymph）、单核细胞百分率（monocyte percentage，%Mono）两性别之间差异无统计学意义（P >0.05）。雄性动物的平均红细胞数（red blood cell count，RBC）、血红蛋白浓度（hemoglobin，HGB）、红细胞比容（hematocrit，HCT）、血小板数（platelet count，PLT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）和活化部分凝血激酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）高于雌性（P <0.05）。雄性大鼠平均丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、肌酸磷酸激酶（creatine phosphokinase，CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、葡萄糖（glucose，GLU）、甘油三酯（triglyceride，TG）数值显著高于雌性（P <0.05）。雄性动物的尿pH值在5.0~8.5，雌性动物尿pH值在6.5~9.0。绝大多数雄性动物的尿比重低于1.020，绝大多数雌性动物的尿比重低于1.015。雄性动物各脏器（肾上腺、生殖器官除外）质量均高于雌性（P <0.001），而雌性动物的脏体比（肾脏、生殖器官除外）高于雄性（P <0.001）。 结论 总结国家药物安全评价监测中心6项90 d喂养试验中未给药对照组SPF级SD大鼠的体重、摄食量、血液学、血清生化各项指标的背景参考值范围，可为相关研究提供重要的参考数据。梳理大鼠背景性和自发性的组织病理学改变，有助于后续研究的规范化和标准化，以及对异常结果的评判分析。
动物实验是生物医学研究中的重要手段，是连接基础研究与临床试验的桥梁。动物实验的系统评价/Meta分析（systematic review/meta-analysis，SRs/MAs）是整合动物实验证据的重要手段，能够促进成果向临床研究转化，降低转化风险，并推动基础研究的资源整合。随着证据推荐分级的评估、制订与评价（grading of recommendations assessment，development and evaluation，GRADE）方法的不断发展，其在动物实验SRs/MAs中的应用受到了越来越多的关注。本文首先阐述了GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的应用原理及具体应用类型，包括定性描述的系统评价、Meta分析及网状Meta分析；接着深入分析了GRADE方法在实际应用中的误用情况，主要包括未正确进行证据体分级、证据体分级不当、误用于定性系统评价、升降级过程记录与结果不一致，以及误用于提供推荐意见；此外，还全面探讨了GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的证据确信度升降级因素，包括偏倚风险、间接性、不一致性、不精确性和发表偏倚对证据降级的影响，以及大效应量和跨物种一致性对证据升级的作用；最后，针对上述问题提出了改进策略，包括进一步研究与优化GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的应用细节、制定符合动物实验研究特点的SRs/MAs报告规范，以及加强研究人员在GRADE方法上的专业培训等。本文旨在通过提升动物实验SRs/MAs的证据质量，增强其在临床决策中的可靠性，促进动物实验研究成果更高效地转化为临床实践。
目的 为定位豚鼠优势性状基因筛选遗传标志，探索豚鼠酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）、黑素皮质素1受体（melanocortin 1 receptor，MC1R）基因多态性及其mRNA表达水平与毛色表型的关系。 方法 选择自主培育的普通级豚鼠57只，依据毛色分为白（22只）、花（22只）和黑（13只）3组。腹腔注射过量戊巴比妥钠对豚鼠施行安乐死后，取背部皮肤，提取组织中DNA。通过克隆测序，检测各组豚鼠TYR、MC1R基因外显子编码序列（coding sequence，CDS）的多态性，采用实时荧光定量PCR方法检测两个基因在皮肤组织中的mRNA表达，进而探讨两基因与豚鼠毛色的关系。 结果 在TYR外显子Ⅰ的CDS区域发现1个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）位点，其碱基A被G替换。所有白色豚鼠的TYR基因呈G/G基因型；深色（花、黑）豚鼠无G/G基因型，多数为A/A型，少数为A/G型；黑色豚鼠的A/A基因型频率高于花色豚鼠。MC1R基因外显子有2 760 bp序列缺失，标记为-基因；非缺失样本标记为N基因。大部分白色豚鼠的MC1R基因呈-/-基因型；花色豚鼠以-/N为主；黑色豚鼠以N/N为主，-/N次之。白色豚鼠的TYR基因表达水平较高，花色豚鼠较低，黑色豚鼠居中，但三者无显著性差异（P>0.05）。白色豚鼠的MC1R基因表达水平非常低，花色及黑色豚鼠均极显著高于白色豚鼠（P<0.01），黑色豚鼠又显著高于花色豚鼠（P<0.05）。 结论 豚鼠TYR与MC1R基因协同调控毛色。TYR基因的G位点突变可能导致豚鼠白化，MC1R基因的N位点改变影响毛色的深浅。
疝是普外科常见病和多发病，指体内器官整体或一部分离开正常的解剖位置，通过先天或后天形成的薄弱点、缺损或空隙进入其他部位。疝的发生机制复杂，与腹壁薄弱或腹腔内压增高等多种因素有关，临床表现多样，因类型、部位和严重程度的不同而有所差异。随着老龄化社会进程不断加剧，疝的发病率呈逐年上升趋势。动物模型作为研究疝疾病的重要手段，一方面能够检验新修补材料和新技术的安全性和有效性；另一方面有助于临床医师探索新的手术方式，并对某些疝疾病及其并发症的发生机制和新疗法展开研究。由于不同类型的疝疾病在病理生理机制上存在显著差异，其动物模型的建立方法和评价标准也呈现出明显的多样性。此外，动物模型的建立方法与实验目的密切相关，不同的实验目的对动物模型的要求各不相同。因此，根据不同的实验目的精准选择动物模型的建立方法，是确保研究顺利开展并取得可靠成果的关键。为此，本文综述了建立腹外疝（包括腹壁切口疝、腹股沟疝、脐疝、造口旁疝、嵌顿疝及盆底疝）、先天性膈疝、食管裂孔疝及脑疝动物模型的有效方法，详细分析了这些模型的优缺点及相关的评价标准；同时，总结了一些新型疝修补材料在临床前疝疾病动物模型研究中的应用，以期为疝疾病相关研究及治疗提供有价值的参考。
目的 通过模拟排卵功能障碍型异常子宫出血（abnormal uterine bleeding-ovulatory dysfunction，AUB-O）病因，建立异常子宫出血大鼠模型，为异常子宫出血病理机制研究及治疗药物开发提供可靠的模型支持。 方法 将24只成年（10周龄）雌性SD大鼠适应性饲养后，随机分为正常对照组（6只）和模型组（18只）。正常对照组大鼠在屏障环境中正常饲养；模型组大鼠在屏障环境中经背侧入路行双侧卵巢切除术，休养1周后开始造模用药。模型组造模第1 ~ 3天每日每只大鼠背部皮下注射雌二醇0.5 mg，第4 ~ 7天每日皮下注射孕酮5.0 mg；同时于第6天经背侧相同手术切口向双侧子宫腔各注射0.5 mL大豆油，于第8天行米非司酮（10 mg/kg）灌胃，造模期间持续观察大鼠所处动情周期的阶段及其变化趋势。造模后48 h内观察并记录大鼠子宫出血情况，米非司酮灌胃后0、12、24、36、48 h模型组动态收集血清和子宫组织样本，正常对照组在36 h同时取材。取材后分别进行HE染色、血清性激素ELISA测定、免疫组织化学检测、TUNEL凋亡染色、蛋白质印迹检测、转录组学测序和生物信息学分析，对异常子宫出血大鼠模型进行综合评价。 结果 异常子宫出血大鼠表现为子宫出血，内膜剥脱损伤、复旧不全，内膜炎性细胞浸润、凋亡增强，间质、腺体和血管结构破坏。与正常对照组相比，异常子宫出血大鼠的血清卵泡刺激素、雌二醇和促黄体生成素水平明显升高（P<0.05）；子宫内膜血管密度明显降低（P<0.05）；血管内皮生长因子在子宫内膜剥脱处表达定性观察到明显增强，而在间质血管周围表达显著下降（P<0.01）；基质金属蛋白酶-9在内膜损伤部位表达定性观察到明显增强，而在未剥脱间质和腺体处表达显著降低（P<0.01）；子宫内膜间质细胞凋亡显著增强（P<0.01）；成纤维细胞生长因子2和内皮素-1在子宫组织中的表达水平均明显下降（P<0.05）。比较异常子宫出血大鼠与正常大鼠子宫组织的转录组测序结果，共筛选到4 723个差异表达基因，其中表达上调基因为2 191个，表达下调基因为2 532个；KEGG富集分析显示，差异基因显著富集在炎症、免疫凋亡、细胞信号转导、增殖分化和肌肉收缩等相关通路。 结论 采用雌激素、孕激素和米非司酮序贯给药模拟AUB-O病因的方法，可成功建立异常子宫出血大鼠模型。该模型的子宫内膜损伤与炎症和凋亡相关，病理表现受血管收缩和内膜再生能力异常影响。该大鼠模型具有与临床非结构性病因异常子宫出血相近的病理特征，可以作为研究病理机制和治疗方法的有效模型。
