目的 为保证研究数据的可靠性，建立SD大鼠90 d喂养试验的背景数据。 方法 汇总2020—2023年国家药物安全评价监测中心的6个独立的SD大鼠90 d喂养试验中空白对照组动物（120只SPF级4周龄SD大鼠，雌雄各半，仅给予普通鼠全价颗粒饲料）的背景数据。检疫期结束后，继续观察大鼠90 d，之后腹腔注射舒泰（50 mg/mL）麻醉、取血、处死并解剖。通过分析空白对照组数据，建立SD大鼠相关背景数据库。 结果 雄性和雌性大鼠的平均体重均稳步增长，雄性大鼠体重增长幅度更为明显。90 d内雄性和雌性大鼠平均体重分别增长至500 g和300 g以上。3周后，雄性大鼠每日平均摄食量基本稳定在25~28 g/只，雌性大鼠每日平均摄食量基本稳定在16~19 g/只。所有动物的食物利用率自实验第1周开始逐渐下降。白细胞分类计数结果中，雌性与雄性白细胞（white blood cell，WBC）、中性粒细胞（neutrophil，Neut）、淋巴细胞（lymphocyte，Lymph）、单核细胞（monocyte，Mono）的数值差异有统计学意义（P <0.001），但中性粒细胞百分率（neutrophil percentage，%Neut）、淋巴细胞百分率（lymphocyte percentage，%Lymph）、单核细胞百分率（monocyte percentage，%Mono）两性别之间差异无统计学意义（P >0.05）。雄性动物的平均红细胞数（red blood cell count，RBC）、血红蛋白浓度（hemoglobin，HGB）、红细胞比容（hematocrit，HCT）、血小板数（platelet count，PLT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）和活化部分凝血激酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）高于雌性（P <0.05）。雄性大鼠平均丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、肌酸磷酸激酶（creatine phosphokinase，CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、葡萄糖（glucose，GLU）、甘油三酯（triglyceride，TG）数值显著高于雌性（P <0.05）。雄性动物的尿pH值在5.0~8.5，雌性动物尿pH值在6.5~9.0。绝大多数雄性动物的尿比重低于1.020，绝大多数雌性动物的尿比重低于1.015。雄性动物各脏器（肾上腺、生殖器官除外）质量均高于雌性（P <0.001），而雌性动物的脏体比（肾脏、生殖器官除外）高于雄性（P <0.001）。 结论 总结国家药物安全评价监测中心6项90 d喂养试验中未给药对照组SPF级SD大鼠的体重、摄食量、血液学、血清生化各项指标的背景参考值范围，可为相关研究提供重要的参考数据。梳理大鼠背景性和自发性的组织病理学改变，有助于后续研究的规范化和标准化，以及对异常结果的评判分析。
目的 开发α-1，3半乳糖苷转移酶基因敲除（α-1，3-galactosyltransferase gene-knockout，GTKO）/人CD55（human CD55，hCD55）转基因的基因编辑异种器官移植供体猪并进行功能验证。 方法 利用成簇的规律间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）/CRISPR相关蛋白核酸酶9（CRISPR-associated nuclease 9，Cas9）、PiggyBac转座子技术和体细胞克隆技术，构建GTKO/hCD55基因编辑的滇南小耳猪，通过Sanger测序、实时荧光定量PCR、流式细胞术、免疫荧光实验、重亚硫酸盐测序、抗原抗体结合实验和补体依赖的细胞毒性实验分析其表型及功能。 结果 将基因编辑载体PX458和PiggyBac转染至野生型胎猪成纤维细胞后，经嘌呤霉素药物筛选获得48个单细胞克隆，挑选2个单细胞克隆进行体细胞克隆，获得2个妊娠33 d的胎猪。F01胎猪的α-1，3-半乳糖基转移酶（α-1，3-galactosyltransferase，GGTA1）基因型为-17 bp和野生型（wild type，WT），F02胎猪的GGTA1基因型为-26 bp/+2 bp和-3 bp。两个胎猪的hCD55 mRNA表达量均显著高于WT猪（P＜0.01），以F02胎猪作为供体细胞来源进行连续克隆后获得11头存活仔猪，鉴定均为GTKO/hCD55基因编辑猪。这些猪的α-Gal抗原表达缺失，但hCD55出现弱表达或不表达的情况。因此，对hCD55基因的CpG岛进行甲基化分析，结果表明在不表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛被高甲基化，而表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛未被甲基化或部分被甲基化。对hCD55基因的CpG岛进行密码子优化降低CG含量后，可实现hCD55基因的稳定表达。此外，抗原抗体结合实验表明人IgM结合到GTKO/hCD55基因编辑猪成纤维细胞的数量显著小于WT猪（P＜0.01）；补体依赖的细胞毒性实验表明GTKO/hCD55猪的成纤维细胞成活率明显高于WT猪（P＜0.01）。 结论 成功获得了GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪，并通过密码子优化降低了hCD55基因CpG岛的CG含量，从而有效避免甲基化导致的基因表达沉默。本研究可为供体猪的开发提供借鉴，将指导后续异种器官移植研究。
黑水虻（Hermetia illucens L.）作为一种全球广泛分布的资源昆虫，原生于美洲热带区域，现经自然扩散与人为传播，已在中国广东省、海南省等多地稳定分布。近年来，因为黑水虻环境适应性强、资源转化效率高，在生态与生物资源领域价值突出，同时在有机废弃物转化和高价值生物产品开发中也展现出显著优势，使其成为生物资源领域的研究热点。本文首先概述黑水虻的生物学特性与地理分布，明确其研究基础与资源潜力；其次介绍其高效稳定的繁殖体系与饲养基质优化技术，为标准化繁育和生长性能提升提供技术支撑。随后，进一步系统性综述黑水虻源性生物活性成分的医学与健康应用潜力，重点聚焦于其幼虫与蛹中提取的抗菌肽、功能性脂肪酸、壳聚糖、蛋白水解肽等活性物质具有广谱抗菌、抗氧化、抗炎，以及良好的生物相容性等特性。本文综合阐述了黑水虻的生物活性成分在多重耐药菌感染防治、抗炎抗氧化、癌症化学预防、组织修复和痤疮护理的药妆品等领域的应用研究进展。同时，阐释了黑水虻作为一种新型的无脊椎实验动物模型的优势，也阐述了其具有高效、可控且富有深度的特点，探讨了黑水虻在宿主-微生物相互作用、内源病毒进化等基础医学研究中的独特价值，为连接进化生物学、微生物生态学、免疫学及预防医学等多个学科提供了交叉研究平台。最后，本文分析了目前黑水虻研究与产业化进程中所面临的技术瓶颈，并且对未来产品开发策略、未来多学科交叉与临床转化方向进行了评述与展望，以期为该资源的深度开发和高效利用提供系统性参考。
肥胖是一种由能量摄入与消耗长期失衡引起的慢性代谢性疾病，该病可显著增加心血管疾病、2型糖尿病、多种癌症及早衰等风险。世界卫生组织最新统计结果显示，全球成年人超重与肥胖率持续攀升，肥胖已成为亟待精准防治的公共卫生难题。本综述系统总结了黑腹果蝇（Drosophila melangaster）作为模式生物在肥胖代谢研究中的独特价值与应用进展。果蝇因其生命周期短、饲养成本低、器官功能保守且与人类疾病相关基因高度同源，以及遗传工具完善，已成为解析肥胖与代谢紊乱的高效模式生物。通过给果蝇饲喂高糖/高脂饮食可稳定复制脂质蓄积、胰岛素抵抗、心脏代谢功能受损与寿命缩短等典型肥胖相关表型，并可与组织或细胞类型特异性遗传的操控结合，用于靶点发现与机制验证。在器官层面，果蝇脂肪体是储能、代谢感应和内分泌调节的中枢；绛色细胞参与脂质、固醇与超长链脂肪酸代谢及饥饿应答；中肠通过区域化吸收与肠内分泌的功能来整合来自营养物质与肠道微生物的信号；马氏管除排泄功能外，还通过调控能量感应信号通路的表达与葡萄糖转运体的膜定位，调控自身重吸收水平并影响代谢和生长发育；肌肉是果蝇主要的能量消耗器官，其中飞行肌的能量需求最旺盛，以血淋巴中的海藻糖和葡萄糖作为主要的能量供给，同时可动员糖原与脂肪酸参与能量代谢，并通过肌源性因子调节全身体内代谢稳态。此外，昼夜节律与进食时间可重塑外周时钟-代谢耦合，缓解饮食诱导的代谢紊乱。在跨器官内分泌调控网络中，脑部类胰岛素样肽生成细胞通过分泌胰岛素样肽降低血糖，从而促进代谢平衡；心侧体通过分泌脂动激素升高血糖并促进脂解，这两种内分泌系统相互拮抗，共同构成了果蝇体内关键的代谢稳态调控轴。脂肪体与肠道通过释放非配对蛋白2、限制素及类脂联素样因子，按营养状态调节胰岛素样肽的分泌，形成“肠-脂肪体-脑-外周器官”的多层次反馈环。综上所述，果蝇凭借其在器官功能与代谢通路的高度保守性，以及强大的遗传操作优势，为解析肥胖病因学机制、阐明跨组织信号网络、发掘潜在的转化靶点与评估营养/药物干预策略提供了高效、可拓展的实验平台。
炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一类由遗传、免疫、环境等多因素共同驱动的慢性复发性肠道疾病，主要包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis）和克罗恩病（Crohn's disease）2种类型。当前的IBD疾病研究中，小鼠与斑马鱼是最常用的实验动物。其中，斑马鱼凭借其独特优势成为理想模型。相较于啮齿类动物，斑马鱼具有生长周期短、繁殖能力强、体型小巧及胚胎透明等特点，不仅便于动态追踪连续性病理变化，还能高效实现高通量药物筛选。斑马鱼的基因与人类同源性达70%以上，肠道细胞组成及发育过程与人类高度相似，且其肠道菌群与人类肠道微生态特征接近，为研究肠道菌群与IBD的关联奠定了良好基础。随着生物技术的发展，基于化学诱导和基因工程构建的斑马鱼IBD模型，可精准模拟人类IBD的核心病理特征，如肠壁增厚、炎性细胞浸润、促炎因子表达升高等，该模型在揭示发病机制和开发靶向药物中发挥了关键作用。本文首先阐述斑马鱼的肠道特征及IBD模型特点，进而从遗传、免疫、环境与饮食、感染等维度深入剖析其在IBD发病机制研究中的应用，同时综述其在抗炎药物、益生菌、中药等治疗药物开发中的研究进展，旨在为科研工作者在临床前研究的各阶段合理运用斑马鱼模型提供参考，以推动IBD基础研究领域的深入发展，并期望能加速该领域的突破。
目的 针对传统实验动物中心管理中存在的笼位调度效率低、人员行为监管不到位、设备老化难升级等问题，通过应用多模态大模型技术升级现有实验动物中心的信息系统，实现实验动物笼位状态的实时感知、实验人员行为的智能监管以及业务流程的自动化处理，从而提升管理效率与精细化水平。 方法 浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心提出一个基于人工智能的实验动物中心信息化升级方式，能兼容不同饲养设备。该系统架构自下而上依次包括硬件设施层、核心算法层和应用功能层。硬件设施层配备摄像头和高速网络传输设备，用于笼位和人员信息采集；核心算法层通过多阶段图像预处理技术和多模态大模型识别技术，实现图片信息抽取和识别；应用功能层将识别结果和已有动物中心信息相整合，生成实时笼位占有热力图，直观、清晰地展示实验动物中心的笼位使用密度分布情况。 结果 基于人工智能的管理系统笼位识别准确率达98.5%，人员的实验服正确穿戴识别率为98.8%。每张图片平均处理时间约为3.7 s，笼位有效使用率提升23%，周转效率提高35%。此外，管理系统能够实时追踪并警告不规范行为，在通过智能化识别后，综合违规行为的发现次数暴露更多，违规行为发现率提升90.6%，持续使用3个月后，周平均违规行为较基线期下降54.0%。 结论 将多模态大模型应用于实验动物管理领域，可实现笼位标识实时监控与自动化管理，提升管理效率和精确度。系统整合视觉识别和行为分析等多源数据，可构建对实验人员的全方位智能监管体系，为科研机构提供高效、精准、价廉的管理工具，推动实验动物管理的智能化发展。
肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）是一种不可逆的致死性神经退行性疾病，其发病率与人口老龄化进程呈正相关。ALS以运动神经元的渐进性丧失为特征，导致患者肌肉无力、萎缩直至呼吸衰竭。ALS的致病机制涉及遗传和环境等多种因素，其中遗传因素尤为重要。目前已发现多个与ALS相关的致病基因，如铜锌超氧化物歧化酶1编码基因（Cu/Zn superoxide dismutase，Cu/Zn SOD1，又称SOD1）、转录反应DNA结合蛋白43编码基因（transactive response DNA-binding protein 43，TDP-43）、肉瘤融合蛋白基因（fused in sarcoma，FUS）、9号染色体开放阅读框72基因（chromosome open reading frame 72，C9orf72）等，这些基因的突变不仅见于家族性ALS中，也在散发性ALS中被发现。基于发现的ALS风险基因，通过多种方式建立了ALS动物模型，如转基因模型、基因敲入或敲除模型和腺相关病毒过表达模型，这些模型模拟了包括运动神经元丢失、泛素化包涵体形成及神经肌肉接头退变等人类ALS部分典型病理特征，但这些模型仍存在局限性：（1）单一基因突变模型难以全面模拟临床上散发性ALS的复杂多因子致病特征；（2）模式动物与人类在神经退行性疾病的微环境调节机制和病变速率上存在明显差异，这可能影响疾病表型的准确重现和药物效果的评估。为更全面地研究ALS的病理机制并推动有效药物的研发，构建和优化ALS疾病动物模型显得尤为关键。本综述归纳常用的ALS基因突变小鼠模型，分析各类基因修饰小鼠模型的表型和病理特征，包括常见转基因、基因点突变敲入、基因敲除以及通过腺相关病毒载体介导的过表达小鼠模型等；通过对比上述模型的优缺点，进一步讨论了其在ALS病理机制研究和药物开发中的具体应用情况，以期为ALS研究的模型选择提供参考。
目的 通过不同的肾脏切除手术方法建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型，并进行手术时间及存活时间比较和效果评价，以探索更优化的建模方法。 方法 根据不同手术方式分为腹腔入路先切2/3左肾后二期右全肾切除组（A组）、腹腔入路2/3左肾及右全肾同时切除组（B组）、背入路先切右全肾后二期2/3左肾切除组（C组）、背入路先切2/3左肾后二期切除右全肾组（D组）共4组，比较腹腔入路及背入路、分期及一次性肾脏切除术的SD大鼠生存曲线确定最优的肾脏切除手术方式后，选取24只8周龄雄性SPF级SD大鼠进行肾脏切除联合骨化三醇钙化诱导：其中实验组12只大鼠行背入路的左侧2/3肾切除后右侧全肾切除术，1周后腹腔注射骨化三醇溶液1 μg/kg，以进行主动脉钙化诱导；对照组12只大鼠行假手术后1周，腹腔注射含1%DMSO的生理盐水250 μL/kg。腹腔注射药物3个月后，观察各组大鼠的存活情况。麻醉状态下，采集各组大鼠的血液样本，测定血清磷和钙离子浓度、血清尿素氮和肌酐含量。安乐死大鼠后进行剖检，肉眼观察残余肾脏形态，HE染色观察肾冠状切面的病理学变化。另外取各组大鼠的全主动脉，茜素红S及von Kossa染色观察主动脉钙化程度，实时荧光定量PCR法检测大鼠主动脉组织中平滑肌肌动蛋白相关蛋白α （smooth muscle actin-associated protein α ，Sm22）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）基因表达情况，以评价建模效果。 结果 不同术式优化探索实验发现，背入路先切除2/3左肾再切除右侧全肾的D组大鼠的存活率最高，提示该术式是建立肾功能不全的慢性肾脏病模型的最佳手术方式。运用该术式联合高剂量骨化三醇注射的实验组大鼠血清钙离子浓度显著低于假手术对照组（P＜0.05），而血清磷离子浓度、血清肌酐及血清尿素氮含量则显著高于对照组（P＜0.05）。肾脏HE染色可见实验组大鼠肾脏发生明显器质性改变，其中实验组大鼠的肾小球计数比对照组明显减少（P＜0.05），提示肾衰竭模型成功建立。茜素红S染色可见实验组大鼠的主动脉中膜中有明显的色素沉着，von Kossa染色可见实验组大鼠的主动脉中膜层明显有硝酸银沉积，符合肾衰竭主动脉钙化的表现。实时荧光定量PCR表明，实验组大鼠的主动脉组织中Sm22表达水平下降（P＜0.05），OPN和Runx2表达水平上升（P＜0.05），提示主动脉平滑肌细胞由平滑肌表型向骨样表型转变，主动脉钙化模型诱导成功。 结论 采用背入路先切除2/3左肾，再进行右侧全肾切除，联合高剂量骨化三醇溶液摄入的方法，可成功建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型。该方案能缩短手术时间，提高建模成功率和动物存活率。