目的 开发α-1，3半乳糖苷转移酶基因敲除（α-1，3-galactosyltransferase gene-knockout，GTKO）/人CD55（human CD55，hCD55）转基因的基因编辑异种器官移植供体猪并进行功能验证。 方法 利用成簇的规律间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）/CRISPR相关蛋白核酸酶9（CRISPR-associated nuclease 9，Cas9）、PiggyBac转座子技术和体细胞克隆技术，构建GTKO/hCD55基因编辑的滇南小耳猪，通过Sanger测序、实时荧光定量PCR、流式细胞术、免疫荧光实验、重亚硫酸盐测序、抗原抗体结合实验和补体依赖的细胞毒性实验分析其表型及功能。 结果 将基因编辑载体PX458和PiggyBac转染至野生型胎猪成纤维细胞后，经嘌呤霉素药物筛选获得48个单细胞克隆，挑选2个单细胞克隆进行体细胞克隆，获得2个妊娠33 d的胎猪。F01胎猪的α-1，3-半乳糖基转移酶（α-1，3-galactosyltransferase，GGTA1）基因型为-17 bp和野生型（wild type，WT），F02胎猪的GGTA1基因型为-26 bp/+2 bp和-3 bp。两个胎猪的hCD55 mRNA表达量均显著高于WT猪（P＜0.01），以F02胎猪作为供体细胞来源进行连续克隆后获得11头存活仔猪，鉴定均为GTKO/hCD55基因编辑猪。这些猪的α-Gal抗原表达缺失，但hCD55出现弱表达或不表达的情况。因此，对hCD55基因的CpG岛进行甲基化分析，结果表明在不表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛被高甲基化，而表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛未被甲基化或部分被甲基化。对hCD55基因的CpG岛进行密码子优化降低CG含量后，可实现hCD55基因的稳定表达。此外，抗原抗体结合实验表明人IgM结合到GTKO/hCD55基因编辑猪成纤维细胞的数量显著小于WT猪（P＜0.01）；补体依赖的细胞毒性实验表明GTKO/hCD55猪的成纤维细胞成活率明显高于WT猪（P＜0.01）。 结论 成功获得了GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪，并通过密码子优化降低了hCD55基因CpG岛的CG含量，从而有效避免甲基化导致的基因表达沉默。本研究可为供体猪的开发提供借鉴，将指导后续异种器官移植研究。
目的 通过检测肥胖型食蟹猴的一般身体指标与血糖、血脂的动态变化，探究各指标之间相关性，为肥胖食蟹猴模型研究提供参考依据。 方法 选取5～17岁的正常雄性食蟹猴30只（体重指数＜35 kg/m2且糖化血红蛋白含量＜4.50%）和自发性肥胖雄性食蟹猴99只（体重指数≥35 kg/m2且糖化血红蛋白含量＜4.50%），连续3年监测其腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白以及血脂四项指标，并使用重复测量方差分析、简单线性回归和多元线性回归相关性分析方法分析各指标间的相关性。 结果 与正常食蟹猴相比，肥胖食蟹猴的腹围、皮脂厚度、体重、体重指数和甘油三酯水平均显著升高（均P<0.05）；正常食蟹猴的皮脂厚度逐年上升，其余指标维持稳定。与第1年相比，肥胖食蟹猴第2年腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、甘油三酯和空腹血糖水平显著升高（均P<0.05），且升高趋势在第3年持续存在（均P<0.05）。正常食蟹猴第2、3年的肥胖发生率分别为16.67%和23.33%，糖尿病的发病率均为16.67%。肥胖食蟹猴第2、3年糖尿病的发病率分别为29.29%、44.44%，其中在11～13岁群体发病率分别为36.36%、44.68%，大于13岁群体的发病率（分别为28.13%和51.35%）。相关性分析结果显示，糖尿病发病组食蟹猴的空腹血糖与年龄、腹围、皮脂厚度、体重、甘油三酯水平均显著相关（均P<0.05）。 结论 长期肥胖可导致食蟹猴的一般身体指标及空腹血糖水平升高，并增加糖尿病的发病率；在肥胖引起的糖尿病食蟹猴中，其空腹血糖与年龄、体重、腹围、皮脂厚度、甘油三酯水平均高度相关，这对于预测自发性糖尿病的发生有一定意义。
重症肌无力（myasthenia gravis，MG）是一种自身免疫性疾病，主要表现为骨骼肌无力，严重时可累及呼吸功能。目前，西医治疗MG以免疫抑制剂为主，但长期用药的不良反应显著；而中医治疗具有多靶点干预的优势。由于MG的发病机制尚未完全明确，因此建立契合中西医临床特征的动物模型对机制研究及新药开发至关重要。本文系统梳理了MG的中西医病因病机、诊断标准及动物模型研究进展。西医认为MG发病与遗传易感性、环境因素及自身抗体介导的突触后膜损伤密切相关；中医则将其归为“痿证”，病机为先天禀赋不足与后天失养。西医诊断需综合典型症状、疲劳试验、血清抗体检测及电生理检查；中医诊断则以主症结合次症及舌脉辨证分型。现有动物模型以实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis，EAMG）和被动转移重症肌无力（passive transfer myasthenia gravis，PTMG）为主。其中，电鳐乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor，AChR）诱导的EAMG模型与西医诊断标准吻合度较高，但中医次症吻合度不足；人工合成AChR多肽模型应用广泛，但中医证候吻合度低；肌肉特异性酪氨酸激酶（muscle-specific tyrosine kinase，MuSK）、低密度脂蛋白受体相关蛋白4（low density lipoprotein receptor associated protein 4，LRP4）诱导模型及转基因模型创新性强，但临床吻合度偏低。模型评估需结合行为学、电生理及免疫指标，而中医证候模型尚缺系统性构建。笔者认为，未来研究需融合中医病因学造模法与西医病理机制，构建病证结合模型，并建立基于“以方验证”的中医证候评价体系，结合新兴技术提升模型科学性与实用性。本文将为优化MG动物实验设计、推动中西医结合研究提供理论依据，也为中药复方疗效评价及机制探索奠定基础。
目的 探讨自发性早衰SHJH hr 小鼠心脏的衰老现象。 方法 对不同周龄（10周龄和24周龄）的SHJH hr 小鼠（SHJH hr 组）和野生型ICR小鼠［用作野生组（wild-type， WT组）］进行对比研究。用小动物活体超声影像系统分析心脏功能，安死术后采集各脏器并称重，了解心脏萎缩情况；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色后观察心脏病理损伤情况；Masson染色后分析心脏纤维化情况；麦胚凝集素（wheat-germ agglutinin，WGA）染色后分析心脏心肌细胞面积；酶联免疫吸附法检测心肌组织中氧化损伤指标包括超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）和过氧化氢酶（catalase，CAT）的活性以及8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine，8-OHdG）含量；实时荧光定量PCR法检测炎症、纤维化、氧化应激相关标志因子的mRNA表达水平；比色法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平。 结果 与同周龄的WT组小鼠相比，10周龄SHJH hr 组小鼠的每搏输出量（stroke volume，SV）、射血分数（ejection fraction，EF）、缩短分数（fractional shortening，FS）和心肺重量无明显差异；但是当小鼠达到24周龄时，SHJH hr 组小鼠的SV、EF和FS值明显低于同周龄WT组小鼠（均P<0.05），肺脏重量无显著变化，但是心脏重量显著降低（P<0.05）。选取24周龄小鼠心脏组织进行组织学分析发现：与WT组小鼠相比，SHJH hr 组小鼠的心脏纤维化水平无明显差异，但WGA染色显示心肌细胞面积显著减少（P<0.05）。PCR检测发现氧化应激标志因子Sod2、Gpx1和Cat基因的mRNA水平显著下调（均P<0.05）。生化检测发现心肌组织中氧化损伤相关酶SOD、GPX和CAT活性显著降低（均P<0.05），而氧化应激标志物8-OHdG和MDA水平显著增加（均P<0.05）。 结论 SHJH hr 小鼠心脏出现早衰现象，可能与心肌组织氧化应激损伤有关。