目的 观察比较不同浓度环磷酰胺（cyclophosphamide， CTX）诱导小鼠早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）模型的效果并探讨损伤机制。 方法 32只6~8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为4组，每组8只，分别用75 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX+12 mg/kg 白消安（Busulfan）和同体积生理盐水腹腔单次注射来建立POI模型，测定每组小鼠的卵巢系数、血清中雌二醇（estradiol，E2）和卵泡刺激素（follicle stimulating hormone，FSH）水平，并通过蛋白质印迹法检测不同造模浓度条件下卵巢组织内NAD依赖性蛋白脱酰酶5（NAD-dependent deacetylase sirtuin-5，SIRT5）和叉头框蛋白O3a（forkhead box protein O3a，FOXO3a）蛋白表达水平的变化规律。筛选最佳造模浓度后，将40只6~8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为5组，每组8只；以生理盐水作为对照，用120 mg/kg CTX造模后第1、2、7、14天，通过蛋白质印迹法检测不同造模时间内卵巢组织中SIRT5和FOXO3a蛋白表达水平的变化规律。 结果 与生理盐水对照组比较，不同浓度的CTX（75 mg/kg和120 mg/kg）和120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan均可以诱导小鼠出现POI损伤，其中120 mg/kg CTX造模小鼠的卵巢系数（P<0.001）和E2水平变化较小（P<0.05），120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan组小鼠被毛粗糙，光泽度下降，反应迟钝，状态最差。与生理盐水对照组相比，75 mg/kg CTX造模组小鼠的卵巢组织中FOXO3a表达显著下调（P<0.05），SIRT5表达没有显著变化（P＞0.05），而120 mg/kg CTX造模组的SIRT5（P<0.05）和FOXO3a（P<0.05）表达均显著下调。120 mg/kg CTX造模后第2和7天，SIRT5（P<0.01）和FOXO3a（P<0.001）表达均显著下调，且第7天时表达水平变化最大（SIRT5，P<0.000 1；FOXO3a，P<0.000 1）。 结论 120 mg/kg CTX诱导小鼠POI模型的卵巢损伤小于75 mg/kg CTX诱导的POI模型，并且120 mg/kg CTX造模第7天的SIRT5和FOXO3a表达变化最为显著，其作用机制可能与SIRT5-FOXO3a通路活性受抑制相关。
探讨中医证候动物模型不同的构建方法及其优劣势，并针对现有构建方法存在的问题提出优化策略，以期为构建既保有中医证候本质又符合现代科研规范的中医证候动物模型提供参考。本文以“中医”“证候”“动物模型”为关键词检索并阅览知网、万方以及维普数据库中有关中医证候动物模型的文章，继而系统梳理了当前中医证候动物模型主要构建方法的理论依据、技术特点及存在问题，并针对存在的问题提出相应的优化措施。中医证候动物模型的构建方法包括中医病因病机构建法、现代医学病因病理构建法以及中西医病证结合构建法。中医病因病机构建法以整体观为指导，通过模拟六淫致病、情志失调等外因来构建证候模型；该方法虽契合中医理论内涵、操作简便且可控性强，但存在造模成功率低、病因-证候拟合度不足等问题。现代医学病因病理构建法基于微观病理机制，采用药物干预、手术建模等可控性强的技术手段；该方法虽具有客观指标明确、可重复性优的特点，但存在偏离中医“证”的本质、安全性不足等缺陷。中西医病证结合法在证候本质还原度与技术可行性上呈显著互补性，在方法论上实现了中医基础理论与临床辨证思维的系统融合，并整合现代医学的客观评价体系，提升了西医病理机制与中医证候演变规律的临床吻合度；然而，该方法仍面临证候辨识标准模糊、疾病进展模拟失真等共性挑战。中医证候动物模型的构建虽面临理论适配性差、技术标准化欠佳等问题，但在验证方药疗效和推动中医药国际化方面仍具有不可替代的价值。未来应通过优化动物选择、完善制备方法理论依据、规范造模因素设置、明确造模成功标准等措施优化中医证候动物模型的构建。
动物实验在生物医药研究中广泛用于安全性评估、毒理学分析、疗效验证以及机制探索。近年来，由于动物实验伦理审查制度日趋严格、动物福利意识不断提升，同时为了推动更高效、低成本的药物研发，美国在2022年9月通过了食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）现代化法案2.0，首次取消了新药临床前研究必须进行动物实验的联邦强制要求。2025年4月FDA进一步提出，将在单克隆抗体等药物研发中采用人工智能计算模型、类器官毒性测试、3D微生理系统等一系列“新的替代方法”，从而逐步取代传统的动物试验模式。在这些新兴技术中，生物3D打印模型因其高仿生、高重现性和可规模化等特性，逐渐成为动物模型的重要替代和补充手段。本综述系统梳理了生物3D打印技术在生物医药领域的研究与应用进展：首先概述了生物3D打印的关键组成，包括生物材料的选择与功能化设计、多种打印策略的原理及特点，分析其在构建多细胞空间结构、微环境调控和细胞命运引导方面的优势；其次，介绍了生物3D打印模型在药物研发中的典型应用，包括通过构建肿瘤、传染病和罕见病等疾病模型实现对药效的高通量筛选，以及通过构建肝脏、心脏等器官特异性模型进行药物毒理学研究；再者，进一步探讨了生物3D打印在组织工程领域的应用范围，涵盖骨/软骨、皮肤、血管等多种功能性组织的构建，以及在再生替代等方面的最新进展。此外，本文还分析了生物3D打印模型与动物模型在疾病发生发展和药物作用机制、精准医疗、药物研发以及组织再生研究等领域的互补优势，讨论了二者交叉应用在提升建模准确性与生理相关性方面的潜力与挑战。综上，生物3D打印作为一种新兴的体外造模与制造技术，正逐步建立起涵盖疾病建模、药物筛选、毒性预测与组织再生的完整应用体系。
动物实验是生命科学与医学研究的重要环节，但单一动物实验研究因样本量小、设计异质性高、重复性差等固有局限，其结果的外推性与可靠性常受到质疑，从而影响了研究成果向临床的有效转化。系统评价（systematic reviews，SR）和Meta分析（meta-analysis）是整合现有研究证据、提升结论稳健性的关键方法。然而，目前应用于动物实验领域的SR和Meta分析在实施过程与报告撰写上尚缺乏统一规范，导致其研究质量参差不齐，在一定程度上削弱了其证据价值。为解决此问题，本文系统梳理了动物实验SR与Meta分析的报告撰写流程，并提出一套兼顾科学性与实用性的规范化建议。文章内容覆盖了从研究前期准备［包括构建PICO（population， intervention， comparison and outcome）问题、评估可行性与方案预注册］到报告主体各部分的撰写要点。在核心的方法学章节，本文详细论述了如何基于PRISMA（Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analysis）声明，并结合ARRIVE指南（Animal Research： Reporting of in Vivo Experiments）、SYRCLE（Systematic Review Centre for Laboratory Animal Experimentation）动物实验风险评估工具等相关指南与工具，具体实施文献检索、纳入和排除标准制定、数据提取与偏倚风险评估等环节。对于结果呈现，文章提出了借助流程图与特征表进行清晰、透明化展示的策略。在讨论部分，本文重点探讨了如何科学解读合并效应、深入分析异质性来源和评估发表偏倚影响，并审慎论述动物实验结果向临床外推的有效性与局限性。此外，本文还建议引入GRADE（Grading of Recommendations Assessment， Development and Evaluation）方法对最终的证据质量进行综合分级。本文对报告撰写全流程进行了模块化解析，期望为相关领域研究者提供一份清晰、可行的实践指南，以促进动物实验SR和Meta分析的规范化发展，提升其在科研决策与转化医学中的应用价值。