目的 通过不同的肾脏切除手术方法建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型，并进行手术时间及存活时间比较和效果评价，以探索更优化的建模方法。 方法 根据不同手术方式分为腹腔入路先切2/3左肾后二期右全肾切除组（A组）、腹腔入路2/3左肾及右全肾同时切除组（B组）、背入路先切右全肾后二期2/3左肾切除组（C组）、背入路先切2/3左肾后二期切除右全肾组（D组）共4组，比较腹腔入路及背入路、分期及一次性肾脏切除术的SD大鼠生存曲线确定最优的肾脏切除手术方式后，选取24只8周龄雄性SPF级SD大鼠进行肾脏切除联合骨化三醇钙化诱导：其中实验组12只大鼠行背入路的左侧2/3肾切除后右侧全肾切除术，1周后腹腔注射骨化三醇溶液1 μg/kg，以进行主动脉钙化诱导；对照组12只大鼠行假手术后1周，腹腔注射含1%DMSO的生理盐水250 μL/kg。腹腔注射药物3个月后，观察各组大鼠的存活情况。麻醉状态下，采集各组大鼠的血液样本，测定血清磷和钙离子浓度、血清尿素氮和肌酐含量。安乐死大鼠后进行剖检，肉眼观察残余肾脏形态，HE染色观察肾冠状切面的病理学变化。另外取各组大鼠的全主动脉，茜素红S及von Kossa染色观察主动脉钙化程度，实时荧光定量PCR法检测大鼠主动脉组织中平滑肌肌动蛋白相关蛋白α （smooth muscle actin-associated protein α ，Sm22）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）基因表达情况，以评价建模效果。 结果 不同术式优化探索实验发现，背入路先切除2/3左肾再切除右侧全肾的D组大鼠的存活率最高，提示该术式是建立肾功能不全的慢性肾脏病模型的最佳手术方式。运用该术式联合高剂量骨化三醇注射的实验组大鼠血清钙离子浓度显著低于假手术对照组（P＜0.05），而血清磷离子浓度、血清肌酐及血清尿素氮含量则显著高于对照组（P＜0.05）。肾脏HE染色可见实验组大鼠肾脏发生明显器质性改变，其中实验组大鼠的肾小球计数比对照组明显减少（P＜0.05），提示肾衰竭模型成功建立。茜素红S染色可见实验组大鼠的主动脉中膜中有明显的色素沉着，von Kossa染色可见实验组大鼠的主动脉中膜层明显有硝酸银沉积，符合肾衰竭主动脉钙化的表现。实时荧光定量PCR表明，实验组大鼠的主动脉组织中Sm22表达水平下降（P＜0.05），OPN和Runx2表达水平上升（P＜0.05），提示主动脉平滑肌细胞由平滑肌表型向骨样表型转变，主动脉钙化模型诱导成功。 结论 采用背入路先切除2/3左肾，再进行右侧全肾切除，联合高剂量骨化三醇溶液摄入的方法，可成功建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型。该方案能缩短手术时间，提高建模成功率和动物存活率。
目的 通过对青春期前小鼠进行来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理，构建小鼠多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）模型，比较模型小鼠与安慰剂对照小鼠的肝脏转录组差异，以探索PCOS发病过程中肝脏的作用机制。 方法 定制剂量为2 mg的来曲唑缓释片，缓释周期为 40 d。分别将对照安慰剂缓释片和来曲唑缓释片包埋在3～4周龄的C57BL/6J小鼠颈后皮下，每组8只，构建对照组及来曲唑诱导的PCOS模型，并在包埋次日给予小鼠高脂饮食处理。造模周期5周，每周监测每组小鼠的体重和24 h进食量。收样时记录小鼠肝脏重量，通过HE染色观察小鼠卵巢和肝脏组织病理变化，通过油红O染色观察肝脏脂质沉积水平，通过F4/80免疫组织化学染色观察肝脏巨噬细胞浸润程度，通过Masson染色观察肝脏纤维化水平；通过转录组学测序技术分析对照组和模型组小鼠肝脏组织中基因表达的差异，并对显著差异表达的基因进行富集分析；通过实时荧光定量PCR验证两组小鼠肝脏组织中显著差异表达的基因。 结果 与对照组相比，来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理后的模型组小鼠体重显著增加（P<0.001），卵巢的多囊样表型显著，肝重比显著下降（P<0.05），但小鼠的肝脏重量、肝组织形态和脂质沉积没有显著影响（P>0.05）。转录组学测序发现，来曲唑处理后小鼠肝脏中有119个上调、217个下调的差异表达基因，广泛参与胆固醇和类固醇合成、类固醇激素合成及炎症反应相关通路。荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肝脏的HSD3B2和HMGCR基因的mRNA表达上调（P<0.01），IL4、CCL2和COL1A1基因的mRNA 表达下调（P<0.05）。但Masson染色与F4/80免疫组织化学染色未见肝脏纤维化水平与巨噬细胞浸润程度的显著改变。 结论 来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理可以成功构建小鼠PCOS模型。模型小鼠肝脏中基因表达变化显著，可能通过调控胆固醇和类固醇代谢，参与PCOS的发病机制。
感染性动物疾病模型是研究传染病传播方式、发病机制及抗感染药物不可或缺的重要工具。在感染性动物疾病模型制备及应用过程中不可避免会遇到动物疼痛、痛苦等违背动物福利伦理的情况。因涉及生物安全管理，多数感染性动物实验仍以动物的死亡为实验终点，这对动物福利与伦理的保障工作提出了极高的要求。针对感染性动物实验的福利与伦理指导原则或规范亟待建立。本文以实验动物福利与伦理的基本原则为依据，探讨感染性动物实验中福利与伦理的特殊性，强调感染性动物实验应充分考量研究计划的科学研究目的、人员职业健康安全和动物福利伦理三者之间的平衡。本文还通过文献研究以及与常规实验动物福利伦理要求的对比分析，从人员要求、实验动物选择标准、生存环境管理及设施设备、特殊照料和兽医护理、人道终点等方面提出感染性动物实验对福利伦理的特殊要求。笔者认为，开展感染性动物实验的人员应接受有效的生物安全培训，机构应赋予实验动物使用与管理委员会（Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC）、兽医和兽医技术人员足够权限，以保障人员与动物福利伦理；实验动物的选择需充分考虑研究目的、福利、伦理及生物安全等要求，实验动物易感性和体型大小是高等级生物安全实验室重点关注的内容；明确人道终点是感染性动物实验不可或缺的福利伦理要素，环境丰富化和特殊护理是实现动物福利伦理必要的保障。本文内容可为相关工作提供参考。
炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一类由遗传、免疫、环境等多因素共同驱动的慢性复发性肠道疾病，主要包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis）和克罗恩病（Crohn's disease）2种类型。当前的IBD疾病研究中，小鼠与斑马鱼是最常用的实验动物。其中，斑马鱼凭借其独特优势成为理想模型。相较于啮齿类动物，斑马鱼具有生长周期短、繁殖能力强、体型小巧及胚胎透明等特点，不仅便于动态追踪连续性病理变化，还能高效实现高通量药物筛选。斑马鱼的基因与人类同源性达70%以上，肠道细胞组成及发育过程与人类高度相似，且其肠道菌群与人类肠道微生态特征接近，为研究肠道菌群与IBD的关联奠定了良好基础。随着生物技术的发展，基于化学诱导和基因工程构建的斑马鱼IBD模型，可精准模拟人类IBD的核心病理特征，如肠壁增厚、炎性细胞浸润、促炎因子表达升高等，该模型在揭示发病机制和开发靶向药物中发挥了关键作用。本文首先阐述斑马鱼的肠道特征及IBD模型特点，进而从遗传、免疫、环境与饮食、感染等维度深入剖析其在IBD发病机制研究中的应用，同时综述其在抗炎药物、益生菌、中药等治疗药物开发中的研究进展，旨在为科研工作者在临床前研究的各阶段合理运用斑马鱼模型提供参考，以推动IBD基础研究领域的深入发展，并期望能加速该领域的突破。
肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）是一种不可逆的致死性神经退行性疾病，其发病率与人口老龄化进程呈正相关。ALS以运动神经元的渐进性丧失为特征，导致患者肌肉无力、萎缩直至呼吸衰竭。ALS的致病机制涉及遗传和环境等多种因素，其中遗传因素尤为重要。目前已发现多个与ALS相关的致病基因，如铜锌超氧化物歧化酶1编码基因（Cu/Zn superoxide dismutase，Cu/Zn SOD1，又称SOD1）、转录反应DNA结合蛋白43编码基因（transactive response DNA-binding protein 43，TDP-43）、肉瘤融合蛋白基因（fused in sarcoma，FUS）、9号染色体开放阅读框72基因（chromosome open reading frame 72，C9orf72）等，这些基因的突变不仅见于家族性ALS中，也在散发性ALS中被发现。基于发现的ALS风险基因，通过多种方式建立了ALS动物模型，如转基因模型、基因敲入或敲除模型和腺相关病毒过表达模型，这些模型模拟了包括运动神经元丢失、泛素化包涵体形成及神经肌肉接头退变等人类ALS部分典型病理特征，但这些模型仍存在局限性：（1）单一基因突变模型难以全面模拟临床上散发性ALS的复杂多因子致病特征；（2）模式动物与人类在神经退行性疾病的微环境调节机制和病变速率上存在明显差异，这可能影响疾病表型的准确重现和药物效果的评估。为更全面地研究ALS的病理机制并推动有效药物的研发，构建和优化ALS疾病动物模型显得尤为关键。本综述归纳常用的ALS基因突变小鼠模型，分析各类基因修饰小鼠模型的表型和病理特征，包括常见转基因、基因点突变敲入、基因敲除以及通过腺相关病毒载体介导的过表达小鼠模型等；通过对比上述模型的优缺点，进一步讨论了其在ALS病理机制研究和药物开发中的具体应用情况，以期为ALS研究的模型选择提供参考。
目的 针对传统实验动物中心管理中存在的笼位调度效率低、人员行为监管不到位、设备老化难升级等问题，通过应用多模态大模型技术升级现有实验动物中心的信息系统，实现实验动物笼位状态的实时感知、实验人员行为的智能监管以及业务流程的自动化处理，从而提升管理效率与精细化水平。 方法 浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心提出一个基于人工智能的实验动物中心信息化升级方式，能兼容不同饲养设备。该系统架构自下而上依次包括硬件设施层、核心算法层和应用功能层。硬件设施层配备摄像头和高速网络传输设备，用于笼位和人员信息采集；核心算法层通过多阶段图像预处理技术和多模态大模型识别技术，实现图片信息抽取和识别；应用功能层将识别结果和已有动物中心信息相整合，生成实时笼位占有热力图，直观、清晰地展示实验动物中心的笼位使用密度分布情况。 结果 基于人工智能的管理系统笼位识别准确率达98.5%，人员的实验服正确穿戴识别率为98.8%。每张图片平均处理时间约为3.7 s，笼位有效使用率提升23%，周转效率提高35%。此外，管理系统能够实时追踪并警告不规范行为，在通过智能化识别后，综合违规行为的发现次数暴露更多，违规行为发现率提升90.6%，持续使用3个月后，周平均违规行为较基线期下降54.0%。 结论 将多模态大模型应用于实验动物管理领域，可实现笼位标识实时监控与自动化管理，提升管理效率和精确度。系统整合视觉识别和行为分析等多源数据，可构建对实验人员的全方位智能监管体系，为科研机构提供高效、精准、价廉的管理工具，推动实验动物管理的智能化发展。
目的 利用肝螺杆菌（Helicobacter hepaticus，H.hepaticus）致维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）缺陷小鼠肠纤维化，构建炎性肠病模型，初步探究其病理特征及发病机制。 方法 用2×108 CFU的H.hepaticus菌液灌胃野生型和VDR-/-雄性小鼠各5只（分别命名为WT和VDR-/-小鼠感染组），隔天1次，连续3次；同时设立未感染对照组，即野生型和VDR-/-雄性小鼠各5只，灌胃等体积PBS。最后一次灌胃后第7天检测小鼠感染情况，确认感染后每周称量1次小鼠体重。于确认感染后第16周时剖检小鼠，采集并测量结肠组织长度，取粪便检测含水量；将结肠组织分成4份，一份做石蜡切片用于HE、阿尔辛蓝-过碘酸希夫（alcian blue-periodic acid Schiff，AB-PAS）、Masson和免疫组织化学染色，一份提取DNA后使用实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RFQ-PCR）检测H.hepaticus定植水平以判断感染效果，一份提取RNA后采用反转录PCR（reverse transcription-PCR，RT-PCR）法检测细胞因子表达情况，另一份提取蛋白后采用蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）和白细胞介素（interleukin，IL）-33表达水平。 结果 所有感染组小鼠经灌胃3次后均成功感染H.hepaticus。与VDR-/-小鼠未感染对照组相比，VDR-/-小鼠感染H.hepaticus 16周后体重明显减轻（P＜0.05），并出现肠道出血情况，粪便含水量显著多于未感染对照组和WT小鼠感染组（P＜0.05）。与WT小鼠感染组相比，VDR-/-小鼠感染组的结肠组织经HE染色显示炎性细胞浸润，AB-PAS染色显示肠腺萎缩不规则、腺泡减少，Masson染色显示胶原面积增多。RT-PCR显示VDR-/-小鼠感染组的结肠组织中IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和α-SMA等炎症及纤维化相关基因的转录水平比WT小鼠感染组明显升高（P＜0.000 1）；免疫组织化学法和蛋白质印迹结果显示IL-33和α-SMA蛋白表达水平也明显增多（P＜0.001）。 结论 VDR-/-小鼠感染H.hepaticus后表现为更严重的炎症反应，出现黏膜炎性浸润、黏膜组织功能受损、胶原沉积等病变，提示炎性肠病模型构建成功。进一步研究发现VDR缺陷可能通过影响IL-33表达加剧了炎性肠病相关的肠纤维化进程。
实验动物在高校进行的科学研究和实验教学中具有重要地位，是顺利开展相关研究和教学工作必不可少的支撑条件。高校开展生命科学、医学、药学、化学、生物医学工程等学科的科研和教学工作，都离不开动物实验。规范化运行的实验动物屏障环境设施（barrier environmental facility for laboratory animal）是保障动物实验结果稳定、科学和可靠的重要平台。加强实验动物屏障设施准入的科学管理，是保障实验动物屏障设施规范化运行、控制实验动物质量和稳定性、避免实验动物和工作人员遭受病原微生物污染，甚至避免暴发人兽共患病等生物安全事故的重要防线。本文以南京大学仙林校区2019年开始运行的3个实验大鼠、小鼠小型实验动物屏障设施为例，针对屏障设施的安全准入管理体系，根据近5年来实验动物屏障设施运行的实际情况，并结合这些年在不断探索和优化其准入管理体系过程中的经验，从管理制度建设和标准操作规程（standard operating procedure）制订与执行角度出发，探讨了以下5个方面：屏障设施人员、动物、物品和仪器设备准入管理，以及屏障系统空气进出控制管理；同时，对这5个方面进行了全面系统地梳理、总结，以期能为学校动物实验平台的建设和管理起到有益的借鉴作用，并对后续开展科学研究、保障公共卫生安全和确保实验人员健康提供支持。
目的 为避免实验猴因直接抓捕引发应激反应的问题，提高狨猴在行为学、双光子成像和电生理等实验中的适应性和实验效率，研制一种无须抓捕即可将狨猴保定的实验猴椅装置。 方法 通过3D图形设计和打印，制作一套可在狨猴实验时配合使用的转运笼和猴椅。首先将转运笼与实验饲养笼的食盆出口对接，轻微驱赶狨猴进入转运笼，之后将转运笼与猴椅连接，再次轻微驱赶狨猴进入猴椅，保定后进行后续实验。通过观察转运和保定的时间效率、狨猴的配合度以及应激反应等进行有效性测试和改进。 结果 经过测试与改进，该装置可以在无须抓捕的情况下，顺利完成狨猴的保定，显著提高了实验的流畅度和效率。随着操作次数的增加，狨猴会更加配合，操作速度加快，实验效率得到了显著提升。使用该装置后，实验狨猴的应激反应明显减少。特别是与传统的抓捕方法相比，使用该装置能显著减少狨猴的焦虑和不适，提高了其在实验中的配合度。 结论 本团队设计的猴椅装置能够在无须抓捕的情况下轻松实现狨猴的保定，在确保后续实验顺利进行的同时，还能保障动物福利。该装置具有操作简便、实用性强、成本低等优点，易于推广使用。