类器官共培养模型（organoid co-culture model）作为一种重现三维微环境以研究细胞间相互作用的新型工具，近年来在生物医学研究中展现了显著的应用潜力。该模型通过模拟体内组织的微环境，能够为研究细胞间复杂互动提供更为精准的实验平台，尤其在肿瘤免疫逃逸机制、药物敏感性测试、神经退行性疾病的病理特征揭示等方面具有重要价值。然而，类器官共培养模型在标准化操作、规模化培养、伦理规范和未来发展方向等方面仍面临诸多挑战，特别是在实验动物学领域，如何有效地将类器官与传统实验动物模型相结合，以及如何在不同研究需求中选择合适的模型并探索其替代潜能，仍是当前亟待解决的问题。在伦理审批和动物实验替代方面，类器官共培养模型提供了一种更加符合“替代、减少、优化（replacement，reduction，refinement，3R）”原则的实验方案，可能成为替代传统实验动物模型的重要工具。为此，本文回顾了该领域的最新进展与面临的关键挑战，详细描述了类器官共培养模型的构建方法，并阐述了其在发病机制研究和药物筛选中的应用。文章还系统比较了类器官共培养模型与传统实验动物模型的差异，探讨了二者在具体应用场景中的选择依据。此外，本文讨论了类器官共培养模型在实验动物替代中的潜在价值，并展望了该技术未来的发展趋势。通过这些讨论，本文旨在推动类器官共培养技术的创新与发展，并为未来相关研究提供新的视角和科学依据。
病证结合动物模型是探究中医证候本质的重要研究工具。目前，动物模型的构建手段、评价方法等已初步具备规范化发展的基础条件。气阴两虚证是心血管疾病中常见的中医证型，是致使心血管疾病发生、病理产物产生的重要病因，是导致心血管疾病缠绵难愈，甚至诱发他病的重要病机。建立具有气阴两虚证特色的心血管疾病动物模型以及客观规范的评价体系，已成为现代心血管疾病研究的重要内容。近年来，关于心气阴两虚证动物模型的构建和评价研究有所增长，但是其构建方法和评价标准却各不相同，且与其他动物模型相比，心气阴两虚证动物模型的构建和评价研究的文献量较少，缺乏统计与整体性分析。因此，从心气阴两虚证的科学内涵出发，本文系统综述了该证候动物模型的评价体系，涵盖宏观表征评估、理化指标与客观评价、以方测证等多维度方法；阐述了具体的模型构建策略，包括单因素诱导法（睡眠剥夺法、慢性间歇性缺氧法、动脉阻塞法、高盐饲料喂养法）及复合因素诱导法（睡眠剥夺联合药物法、慢性间歇性缺氧联合药物法、力竭游泳联合药物法）；同时列举了各模型在研究中的应用实例，深入分析了当前模型构建与评价中存在的问题，并提出优化方向，例如推广复合因素诱导策略、提升评价标准的客观性等。本文旨在为构建符合中医特色的心气阴两虚证动物模型提供理论参考，进而为中医药防治心血管疾病奠定科学基础。
实验动物是生命科学研究的基石，其作为人类生理、病理及疾病治疗的替代模型，在基础研究、药物开发和转化医学中具有不可替代的作用。肠道菌群是由细菌、真菌、病毒以及单细胞生物等构成的复杂微生物类群，其定植于宿主肠道内，与宿主正常生理代谢功能的维持和生命健康密切相关。有研究表明，肠道菌群组成结构的紊乱可引发肥胖、糖尿病、高血压、炎症性肠病以及阿尔茨海默病等多种疾病。因此，针对实验动物开展肠道菌群的特征性分析不仅有助于提升实验结果的可靠性，而且将有助于动物实验结果的转化应用。性别差异是生物学研究中的重要变量，其对实验动物的生理功能、代谢特征及肠道菌群组成均具有显著影响。然而，研究人员在较多生物学研究中存在明显的实验动物性别偏好性，这极大地限制了研究结果的普适性。本文对小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、犬、猫、非人灵长类动物、小型猪和鸡这10种生命科学实验中常用的实验动物的肠道菌群组成结构特征进行归纳总结，并对部分实验动物肠道菌群的性别差异进行分析。此外，针对实验动物与人类肠道菌群的对比分析，还为基于实验动物的比较医学研究提供了新视角。综上，相关研究成果在加深科研人员对不同实验动物肠道菌群特征及其性别差异性认识的同时，也将为科学研究中实验动物的选用、性别特异性疾病动物模型的构建和结果分析提供指导和借鉴。
目的 采用两种浓度的乙醇溶液损伤构建宫腔粘连（intrauterine adhesions，IUA）小鼠模型，通过表型比较优化更稳定的IUA造模方法。 方法 将20只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分为2组，即95%乙醇损伤组和50%乙醇损伤组。利用自身对照法，向左侧子宫角灌注乙醇溶液制作IUA模型，向右侧灌注生理盐水作为假手术。每组分别于造模后第7天和第15天各安乐术处死5只小鼠，摘取子宫，通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察子宫内膜病理变化，Masson染色观察子宫内膜纤维化程度。利用实时荧光定量PCR检测子宫组织中纤维化标志物和促炎因子的表达情况。 结果 造模后第7天，与假手术侧相比，小鼠损伤侧子宫明显失去弹性，炎症浸润显著增强，且纤维化程度显著增高（P<0.05）；95%乙醇损伤组小鼠的右侧子宫内膜厚度显著下降（P<0.05），而50%乙醇损伤组小鼠的右侧内膜厚度无明显改变（P>0.05）；50%乙醇损伤组的右侧子宫组织纤维化标志分子Ⅳ型胶原α1链（collagen type Ⅳ alpha 1 chain，Col4A1）、α-平滑肌肌动蛋白（α- smooth muscle actin，α-SMA）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β），以及促炎因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的表达水平均显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组的右侧子宫组织相同指标虽有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。造模后第15天，与假手术侧相比，两个乙醇损伤组的子宫组织病理学变化均不明显；50%乙醇损伤组子宫组织中Col4A1、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平仍显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组子宫组织仅IL-1β显著升高（P<0.05）。 结论 向子宫角灌注95%乙醇溶液制作IUA小鼠模型的子宫组织病理学改变比50%乙醇损伤组明显，适合进行组织病理学研究。但灌注50%乙醇溶液后小鼠子宫组织中纤维化标志物和促炎因子表达水平升高较95%乙醇损伤组更明显，提示50%乙醇溶液构建的IUA小鼠模型更适合分子病理学研究。