探讨中医证候动物模型不同的构建方法及其优劣势，并针对现有构建方法存在的问题提出优化策略，以期为构建既保有中医证候本质又符合现代科研规范的中医证候动物模型提供参考。本文以“中医”“证候”“动物模型”为关键词检索并阅览知网、万方以及维普数据库中有关中医证候动物模型的文章，继而系统梳理了当前中医证候动物模型主要构建方法的理论依据、技术特点及存在问题，并针对存在的问题提出相应的优化措施。中医证候动物模型的构建方法包括中医病因病机构建法、现代医学病因病理构建法以及中西医病证结合构建法。中医病因病机构建法以整体观为指导，通过模拟六淫致病、情志失调等外因来构建证候模型；该方法虽契合中医理论内涵、操作简便且可控性强，但存在造模成功率低、病因-证候拟合度不足等问题。现代医学病因病理构建法基于微观病理机制，采用药物干预、手术建模等可控性强的技术手段；该方法虽具有客观指标明确、可重复性优的特点，但存在偏离中医“证”的本质、安全性不足等缺陷。中西医病证结合法在证候本质还原度与技术可行性上呈显著互补性，在方法论上实现了中医基础理论与临床辨证思维的系统融合，并整合现代医学的客观评价体系，提升了西医病理机制与中医证候演变规律的临床吻合度；然而，该方法仍面临证候辨识标准模糊、疾病进展模拟失真等共性挑战。中医证候动物模型的构建虽面临理论适配性差、技术标准化欠佳等问题，但在验证方药疗效和推动中医药国际化方面仍具有不可替代的价值。未来应通过优化动物选择、完善制备方法理论依据、规范造模因素设置、明确造模成功标准等措施优化中医证候动物模型的构建。
目的 研究db/db小鼠口腔菌群的改变，为探寻2型糖尿病与口腔微生态的联系提供实验基础。 方法 选取8只10周龄雄性db/db小鼠为糖尿病实验组，8只10周龄雄性db/m小鼠为正常对照组。适应性喂养5 d后，在相同饲料饲养的第6天和第37天行尾静脉采血，测定两组小鼠的空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）水平和口服葡萄糖耐量（oral glucose tolerance test，OGTT），以验证糖尿病模型的可靠性。在相同饲料饲养的第15天采集两组小鼠两侧颊黏膜、舌背与舌腹、口底黏膜、上腭硬区黏膜、上下颌牙龈的龈上区域的口腔菌群样本，提取口腔微生物的基因组DNA后，使用GeneAmp 9700热循环仪对其中16S核糖体RNA（16S ribosomal RNA，16S rRNA）基因的V3～V4 区进行扩增，然后在Illumina MiSeq平台上通过双标引扩增和测序对口腔菌群结构进行评估，然后应用QIIME（version 1.6.0）软件进行生物信息学分析。 结果 实验开始后第6天和第37天的FBG水平和OGTT检测结果均显示db/db小鼠比db/m小鼠表现出明显的2型糖尿病症状。α多样性分析显示两组小鼠的口腔菌群在多样性上无显著差异（P＞0.05），而在丰富度上差异显著（P＜0.05）。主坐标分析显示db/db小鼠的口腔菌群结构与db/m小鼠存在显著差异（P＜0.05），物种组成分析以及LEfSe分析显示db/db小鼠口腔菌群在门水平以变形菌门（p_Proteobacteria）为主的相对丰度显著上升（P＜0.05），而在属水平上变形杆菌属（g_Proteus）和肠球菌属（g_Enterococcus）的相对丰度极显著上升（P＜0.001）。 结论 2型糖尿病db/db小鼠的口腔菌群结构和丰富度均较血糖正常的对照小鼠出现了显著变化。
职业健康安全管理体系作为现代企业管理制度之一，越来越受到人们的重视。近年来，职业健康安全管理体系在各个领域不断完善和发展，逐渐成为企业竞争力的重要指标。目前，国际实验动物评估和认可委员会（Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International，简称AAALAC International）和中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）均对实验动物相关的职业健康管理提出了要求。而在国内实验动物行业，由于各机构对职业健康相关的法律法规不够熟悉，缺乏经验丰富的管理人员，实验动物机构的职业健康安全管理体系发展相对滞后，尚处于发展初期。本文通过总结作者在实验动物机构建立职业健康安全管理体系的实践经验，首先介绍了国内外有关实验动物的职业健康安全法律法规、我国实验动物机构常见职业病及其危害因素，然后从建立职业健康安全管理制度、开展职业健康安全培训、从业人员职业健康检查、职业病危害因素现场检测、落实建设项目职业病防护设施“三同时”制度、建立及维护职业健康档案、建立职业危害告知管理制度、建立职业病危害事故应急救援预案等方面指出实验动物机构进行职业健康安全管理体系建设的要点，以供行业内作参考。
动物实验在生物医药研究中广泛用于安全性评估、毒理学分析、疗效验证以及机制探索。近年来，由于动物实验伦理审查制度日趋严格、动物福利意识不断提升，同时为了推动更高效、低成本的药物研发，美国在2022年9月通过了食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）现代化法案2.0，首次取消了新药临床前研究必须进行动物实验的联邦强制要求。2025年4月FDA进一步提出，将在单克隆抗体等药物研发中采用人工智能计算模型、类器官毒性测试、3D微生理系统等一系列“新的替代方法”，从而逐步取代传统的动物试验模式。在这些新兴技术中，生物3D打印模型因其高仿生、高重现性和可规模化等特性，逐渐成为动物模型的重要替代和补充手段。本综述系统梳理了生物3D打印技术在生物医药领域的研究与应用进展：首先概述了生物3D打印的关键组成，包括生物材料的选择与功能化设计、多种打印策略的原理及特点，分析其在构建多细胞空间结构、微环境调控和细胞命运引导方面的优势；其次，介绍了生物3D打印模型在药物研发中的典型应用，包括通过构建肿瘤、传染病和罕见病等疾病模型实现对药效的高通量筛选，以及通过构建肝脏、心脏等器官特异性模型进行药物毒理学研究；再者，进一步探讨了生物3D打印在组织工程领域的应用范围，涵盖骨/软骨、皮肤、血管等多种功能性组织的构建，以及在再生替代等方面的最新进展。此外，本文还分析了生物3D打印模型与动物模型在疾病发生发展和药物作用机制、精准医疗、药物研发以及组织再生研究等领域的互补优势，讨论了二者交叉应用在提升建模准确性与生理相关性方面的潜力与挑战。综上，生物3D打印作为一种新兴的体外造模与制造技术，正逐步建立起涵盖疾病建模、药物筛选、毒性预测与组织再生的完整应用体系。
目的 获得五指山猪主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）Ⅱ类分子基因序列，并分析其遗传信息，探究五指山猪MHC的生物学功能。 方法 采集3头成年雄性五指山猪的脾脏样本，根据MHC Ⅱ类分子基因序列设计引物，采用RT-PCR法扩增五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的编码序列，通过Sanger测序确定MHC Ⅱ类分子基因序列，利用生物信息学软件分析五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的理化性质、系统进化关系、保守基序和结构域，以及染色体位置和共线性关系。 结果 共鉴定出8个五指山猪MHC Ⅱ类分子基因，分别为SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB、SLA-DMB、SLA-DMA和SLA-DOA。Sanger测序后确定MHC Ⅱ类分子基因序列，并将序列上传至GenBank获得登录号，分别为PQ182796、PQ182797、PQ182798、PQ182799、PQ182800、PQ182801、PQ182802和PQ164779。系统进化树分析表明，五指山猪6个MHCⅡ类分子基因与杜洛克猪、梅山猪、大白猪和巴马猪等不同品种猪的MHC Ⅱ类分子基因不在同一个分支上。生物信息学分析表明，MHC Ⅱ类分子大部分为疏水性蛋白，其相对分子质量为27 700 ~ 30 000，归于同一亚区的基因含有相似的保守基序，其中SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB和SLA-DMB基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱβ保守结构域，SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DMA和SLA-DOA基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱɑ保守结构域。8个MHC Ⅱ类分子基因散在分布于五指山猪的7号染色体长臂上，与人的3个基因之间具有共线性关系，而与杜洛克猪的5个基因之间呈现共线性关系。 结论 五指山猪的MHC Ⅱ类分子基因可能具有特殊的遗传学起源。