目的 获得五指山猪主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）Ⅱ类分子基因序列，并分析其遗传信息，探究五指山猪MHC的生物学功能。 方法 采集3头成年雄性五指山猪的脾脏样本，根据MHC Ⅱ类分子基因序列设计引物，采用RT-PCR法扩增五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的编码序列，通过Sanger测序确定MHC Ⅱ类分子基因序列，利用生物信息学软件分析五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的理化性质、系统进化关系、保守基序和结构域，以及染色体位置和共线性关系。 结果 共鉴定出8个五指山猪MHC Ⅱ类分子基因，分别为SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB、SLA-DMB、SLA-DMA和SLA-DOA。Sanger测序后确定MHC Ⅱ类分子基因序列，并将序列上传至GenBank获得登录号，分别为PQ182796、PQ182797、PQ182798、PQ182799、PQ182800、PQ182801、PQ182802和PQ164779。系统进化树分析表明，五指山猪6个MHCⅡ类分子基因与杜洛克猪、梅山猪、大白猪和巴马猪等不同品种猪的MHC Ⅱ类分子基因不在同一个分支上。生物信息学分析表明，MHC Ⅱ类分子大部分为疏水性蛋白，其相对分子质量为27 700 ~ 30 000，归于同一亚区的基因含有相似的保守基序，其中SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB和SLA-DMB基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱβ保守结构域，SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DMA和SLA-DOA基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱɑ保守结构域。8个MHC Ⅱ类分子基因散在分布于五指山猪的7号染色体长臂上，与人的3个基因之间具有共线性关系，而与杜洛克猪的5个基因之间呈现共线性关系。 结论 五指山猪的MHC Ⅱ类分子基因可能具有特殊的遗传学起源。
目的 建立大鼠骨关节炎模型，研究秦皮素对骨关节炎大鼠的抗炎作用及机制。 方法 18只8周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：空白组大鼠右膝关节腔注射50 μL生理盐水并连续1周；模型组和干预组大鼠右膝关节腔注射碘乙酸钠（monosodium iodoacetate，MIA）造模，干预组再注射秦皮素（5 mg·kg-1·d-1）并连续干预1周。药物干预后4周，采集腹主动脉血，安乐死动物后采集膝关节软骨。采用苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色和甲苯胺蓝染色进行膝关节软骨的组织病理学观察以及Mankin和OARSI评分，并用micro-CT扫描系统比较分析每组膝关节的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目。采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清中多种炎症因子［肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）］以及软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein，COMP）的表达。采用蛋白质印迹法测定膝关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38（mitogen-activated protein kinase p38，p38 MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phosphorylation-p38 MAPK，p-p38 MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、磷酸化JNK氨基末端激酶（phosphorylation-JNK，p-JNK）的表达。 结果 大鼠膝关节软骨切片染色显示，模型组的关节面缺损严重，干预组的软骨破坏相对减轻。micro-CT显示，干预组的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目均明显高于模型组（P＜0.05）；模型组的Mankin评分明显高于空白组（P＜0.05），干预组的Mankin评分明显低于模型组（P＜0.05）；而干预组的OARSI评分明显低于模型组（P＜0.05）。酶联免疫吸附试验结果显示，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COMP含量均明显高于空白组（均P＜0.05），而干预组含量明显低于模型组（均P＜0.05）。蛋白质印迹结果显示，干预组膝关节软骨组织中p-p38 MAPK和p-JNK表达水平明显低于模型组（均P＜0.05），而模型组的p-p38 MAPK和p-JNK蛋白表达水平明显高于空白组（均P＜0.05）。 结论 秦皮素药物干预可能通过p38 MAPK通路对碘乙酸钠诱导的骨关节炎模型大鼠发挥治疗作用。
椎间盘突出症是骨科的高发疾病，而作为其关键病理基础的椎间盘退行性病变（intervertebral disc degeneration，IDD）是一个以细胞外基质进行性降解、结构破坏与生物力学功能丧失为特征的复杂病理过程，不仅在人群中呈现出更高的患病率，更是导致全球人类慢性腰背痛与功能障碍的首要原因，造成了巨大的社会经济负担。尽管构建IDD动物模型对探索该疾病病理机制与推动转化研究具有重要意义，但目前关于IDD 的病因与病理生理机制尚未完全阐明，且人类与常见实验动物在脊柱解剖、生物力学及退变病程上存在显著差异，加之现有的IDD动物模型繁杂多样且缺乏统一标准。因此，本指南系统梳理了啮齿类动物、非人灵长类动物以及兔、绵羊/山羊、猪、犬等不同动物的IDD模型，重点阐述三类主流模型的建模原理：诱发性模型（如纤维环/髓核/终板损伤和机械力学损伤）可控性强、周期短，适用于模拟急性损伤与快速筛选疗法；自发性模型能更好地模拟人类与年龄相关的自然退变进程；基因修饰模型则为解析特定分子通路提供了有力工具。指南深入剖析了这些模型的关键技术要点、可重复性与临床相关性，并比较其优势、局限及适用研究场景，旨在引导研究者进行“以科学问题为导向”的精准模型选择。同时，为提升研究结果的深度与可比性，本指南提出了涵盖影像学、组织学、生物化学与分子生物学、生物力学及疼痛行为学等多维度的IDD动物模型实验终点评估体系与推荐观察时间窗，并明确了贯穿实验全程的“替代、减少、优化（replacement，reduction，refinement，3Rs）”伦理原则与动物福利要求。此外，指南还展望了结合单细胞组学、多尺度力学分析及加强疼痛表型评估等未来研究方向。本指南旨在为研究者在具体科学问题与资源条件约束下，如何规范化选择与应用IDD动物模型提供一套系统化、标准化的方法学框架，以期减少研究间的异质性，提升临床前研究成果的转化效率，促进本领域的高质量发展，最终为开发延缓乃至逆转IDD的创新疗法提供坚实的科学基础。
目的 报告2019年某实验猴养殖场中食蟹猴群暴发犬瘟热病毒的诊断情况。 方法 针对2019年底中国华南地区某实验猴养殖场送检的21只患病食蟹猴（出现面部红疹、皮屑、流鼻涕和腹泻等症状）的血清、皮肤红疹拭子和1只病死猴的抗凝全血、肝、肺、皮肤组织，共46份样品，采用实时荧光定量PCR法检测犬瘟热病毒基因片段，采用免疫组织化学染色法检测肺组织中犬瘟热病毒核蛋白表达。将病死猴的皮肤组织研磨过筛，取滤液接种于单层MDCK细胞系中培养分离病毒，将分离的病毒进行全基因组测序鉴定，采用Clustal Omega工具对亚洲不同犬瘟热病毒分离株进行比对和同源性分析，构建遗传发育树，并对其进行遗传进化分析。 结果 经临床追溯，患病的食蟹猴出现了与麻疹病毒感染食蟹猴类似的症状，剖检病死猴可见肺部有红色病变，大肠黏膜有明显出血。实时荧光定量PCR检测患病猴血清、皮肤红疹拭子及病死猴各组织样本中的犬瘟热病毒核酸结果均呈阳性，由标准曲线公式计算出皮肤组织中的病毒载量最高；免疫组织化学染色病死猴的肺组织显示犬瘟热病毒核蛋白聚集在肺泡上皮细胞、肺支气管和细支气管处；从病死猴皮肤组织中分离出1株犬瘟热病毒株，遗传进化分析表明其与越南犬中发现的亚洲1型CDV/dog/HCM/33/140816株亲缘关系最近，基因相似度达到98.86%。 结论 综合临床症状、核酸检测、病毒蛋白免疫组织化学法及全基因组测序分析结果，诊断该猴场的食蟹猴感染了犬瘟热病毒，建议将犬瘟热病毒纳为饲养猴群的监测项目之一。本研究还为进一步分析犬瘟热病毒的分子生物学特性提供了基础。
胃溃疡（gastric ulcer，GU）是消化系统的常见病、多发病和顽固性疾病之一。脾胃虚寒是GU最常见且难以治愈的一种证型，是医学研究领域的重点和难点。因此，构建科学合理且符合临床实际的脾胃虚寒型GU动物模型并制定客观有效的评价标准，对于深入研究GU的发病机制和治疗方法具有重要意义。本文通过系统梳理相关文献，对脾胃虚寒型GU动物模型的制备方法进行了全面介绍：首先介绍西医GU病理模型的构建方法，如幽门结扎法、水浸-束缚应激法、乙醇诱导法、乙酸诱导法等；阐述中医脾胃虚寒证候模型的建立方法，包括饮食失节法、苦寒泻下法、过度劳倦法、耗气破气法和过食酸味法等；重点讲述脾胃虚寒型GU病证结合模型的构建方法，包括双因素造模法和三因素造模法。同时，从多个角度总结了脾胃虚寒型GU动物模型的评价指标，包括动物体征表征（外观症状、动物行为和代谢指标）、组织形态与分子生物学相关指标（胃功能、氧化应激、炎性因子、其他细胞因子、凝血4项、肠道菌群检测），力求构建一个综合性的评价体系。本文进一步从方药反证的角度，通过分析方剂的药物组成和药理作用效果，推断其治疗的疾病动物模型所属的证型，从而验证动物模型是否构建成功。通过本文综述，以期为构建与临床实际高度契合、体现中医药特色的GU中医证候动物模型提供有力参考，从而推动GU中医证候研究和中医药治疗GU方法的深入探索，促进中医药在GU治疗中的应用和发展。
药物非临床生殖毒性试验多选用大鼠、家兔和食蟹猴等哺乳动物，而动物妊娠是目前影响非临床生殖毒性试验的关键环节，本文主要针对动物妊娠环节中存在的难点及应对方法进行讨论。大鼠可应用于生育力评估与早期胚胎发育毒性试验（Ⅰ段）、胚胎-胎仔发育毒性试验（Ⅱ段）和围产期毒性试验（Ⅲ段），可以通过阴道涂片法确定雌性大鼠的动情周期。在雌、雄大鼠按1∶1比例合笼过夜后，次日通过阴道栓检查来确认大鼠是否发生交配行为。家兔一般应用于胚胎-胎仔发育毒性试验（Ⅱ段），可通过观察雄性家兔和处于发情期的雌性家兔合笼后是否发生交配行为来确定受孕时间。家兔在生殖毒性动物试验中常出现雌兔发情不典型、不同批次间家兔发情情况差异显著、交配失败等问题，可通过延长光照时间、增加蛋白质摄入、选择合适的交配方式、改变饲养环境（雌兔和雄兔邻近饲养）等方式改善。非人灵长类动物一般应用于围产期毒性试验（Ⅲ段），准确判断雄性非人灵长类动物是否性成熟是其药物非临床生殖毒性试验的难点之一，可通过综合评估动物年龄、体重和睾丸体积等指标来判断它们是否性成熟。一般雄性猕猴年龄在4.5岁以上，体重大于4.5 kg，单侧睾丸体积超过10 mL，双侧睾丸总体积大于20 mL则表示性成熟。关于雌性非人灵长类动物是否妊娠，可通过超声检查是否能观察到明显孕囊进行判定，但这需要经验丰富的临床兽医制定完善的B超检查方法。综上所述，在非临床生殖毒性动物研究中，应根据不同种属动物的生殖系统解剖学特性，选择适合的检测/观察方法和结果判定标准，以确保动物成功交配，使非临床生殖毒性试验顺利开展。
根据《中华人民共和国药典》2020年版四部通则1145，降压物质检查是通过比较组胺对照品与供试品引起麻醉猫的血压下降程度，判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定的一项常见药品检验方法。当降压物质检查结果超过质量标准规定（out of specification，OOS），可能是由药品本身质量风险引起，也可能是源于检验过程中的错误操作。因此，开展OOS原因分析对于确认试验结果、评价药品质量尤为重要。降压物质检查采用猫作为实验动物，其稳定性相对于常规实验动物更差，且手术难度大、试验流程复杂，这些因素导致调查降压物质检查出现OOS原因的难度较大。通过查阅资料结合实际工作经验，本文主要通过以下5方面分析降压物质检查出现OOS的原因：（1）从标准判定、标准内容以及标准起草3个方面分析了药品标准对OOS的影响；（2）人员资质，包括岗前培训、试验操作是否遵循标准操作规程，以及仪器操作的能力；（3）猫作为降压物质检查所用实验动物，其生理特性、遗传背景及试验过程中出现的异常状态等因素；（4）标准品、试剂、受试物以及关键仪器多道生理信号仪；（5）包括动物麻醉、动静脉插管手术、给药、数据处理等试验操作。本文旨在为广大药品与生物制品检验同行，在分析药品降压物质检查过程中出现OOS的原因时，提供一些参考思路。
目的 构建脑海马区表达人源三突变淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）的阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）大鼠模型，为疾病机制和药物研究奠定基础。 方法 将24只12周龄SPF级雌性SD大鼠随机分成空白对照组、空载病毒组和实验组，每组8只；其中，实验组通过脑立体定位在海马区注射携带人源三突变APP和NanoLuc萤光素酶基因的腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）进行造模。采用活体成像法观察各组大鼠脑内的病毒表达情况，新事物识别实验检测各组大鼠的认知记忆能力，实时荧光定量PCR检测APP基因表达水平，HE染色观察脑组织病理，采用尼氏染色观察海马区病变情况，用免疫组织化学检测β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein，Aβ）沉积情况。 结果 活体成像显示实验组与空载病毒组大鼠脑部均检测到报告荧光。新事物识别实验发现实验组大鼠的认知记忆能力比对照组显著下降（P<0.01）。荧光定量PCR显示APP基因在实验组大鼠脑内表达水平显著增高（P<0.01）。重组AAV感染大鼠6个月后，脑组织HE染色和尼氏染色显示，实验组大鼠海马体CA1区神经元细胞和尼氏体数量减少而且排列混乱；免疫组织化学检测实验组大鼠海马CA1区及锥形细胞层可以看到明显的棕褐色沉淀，提示产生了Aβ沉积。 结论 通过脑立体定位技术联合AAV转入人源三突变APP基因成功构建的大鼠模型可体现出典型AD特征，该模型可为基于Aβ沉积的AD病理研究和药物治疗研究提供动物模型并奠定基础。
目的 比较年轻与老年C57BL/6J小鼠感染甲型H1N1流感病毒后肺组织中CD8+ T细胞在收缩期及记忆性免疫应答期的功能差异。 方法 摘取未行流感病毒感染的年轻（3月龄）与老年（24月龄）雌性C57BL/6J小鼠肺组织，制备单细胞悬液，分别用佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate，PMA）/离子霉素或分化簇（cluster of differentiation，CD）3/CD28抗体（T细胞抗原受体/共刺激信号）进行非特异性抗原刺激，通过流式细胞术对肺CD8+T细胞行细胞内细胞因子染色（flow cytometry intracellular cytokine staining，ICS）以检测其分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的能力。以490 PFU PR8流感病毒滴鼻感染年轻和老年C57BL/6J小鼠，28天后进行同源流感病毒的二次感染，于初次感染后第28天（收缩期）、第32天（记忆性免疫应答期）分离肺组织，采用流感病毒特异性MHC-Ⅰ四聚体染色法检测病毒特异性CD8+ T细胞在肺组织CD8+ T细胞中的比例，ICS法分析CD8+CD44high T细胞亚群TNF-α、IFN-γ及颗粒酶B（granzyme B）的表达。 结果 非特异性抗原刺激后，老年组小鼠的肺组织CD8+ T细胞中TNF-α、IFN-γ分泌能力显著高于年轻组（P＜0.05）。病毒特异性抗原刺激后，收缩期的两组小鼠间病毒特异性CD8+ T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzyme B的表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）；而在记忆性免疫应答期，老年组小鼠的病毒特异性CD8+ T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzyme B的表达水平均显著低于年轻组（P＜0.05）。 结论 老年小鼠肺部CD8+ T细胞在非特异性抗原刺激下免疫相关因子表达功能正常，但在抗原特异性记忆免疫应答阶段的免疫相关因子表达功能受损，提示衰老导致CD8+ T细胞免疫记忆形成或维持发生缺陷。