实验动物是生命科学研究的基石，其作为人类生理、病理及疾病治疗的替代模型，在基础研究、药物开发和转化医学中具有不可替代的作用。肠道菌群是由细菌、真菌、病毒以及单细胞生物等构成的复杂微生物类群，其定植于宿主肠道内，与宿主正常生理代谢功能的维持和生命健康密切相关。有研究表明，肠道菌群组成结构的紊乱可引发肥胖、糖尿病、高血压、炎症性肠病以及阿尔茨海默病等多种疾病。因此，针对实验动物开展肠道菌群的特征性分析不仅有助于提升实验结果的可靠性，而且将有助于动物实验结果的转化应用。性别差异是生物学研究中的重要变量，其对实验动物的生理功能、代谢特征及肠道菌群组成均具有显著影响。然而，研究人员在较多生物学研究中存在明显的实验动物性别偏好性，这极大地限制了研究结果的普适性。本文对小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、犬、猫、非人灵长类动物、小型猪和鸡这10种生命科学实验中常用的实验动物的肠道菌群组成结构特征进行归纳总结，并对部分实验动物肠道菌群的性别差异进行分析。此外，针对实验动物与人类肠道菌群的对比分析，还为基于实验动物的比较医学研究提供了新视角。综上，相关研究成果在加深科研人员对不同实验动物肠道菌群特征及其性别差异性认识的同时，也将为科学研究中实验动物的选用、性别特异性疾病动物模型的构建和结果分析提供指导和借鉴。
目的 通过组织实施换气次数检测实验室能力验证计划，探索实验动物设施环境领域能力验证方式，初步了解相关实验室在标准应用及检测水平的现状，规范换气次数检测方法，确保检测结果的准确性和可靠性。 方法 2023年9—11月，中国食品药品检定研究院负责组织开展实验动物设施换气次数检测的实验室能力验证计划（编号NIFDC-PT-417）。此次能力验证计划的现场测试分为两个部分：笔试和实际操作。笔试采用开卷形式，判断题着重考察参加者对标准条款的掌握情况，应用题则是通过构建模拟检测场景考察实验人员对数据处理的应用；实际操作按照中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）相关准则，通过分割水平样品对的形式，准备2个实验房间作为能力验证样品。2个房间均按照CNAS相关要求，经过均匀性、稳定性测试，并且测试结果合格。参与能力验证的实验室需要对这2个实验间各进行3次测试，要求在规定时间内完成换气次数的检测和计算，并提交本次检测的结果报告单和原始记录。 结果 共有27家实验室报名并参加本次能力验证，均在规定时间内反馈结果，所有参测实验室的结果均被评定为满意。 结论 本次能力验证客观且科学地评估了国内部分实验室在换气次数方面的检测能力，有效地促进了行业整体检测水平的提升，为监管部门规范检测机构提供了技术支撑，为委托单位购买检测服务提供了可靠的参考依据。通过本次能力验证，组织方发现部分实验室对仪器的校准及校准结果的利用不够充分，未来需进一步完善相关标准，以提高检测的准确性和可靠性。
目的 建立大鼠骨关节炎模型，研究秦皮素对骨关节炎大鼠的抗炎作用及机制。 方法 18只8周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：空白组大鼠右膝关节腔注射50 μL生理盐水并连续1周；模型组和干预组大鼠右膝关节腔注射碘乙酸钠（monosodium iodoacetate，MIA）造模，干预组再注射秦皮素（5 mg·kg-1·d-1）并连续干预1周。药物干预后4周，采集腹主动脉血，安乐死动物后采集膝关节软骨。采用苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色和甲苯胺蓝染色进行膝关节软骨的组织病理学观察以及Mankin和OARSI评分，并用micro-CT扫描系统比较分析每组膝关节的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目。采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清中多种炎症因子［肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）］以及软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein，COMP）的表达。采用蛋白质印迹法测定膝关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38（mitogen-activated protein kinase p38，p38 MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phosphorylation-p38 MAPK，p-p38 MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、磷酸化JNK氨基末端激酶（phosphorylation-JNK，p-JNK）的表达。 结果 大鼠膝关节软骨切片染色显示，模型组的关节面缺损严重，干预组的软骨破坏相对减轻。micro-CT显示，干预组的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目均明显高于模型组（P＜0.05）；模型组的Mankin评分明显高于空白组（P＜0.05），干预组的Mankin评分明显低于模型组（P＜0.05）；而干预组的OARSI评分明显低于模型组（P＜0.05）。酶联免疫吸附试验结果显示，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COMP含量均明显高于空白组（均P＜0.05），而干预组含量明显低于模型组（均P＜0.05）。蛋白质印迹结果显示，干预组膝关节软骨组织中p-p38 MAPK和p-JNK表达水平明显低于模型组（均P＜0.05），而模型组的p-p38 MAPK和p-JNK蛋白表达水平明显高于空白组（均P＜0.05）。 结论 秦皮素药物干预可能通过p38 MAPK通路对碘乙酸钠诱导的骨关节炎模型大鼠发挥治疗作用。
药物成瘾也被称为药物依赖或物质使用障碍，是一种慢性复发性脑疾病，其主要特征为强迫性地寻求和使用药物以及失去对用药的控制能力。长期摄入成瘾物质会导致生理和心理上的依赖，一旦停止使用，患者便会经历一系列强烈的不适反应，如焦虑、失眠、恶心、呕吐等，同时还会产生对药物的强烈渴求。药物依赖分为躯体依赖和精神依赖。躯体依赖也被称为生理依赖，是指因反复使用成瘾性药物而导致的病理性适应状态，其在停药后会产生严重的躯体症状，即戒断综合征。精神依赖也被称作心理依赖，是指使用者对成瘾性药物在心理层面的渴求，以获取服药后的特殊快感，并需要定期或持续使用以维持这种欣快感。成瘾机制复杂，受到遗传、环境等多种因素的影响，并涉及记忆、奖赏和决策等高级神经活动。目前在药物成瘾领域仍缺乏有效的治疗手段。面对复杂的成瘾问题，实验动物研究是不可或缺的。合理运用动物行为模型来模拟人类药物成瘾的情况，可以促进对成瘾机制和脑科学奥秘的深入探索与研究。本文以啮齿类动物为主，介绍了与躯体依赖和精神依赖相关的多种动物实验模型，包括躯体依赖模型、行为敏化模型、条件性位置偏爱模型、药物辨别模型和自身给药模型的构建原理、方法和流程，同时对比各实验模型的特点，论述相关模型在揭示成瘾机制方面的适用条件，旨在为成瘾机制的研究和治疗手段的开发提供支持。
病证结合动物模型是探究中医证候本质的重要研究工具。目前，动物模型的构建手段、评价方法等已初步具备规范化发展的基础条件。气阴两虚证是心血管疾病中常见的中医证型，是致使心血管疾病发生、病理产物产生的重要病因，是导致心血管疾病缠绵难愈，甚至诱发他病的重要病机。建立具有气阴两虚证特色的心血管疾病动物模型以及客观规范的评价体系，已成为现代心血管疾病研究的重要内容。近年来，关于心气阴两虚证动物模型的构建和评价研究有所增长，但是其构建方法和评价标准却各不相同，且与其他动物模型相比，心气阴两虚证动物模型的构建和评价研究的文献量较少，缺乏统计与整体性分析。因此，从心气阴两虚证的科学内涵出发，本文系统综述了该证候动物模型的评价体系，涵盖宏观表征评估、理化指标与客观评价、以方测证等多维度方法；阐述了具体的模型构建策略，包括单因素诱导法（睡眠剥夺法、慢性间歇性缺氧法、动脉阻塞法、高盐饲料喂养法）及复合因素诱导法（睡眠剥夺联合药物法、慢性间歇性缺氧联合药物法、力竭游泳联合药物法）；同时列举了各模型在研究中的应用实例，深入分析了当前模型构建与评价中存在的问题，并提出优化方向，例如推广复合因素诱导策略、提升评价标准的客观性等。本文旨在为构建符合中医特色的心气阴两虚证动物模型提供理论参考，进而为中医药防治心血管疾病奠定科学基础。