目的 拟从鳞状皮屑裸小鼠的皮肤上分离病原菌，并进行病原鉴定、溯源分析和致病性研究，以期为鳞状皮屑裸小鼠的病原体诊断提供新的思路 。 方法 对1只患鳞状皮屑皮肤病的裸小鼠的皮肤进行拭子采样，通过核酸检测、细菌分离培养 、生化鉴定 、16S rDNA 基因扩增测序、全基因组测序构建系统进化树等方法鉴定菌株。然后取15只 BALB/c 裸小鼠，随机分为涂擦生理盐水的对照组、涂擦1.8×108 CFU/mL分离病菌液的高浓度组和涂擦1.8×107 CFU/mL分离病菌液的低浓度组，通过动物感染试验及HE染色观察皮肤组织病理学变化，进行该菌株的致病性分析。 结果 送检裸小鼠的皮肤拭子样本中牛棒状杆菌核酸阴性，排除了牛棒状杆菌的感染。进一步分离培养的病原菌经高盐甘露醇琼脂平板和血琼脂平板培养以及革兰染色提示为革兰阳性葡萄球菌。16S rDNA 测序和全自动微生物鉴定系统鉴定结果显示，该菌株为木糖葡萄球菌。全基因组测序后的系统进化树分析显示，该菌株与韩国叶菜分离株（GenBank GCA_00207825.1）的亲缘关系最近。动物感染试验显示，高浓度和低浓度分离菌液分别感染17 d和20 d时裸小鼠头颈部和背部开始出现鳞状皮屑，之后逐渐扩散至其他部位；而且两组的皮屑症状均表现为一过性，分别持续7 d和3 d皮屑消失；高浓度组和低浓度组的感染率均为33.33%。与对照组相比，感染后的裸小鼠皮肤组织病理学观察未发现明显异常，提示该菌株对裸小鼠的致病力存在明显的个体差异。 结论 从患鳞状皮屑裸小鼠皮肤上分离鉴定出1株木糖葡萄球菌菌株。该菌株是一种机会性感染病原体，临床表现为一过性的鳞状皮屑症状，组织病理学并未发生明显改变，并且裸小鼠对该菌株的敏感性存在个体差异。本研究结果为免疫缺陷小鼠或基因敲除小鼠的病原体诊断提供了数据支撑。
蚊媒疾病（如疟疾、登革热、寨卡病毒病、基孔肯雅热等）对全球公共卫生造成了重大威胁，然而基于化学农药的传统防控手段面临着媒介蚊虫耐药性增强、污染环境等严峻挑战。遗传控制策略因具有物种特异性及环境友好等优势，成为蚊媒控制中极具潜力的替代方案。基因驱动（gene drive）技术利用成簇规律间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）/CRISPR相关蛋白核酸酶9（CRISPR-associated nuclease 9，Cas9）等基因编辑工具，使特定基因以超孟德尔遗传的方式在目标蚊种群中高效传播，为蚊媒疾病防控提供了革命性策略。本文系统综述了基因驱动技术在该领域的关键进展、核心挑战及应对策略。研究进展：（1）在疟疾媒介按蚊中，靶向性别决定基因或雌性生殖基因的种群抑制型驱动可致雌性不育或性别失衡，实现种群抑制；靶向按蚊中与疟原虫感染相关的宿主基因或递送抗疟疾效应分子的种群替代型基因驱动策略，可有效阻断病原体传播。（2）在蚊媒病毒媒介伊蚊中，靶向雌蚊飞行必需基因实现种群抑制，并探索抗病毒效应系统与驱动元件的偶联；优化的分割型基因驱动策略展现出高切割与重组效率，模型预测可实现抗病性状的安全可控扩散。（3）在淋巴丝虫病媒介库蚊中，将同源驱动元件分别整合至两个参与眼睛色素合成通路的基因中，可以通过眼色观察到明显的基因驱动效率。核心挑战：技术层面存在同源重组修复效率低、非同源末端连接修复导致抗性等位基因产生、CRISPR/Cas9脱靶效应及物种适配性差异；生态与安全层面涉及驱动元件意外扩散导致的基因池污染、生态平衡潜在影响及长期不可逆性风险。应对策略与展望：采用多重向导RNA（guide RNA，gRNA）靶向策略以提升驱动稳定性和对抗潜在抗性；开发可逆性设计，如合成抗性、逆转驱动及免疫性逆转驱动作为“基因刹车”；建立长期生态监测系统与数学模型进行风险评估；探索“环境响应型驱动”以增强可控性。未来研究亟须持续优化驱动效率与特异性，深化生态风险评估，加强跨国合作，并推动伦理共识与监管框架构建，以期在安全可控前提下，使基因驱动技术成为应对蚊媒疾病这一全球健康挑战的可持续性防控策略。
实验动物是医学研究的“活”工具，通过动物实验可以不断认识生命规律、揭示疾病本质、发现防治疾病的疫苗和药物，为人类相关领域的科技发展发挥重要作用。实验动物所处的环境条件，对动物的健康和质量，以及对动物实验结果，有直接的影响。对环境条件控制程度越高，实验结果就越具有质量上的保证。因此，实验动物设施环境控制是保障实验动物享有所需环境条件及有效开展动物实验的重要一环。本文通过分析四川省内实验动物设施环境检测的现状，简要梳理了四川省内实验动物设施的数量、设施面积等基本情况，详细统计了四川省内各检测机构开展实验动物设施环境检测的能力，结合国家标准、主管部门要求及实验动物设施使用单位的质量控制需要，总结了实验动物设施环境的检测要求。在实验动物设施检测指标的分析中，从四川省40家实验动物设施屏障环境的检测数据可得出，静压差是最容易出现不合格情况的检测指标，其次是照度和换气次数。同时，本文以屏障环境为例，总结出实验动物设施环境检测过程中的检测人员、检测仪器、检测方法、技术材料、检测环境、检测报告6个方面的常见问题并提出针对性建议。以上建议有助于更好地控制实验动物设施的环境，为行业内相关检测机构、实验动物生产和使用单位提供经验借鉴与参考。
线粒体作为细胞的能量代谢中枢，其动态形态和氧化磷酸化功能异常与衰老及多种疾病直接相关。秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans，C. elegans，以下简称线虫）是被广泛使用的模式动物。本文系统总结了作者实验室以线虫为模型，多尺度分析了线粒体形态与功能的实验方法，主要包括：（1）形态定性分析，即采用单盲法人工分类（如点状、棒状、网状），该法虽然依赖主观经验，但操作简便，适用于初步表型的筛选；（2）形态定量分析，即依托Fiji/ImageJ平台，对特定组织（如表皮及体壁肌）中线粒体进行自动化参数提取，通过骨架化算法量化网络连通性（分支点数量、网络长度），结合二值化分析计算碎片化指数（如面积/周长比、碎片计数），实现客观表型比对；（3）高通量图像处理，即通过宏命令批量处理，整合形态学滤波、阈值分割及参数导出流程，显著提升大样本量的研究效率；（4）代谢功能监测，即应用Seahorse XF分析仪开展活体线虫呼吸代谢检测，通过序贯注入ATP合酶抑制剂N，N′-二环己基碳二亚胺（dicyclohexylcarbodiimide，DCCD）、解偶联剂羰基氰化物 4-（三氟甲氧基）苯腙［carbonyl cyanide 4-（trifluoromethoxy）phenylhydrazone，FCCP］及呼吸链抑制剂叠氮钠（sodium azide，NaN?），精准解析基础耗氧率（oxygen consumption rate，OCR）、ATP耦合呼吸效率及最大呼吸容量（呼吸潜力），进而揭示能量代谢规律。本文整合了形态-功能双维度方法，不仅为关于线虫的线粒体研究提供经验技术，其框架亦可拓展至哺乳动物细胞与类器官模型，以推动靶向线粒体的基础研究和药物开发。
目的 探讨活体探头式激光共聚焦成像（probe-based confocal laser endomicroscopy，pCLE）技术在快速检测与评估小鼠消化道组织形态特征中的应用价值。 方法 将12只6周龄的SPF级雄性昆明小鼠随机分为两组，其中6只使用乙醇体积分数为52%的红星牌二锅头白酒进行灌胃造模，另外6只使用生理盐水灌胃作为对照。连续灌胃28 d后，每组随机选取3只，经3%异氟烷吸入深度麻醉后颈椎脱臼处死，即刻剖取胃、十二指肠、空肠和直肠组织，浸入1%荧光素钠溶液染色，采用pCLE技术观察各组织黏膜表面的微观结构。剩余模型组和对照组小鼠经3%异氟烷吸入深度麻醉后，先后使用生理盐水、4%多聚甲醛溶液进行心脏灌流，剪取胃、十二指肠、空肠及直肠各组织进行脱水、切片和苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色，于光学显微镜下观察各节段组织的形态学变化。 结果 pCLE观察显示，对照组小鼠消化道黏膜组织表面荧光染色均匀，胃小凹、肠绒毛及肠隐窝形状完整，排列紧密，边缘结构清晰；而模型组小鼠消化道黏膜发生肿胀和变形，并伴有荧光染色不均匀和荧光素渗漏的现象。此外，部分组织出现缺损或细胞脱落，相邻特征结构（如胃小凹、肠隐窝）之间的边界模糊。HE染色观察显示，对照组小鼠消化道组织结构正常，细胞排列整齐、无缺损，黏膜下腺体大小一致且无增生性改变，无明显炎性细胞浸润；而模型组小鼠部分消化道组织结构缺损，细胞排列紊乱稀疏，黏膜下腺体萎缩，并伴有明显的炎性细胞浸润。pCLE观察结果与HE染色的组织学特征一致。 结论 pCLE能够实现对消化道黏膜结构特征的快速、实时、大范围、高分辨率显微成像，并且能更真实、全面地展示其生理及微观结构特征，该技术在小动物消化系统损伤的组织学评估研究中显示出良好的应用前景和实际应用价值。