目的 观察比较不同浓度环磷酰胺（cyclophosphamide， CTX）诱导小鼠早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）模型的效果并探讨损伤机制。 方法 32只6~8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为4组，每组8只，分别用75 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX+12 mg/kg 白消安（Busulfan）和同体积生理盐水腹腔单次注射来建立POI模型，测定每组小鼠的卵巢系数、血清中雌二醇（estradiol，E2）和卵泡刺激素（follicle stimulating hormone，FSH）水平，并通过蛋白质印迹法检测不同造模浓度条件下卵巢组织内NAD依赖性蛋白脱酰酶5（NAD-dependent deacetylase sirtuin-5，SIRT5）和叉头框蛋白O3a（forkhead box protein O3a，FOXO3a）蛋白表达水平的变化规律。筛选最佳造模浓度后，将40只6~8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为5组，每组8只；以生理盐水作为对照，用120 mg/kg CTX造模后第1、2、7、14天，通过蛋白质印迹法检测不同造模时间内卵巢组织中SIRT5和FOXO3a蛋白表达水平的变化规律。 结果 与生理盐水对照组比较，不同浓度的CTX（75 mg/kg和120 mg/kg）和120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan均可以诱导小鼠出现POI损伤，其中120 mg/kg CTX造模小鼠的卵巢系数（P<0.001）和E2水平变化较小（P<0.05），120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan组小鼠被毛粗糙，光泽度下降，反应迟钝，状态最差。与生理盐水对照组相比，75 mg/kg CTX造模组小鼠的卵巢组织中FOXO3a表达显著下调（P<0.05），SIRT5表达没有显著变化（P＞0.05），而120 mg/kg CTX造模组的SIRT5（P<0.05）和FOXO3a（P<0.05）表达均显著下调。120 mg/kg CTX造模后第2和7天，SIRT5（P<0.01）和FOXO3a（P<0.001）表达均显著下调，且第7天时表达水平变化最大（SIRT5，P<0.000 1；FOXO3a，P<0.000 1）。 结论 120 mg/kg CTX诱导小鼠POI模型的卵巢损伤小于75 mg/kg CTX诱导的POI模型，并且120 mg/kg CTX造模第7天的SIRT5和FOXO3a表达变化最为显著，其作用机制可能与SIRT5-FOXO3a通路活性受抑制相关。
动物实验是生命科学与医学研究的重要环节，但单一动物实验研究因样本量小、设计异质性高、重复性差等固有局限，其结果的外推性与可靠性常受到质疑，从而影响了研究成果向临床的有效转化。系统评价（systematic reviews，SR）和Meta分析（meta-analysis）是整合现有研究证据、提升结论稳健性的关键方法。然而，目前应用于动物实验领域的SR和Meta分析在实施过程与报告撰写上尚缺乏统一规范，导致其研究质量参差不齐，在一定程度上削弱了其证据价值。为解决此问题，本文系统梳理了动物实验SR与Meta分析的报告撰写流程，并提出一套兼顾科学性与实用性的规范化建议。文章内容覆盖了从研究前期准备［包括构建PICO（population， intervention， comparison and outcome）问题、评估可行性与方案预注册］到报告主体各部分的撰写要点。在核心的方法学章节，本文详细论述了如何基于PRISMA（Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analysis）声明，并结合ARRIVE指南（Animal Research： Reporting of in Vivo Experiments）、SYRCLE（Systematic Review Centre for Laboratory Animal Experimentation）动物实验风险评估工具等相关指南与工具，具体实施文献检索、纳入和排除标准制定、数据提取与偏倚风险评估等环节。对于结果呈现，文章提出了借助流程图与特征表进行清晰、透明化展示的策略。在讨论部分，本文重点探讨了如何科学解读合并效应、深入分析异质性来源和评估发表偏倚影响，并审慎论述动物实验结果向临床外推的有效性与局限性。此外，本文还建议引入GRADE（Grading of Recommendations Assessment， Development and Evaluation）方法对最终的证据质量进行综合分级。本文对报告撰写全流程进行了模块化解析，期望为相关领域研究者提供一份清晰、可行的实践指南，以促进动物实验SR和Meta分析的规范化发展，提升其在科研决策与转化医学中的应用价值。
卵巢具有卵泡发生与激素分泌两大功能，与女性的生殖能力密切相关。卵巢衰老表现为卵巢形态改变、卵子数量减少和激素水平变化，不仅导致女性生育力下降，也被认为是多器官衰老的始动因素。此外，卵巢衰老伴随的性激素分泌紊乱还可能诱发心血管疾病、睡眠障碍、潮热等疾病和症状。由于社会压力与自身职业规划等因素的影响，现代女性的生育年龄普遍延迟，而卵巢功能的衰老进程却不会随年龄的增加而减缓。许多女性面临着想要生育时，却已错过最佳适育年龄，出现不孕不育等问题。这使人们日益关注延缓卵巢衰老的研究。非人灵长类实验动物在进化上与人类的亲缘关系最为接近，与人类基因组的序列同一性高达93%，因此在生理代谢、生殖内分泌、发育衰老等研究中具有其他模式动物无法比拟的优点，在非人灵长类实验动物上得到的研究结果转化应用到人类医学上也更为可靠。本文首先从卵巢衰老与治疗现状为切入点，概述非人灵长类实验动物作为卵巢衰老研究模式动物的优势，接着从生殖内分泌激素水平、卵巢的形态结构与功能、卵巢衰老的其他生理变化等方面。综述了非人灵长类实验动物应用于卵巢衰老研究的进展，并对存在的问题与展望进行总结，以期对读者有所帮助。
类器官共培养模型（organoid co-culture model）作为一种重现三维微环境以研究细胞间相互作用的新型工具，近年来在生物医学研究中展现了显著的应用潜力。该模型通过模拟体内组织的微环境，能够为研究细胞间复杂互动提供更为精准的实验平台，尤其在肿瘤免疫逃逸机制、药物敏感性测试、神经退行性疾病的病理特征揭示等方面具有重要价值。然而，类器官共培养模型在标准化操作、规模化培养、伦理规范和未来发展方向等方面仍面临诸多挑战，特别是在实验动物学领域，如何有效地将类器官与传统实验动物模型相结合，以及如何在不同研究需求中选择合适的模型并探索其替代潜能，仍是当前亟待解决的问题。在伦理审批和动物实验替代方面，类器官共培养模型提供了一种更加符合“替代、减少、优化（replacement，reduction，refinement，3R）”原则的实验方案，可能成为替代传统实验动物模型的重要工具。为此，本文回顾了该领域的最新进展与面临的关键挑战，详细描述了类器官共培养模型的构建方法，并阐述了其在发病机制研究和药物筛选中的应用。文章还系统比较了类器官共培养模型与传统实验动物模型的差异，探讨了二者在具体应用场景中的选择依据。此外，本文讨论了类器官共培养模型在实验动物替代中的潜在价值，并展望了该技术未来的发展趋势。通过这些讨论，本文旨在推动类器官共培养技术的创新与发展，并为未来相关研究提供新的视角和科学依据。
职业健康是一门致力于识别、评估、预测和控制工作场所内的职业性有害因素以及这些因素对健康潜在影响的科学。其核心目标是通过有效的预防措施和保护机制，保障劳动者的安全，降低职业性有害因素给健康带来的风险，从而促进从业人员在职业活动中的身体健康、心理健康，并增进其社会福利。建设项目职业健康防护设施“三同时”（以下简称职业健康“三同时”）即建设项目的职业病防护设施应与主体工程同时设计、同时建设、同时投入生产和使用。职业健康“三同时”实施的过程包括了职业病危害预评价、职业健康防护设施的设计，确保其符合职业病防治的要求。在建设项目的施工阶段，职业健康防护设施必须与主体工程同时施工，确保设施的完整性和有效性。最后，由建设单位组织对职业病危害控制效果进行评价及职业健康防护设施验收，以保障员工的职业健康。实施建设项目职业健康防护“三同时”是国家的强制性规定，如违规将会面临罚款、强制性停工等后果。然而，对于一些实验动物机构而言，如何实施建设项目职业健康防护设施“三同时”，仍然是个难点。本文通过介绍职业健康“三同时”的发展历程、实验动物机构履行建设项目职业健康“三同时”的意义及具体实施步骤，旨在为实验动物机构完成职业健康“三同时”提供有效的信息和具体的实施方法。
目的 采用两种浓度的乙醇溶液损伤构建宫腔粘连（intrauterine adhesions，IUA）小鼠模型，通过表型比较优化更稳定的IUA造模方法。 方法 将20只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分为2组，即95%乙醇损伤组和50%乙醇损伤组。利用自身对照法，向左侧子宫角灌注乙醇溶液制作IUA模型，向右侧灌注生理盐水作为假手术。每组分别于造模后第7天和第15天各安乐术处死5只小鼠，摘取子宫，通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察子宫内膜病理变化，Masson染色观察子宫内膜纤维化程度。利用实时荧光定量PCR检测子宫组织中纤维化标志物和促炎因子的表达情况。 结果 造模后第7天，与假手术侧相比，小鼠损伤侧子宫明显失去弹性，炎症浸润显著增强，且纤维化程度显著增高（P<0.05）；95%乙醇损伤组小鼠的右侧子宫内膜厚度显著下降（P<0.05），而50%乙醇损伤组小鼠的右侧内膜厚度无明显改变（P>0.05）；50%乙醇损伤组的右侧子宫组织纤维化标志分子Ⅳ型胶原α1链（collagen type Ⅳ alpha 1 chain，Col4A1）、α-平滑肌肌动蛋白（α- smooth muscle actin，α-SMA）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β），以及促炎因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的表达水平均显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组的右侧子宫组织相同指标虽有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。造模后第15天，与假手术侧相比，两个乙醇损伤组的子宫组织病理学变化均不明显；50%乙醇损伤组子宫组织中Col4A1、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平仍显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组子宫组织仅IL-1β显著升高（P<0.05）。 结论 向子宫角灌注95%乙醇溶液制作IUA小鼠模型的子宫组织病理学改变比50%乙醇损伤组明显，适合进行组织病理学研究。但灌注50%乙醇溶液后小鼠子宫组织中纤维化标志物和促炎因子表达水平升高较95%乙醇损伤组更明显，提示50%乙醇溶液构建的IUA小鼠模型更适合分子病理学研究。
目的 研究不同光照时长对发育期NIH小鼠体重和学习记忆能力的影响。 方法 实验选取体重相近的发育期NIH小鼠40只，雌雄各半。小鼠经每天12 h光照时长适应性饲养1周后，被随机分为每天0、6、12、18、24 h光照时长组，每组8只，实验周期为7周，其中前5周为不同光照时长条件下的饲养阶段，后2周为行为学实验阶段。通过体重监测以及T型迷宫、新位置识别和八臂迷宫等行为学实验，分析光照时长对小鼠体重和学习记忆能力的影响。 结果 在光照处理期间，各组小鼠间的体重变化无显著差异（P＞0.05）；在光照处理第2周和第3周，每天24 h光照时长组小鼠的体重增长量显著高于每天0 h和6 h光照时长组（P＜0.05）。在光照处理5周后，T型迷宫实验中，每天0 h光照时长组小鼠的潜伏期时间极显著长于每天12 h光照时长组（P＜0.01）；每天24 h光照时长组小鼠的潜伏期时间显著长于每天12 h光照时长组（P＜0.05）。新位置识别实验中，每天12 h光照时长组小鼠的辨别指数和新位置观察时间均长于其他组，且与每天18 h光照时长组差异极显著（P＜0.01），与每天24 h光照时长组差异显著（P＜0.05）；八臂迷宫实验中，每天12 h光照时长组小鼠找到饲料的时间、参考记忆错误比率和工作记忆错误比率均短于每天0 h光照时长组，且差异显著（P＜0.05）；而每天24 h光照时长组小鼠的工作记忆错误比率高于每天12 h光照时长组，且差异显著（P＜0.05）。 结论 每天24 h光照会影响NIH小鼠的体重增长，而每天光照时长超过18 h或低于6 h会减弱NIH小鼠的学习记忆能力。
随着国内实验动物行业的飞速发展，动物实验成为高校科研成果产出和课堂教学的重要辅助手段，实验动物从业人员队伍也日益壮大。虽然近年来国家开始重视实验动物从业人员职业健康，并出台了相关的法规政策，但是现阶段高校针对实验动物从业人员的职业健康风险防控还处于薄弱环节。因此，笔者围绕高校实验动物研究中心管理规范，通过走访、座谈以及学术交流，对国内9家普通高校实验动物从业人员的职业健康管理与防护现状进行了深入调研，揭示了高校实验动物从业人员面临的5大职业健康风险，包括实验动物过敏症、人兽共患传染病、机械性损伤、化学性刺激以及心理因素，指出当前高校普遍存在管理体系不健全、风险评估机制缺失和防护设施不足等核心问题。针对上述问题，本研究提出了三级防控体系：在高校层面，需健全制度并加大经费投入；在实验动物中心层面，应建立动物生物安全实验室，并强化危险源管控、应急预案演练与健康监护；在实验动物从业人员层面，需规范防护装备使用，参与职业健康培训，严格执行安全操作规程，及时上报职业暴露事件。在多方协作的基础上，笔者尝试分析并探讨构建国内普通高校科学、高效的职业健康保障体系的可行路径，以期为实验动物行业的可持续发展提供理论支撑与实践参考。
非人灵长类因其与人类在遗传学和生理学上的高度相似性，成为生命科学研究和生物医药开发的关键性实验动物，不仅为神经系统疾病和传染病的机制研究提供理想平台，还被广泛用于大分子药物的临床前安全性评估，被誉为“金标准”。然而，这种生物学相似性也导致从业人员因接触非人灵长类实验动物或其组织、体液而面临较高的人兽共患病传播风险。结合近年来国内外人兽共患病暴发情况及国家生物安全法颁布实施的背景，本文综述了非人灵长类实验动物从业人员面临的职业风险因素（包括生物因素、化学因素、物理因素）、常见的人兽共患病及其病原体分类、传播途径、危害程度，以及从业人员职业危害暴露的处理方式，进而提出建立多维防控体系：（1）风险评估与应急处理，即通过职业健康安全委员会（Occupational Health and Safety Committee，OHSC）定期识别危险源，制定暴露后紧急处理流程 ；（2）管理体系优化，即完善设施设计、个人防护装备配置，并强化从业人员健康监护与疫苗接种 ；（3）技术培训与规范操作，即开展非人灵长类实验动物行为学、生物安全操作等专项培训，推广智能监控技术以减少攻击性事件等措施。本文旨在提高非人灵长类实验动物从业人员的健康安全意识，加强人员个人防护及专业技能操作的规范性指引，从而保障从业人员健康安全，降低职业暴露率，有效预防实验动物相关职业病。
目的 利用辅助生殖技术挽救生殖障碍的基因修饰小鼠品系，为完善珍贵实验小鼠品系的拯救技术更新提供参考。 方法 对28种不同品系的9～18月龄不育雄性小鼠实施体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）技术，即通过观察不育雄性小鼠的精子密度、精子活动等指标，选择活力较强的精子用于IVF-ET实验，在仔鼠出生后统计受精率、异形卵率和仔鼠出生率。对12种不同品系的8～18月龄不孕雌性小鼠实施优化的卵巢移植技术，即选取相同背景的6周龄雌性小鼠作为受体小鼠，摘除受体小鼠一侧完整的卵巢并结扎其另一侧输卵管，然后分离出供体小鼠一侧卵巢，将其原位植入受体小鼠摘除卵巢的一侧。术后21 d将受体小鼠与相同背景的8周龄野生型雄性小鼠合笼繁育，待仔鼠出生后，统计卵巢移植受体妊娠率、受体活产率等数据。 结果 利用IVF-ET技术成功挽救28种小鼠品系，雄性小鼠最大年龄为18月龄。首轮IVF-ET实验成功率为89.29%（25/28）。生殖障碍雄性小鼠IVF的平均受精率为（51.01±14.97）%，异形卵率为（9.03±5.28）%，仔鼠出生率（18.60±7.03）%。40只卵巢移植受体小鼠中39只存活，卵巢移植受体妊娠率为33.33%（13/39），卵巢移植后受体活产率为17.95%（7/39）。采用卵巢移植技术成功挽救4种小鼠品系，其中雌性小鼠最大年龄为18月龄；另外，8种品系因最终未获得存活至性成熟的子代小鼠而未被挽救。 结论 针对不同原因引起的生殖障碍雄性小鼠，特别是对于错过最佳繁育年龄的小鼠，IVF-ET技术可有效进行品系挽救，获得子代小鼠。针对老龄雌性小鼠的品系挽救，卵巢移植技术可作为重要备选方案，但成功率相对IVF-ET技术较低，存在一定实验风险。