目的 通过电凝法阻断小鼠大脑中动脉构建中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，研究人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）来源的外泌体（exosome，EXO）改善缺血性脑卒中及调控神经细胞铁死亡（ferroptosis）损伤的作用机制。 方法 将32只6～8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MCAO）、模型+生理盐水组（MCAO+NaCl）、模型+外泌体组（MCAO+EXO），每组8只。使用电凝法建立小鼠大脑MCAO模型，Sham组暴露大脑中动脉但不实施电凝；在电凝造模24 h前，向MCAO+EXO组小鼠尾静脉注射100 μL来自hAMSCs培养上清液的外泌体（9.5×1011个/mL），向MCAO+NaCl组小鼠尾静脉注射同体积生理盐水。造模24 h后，采用Longa神经功能缺损评分法评价各组小鼠的运动神经功能损害程度；通过2，3，5-三苯基氯化四氮唑染色法评估各组小鼠脑梗死体积占比差异；通过HE染色法评估各组小鼠缺血部位脑组织中神经细胞形态学差异。通过微量比色法评估各组小鼠脑梗死区及其周围组织中亚铁离子（Fe2+）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、总谷胱甘肽（total glutathione，total GSH）、氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）和还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）的含量差异。通过实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中铁死亡相关因子包括核因子-红细胞系2相关因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，NRF2）、溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11，SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）的mRNA表达水平。通过蛋白质印迹法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中NRF2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平。 结果 相较于MCAO组，MCAO+EXO组的Longa评分显著降低（P<0.01）。MCAO组小鼠脑组织出现明显梗死灶，MCAO+EXO组相较MCAO组的脑梗死体积占比显著减少（P<0.001）。与Sham组相比，MCAO组出现神经细胞空泡变性，细胞核固缩、碎裂，细胞核结构不清晰，神经细胞排列杂乱。相较于MCAO组，MCAO+EXO组小鼠的神经细胞结构较为完整，细胞核大而规整，位于细胞中央。MCAO组小鼠的脑梗死区及周围组织中Fe2+和MDA含量较Sham组显著增加（P<0.001），MCAO+EXO组的Fe2+和MDA含量较MCAO组显著减少（P<0.01）。相较于Sham组，MCAO模型组小鼠的total GSH、GSSG、GSH含量均显著减少（P<0.01）；相较于MCAO组，MCAO+EXO组小鼠的total GSH、GSH含量显著增加（P<0.001），GSSG含量无显著变化（P>0.05）。相较于Sham组，MCAO组小鼠的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.01，P<0.001）；相较于MCAO组，MCAO+EXO组的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。 结论 在小鼠MCAO模型中，尾静脉注射hAMSCs来源的外泌体可以改善小鼠运动功能，减少梗死面积，保护神经细胞形态，降低神经损伤程度。外泌体可能通过激活NRF2/SLC7A11/GPX4通路，减少MCAO模型小鼠的脑神经细胞铁死亡而发挥保护作用。
目的 椎体成形术全称为经皮穿刺椎体成形术（percutaneous vertebroplasty，PVP），是临床上向病变椎体内注入骨水泥以达到强化椎体的技术。骨水泥的安全性和有效性研究是其临床应用的基础，本研究采用椎体成形术来评价和比较实验猪体内Tecres和不透射线骨水泥的安全性和有效性，并确定适合猪的穿刺方法以及临床前评价骨水泥安全性和有效性的方法。 方法 将24头实验用猪（体重60～80 kg）随机分为试验组（A组）和对照组（B组）：A组为Tecres骨水泥组，B组为不透射线骨水泥组，每组12头。在C型臂X射线机的监视下，采用单侧椎弓根入路法经皮穿刺将Tecres骨水泥或不透射线骨水泥植入到猪的第1腰椎（L1）和第4腰椎（L4）中，分别于术后在4周和在26周采用安乐死的方法处死动物，取其L4椎体进行抗压强度测试，取其L1椎体进行硬组织病理学检查，观察植入部位的炎症反应、骨坏死情况以及骨整合程度。 结果 在骨水泥植入术后第4周和第26周时，A、B两组之间椎体抗压强度的测试结果均无显著差异（P>0.05）。光学显微镜下的（×100）观察结果显示，术后第4周时，A、B两组均可见骨水泥被增生的纤维组织包裹，周边有淋巴细胞浸润，骨水泥与骨组织结合，骨小梁排列紊乱，成骨细胞及少量类骨质形成。术后第26周时，A、B两组均可见骨水泥，以及新生骨组织矿化、骨小梁融合、骨小梁结构规整致密且连续性好，未见明显的炎症反应。 结论 在实验猪椎骨内，Tecres和不透射线骨水泥的抗压强度、引起的炎症反应、对骨的破坏以及与骨的整合程度均未见明显差异，均具有良好的生物相容性和成骨特性，表明用椎体成形术在猪体内评价骨水泥的安全性和有效性是科学的。
目的 国内研究机构及研究者们建立了丰富的疾病动物模型，并在模型研发过程中积累了大量极具专业性、特色性和针对性的图谱数据，这些图谱数据具有极高的开发和应用价值。为此，开发一个专业且完整的疾病动物模型数字化图谱数据库平台非常必要，可实现动物模型图谱数据的开放共享，以实现国内相关机构所持有的疾病动物模型图谱资源的整合与优化。 方法 笔者单位基于B/S架构，采用Java为主要开发语言，使用Oracle数据库系统及相关辅助工具搭建疾病动物模型数字化图谱数据库。数据库平台在Linux环境下运行，用户通过Web浏览器可访问该平台。目前该平台的数据主要来源于广东省内动物模型资源单位汇交的图谱资源。 结果 2024年8月，按系统疾病、动物种属、资源单位3个维度的图谱分类结构，构建了疾病动物模型数字化图谱数据库平台。该平台可实现图谱数据的收集、管理、检索和查看等功能。截至2025年1月，该平台已有4个资源单位汇交了动物模型图谱数据61幅，共610个数据项。 结论 动物模型数字化图谱数据库平台已构建并实现初步应用，虽然平台的数据规模尚小，但基本可以实现动物模型图谱资源数据的集成和开放共享功能。相信未来随着图谱数据的不断丰富，该平台有望为实验动物学科发展以及比较医学研究提供重要的数据支撑，从而推动科研资源的高效利用。
目的 监测空调系统停止送风前、停止送风期间和恢复送风后，实验动物设施环境中氨浓度的实时变化，为制定空调系统停机应急预案提供依据和参考。 方法 以武汉生物制品研究所实验动物室实验动物设施为研究对象，在设施空调系统由于检修等被动停机和维保主动停机时，使用氨浓度检测仪监测普通级兔生产设施、SPF级仓鼠生产设施、SPF级豚鼠实验设施的空调系统停机前后设施环境中的氨浓度，以及恢复送风后氨浓度恢复至日常水平的时间。 结果 空调系统在2种停机模式下，不同实验动物设施环境中的氨浓度变化趋势一致，表现为停机后快速上升，恢复送风后快速下降。在维保主动停机的情况下，普通级兔生产设施、SPF级仓鼠生产设施、SPF级豚鼠实验设施中氨浓度最高值分别为9.81 mg/m3、14.27 mg/m3、6.98 mg/m3；恢复送风后12 min内，氨浓度均可降至日常水平。在检修等被动长时间停机的情况下，氨浓度数值与停止送风时长成正相关，氨浓度随着停机时间的延长不断升高，3个设施中氨浓度最高值分别出现在停风后88 min（38.06 mg/m3）、停风后40 min（18.43 mg/m3）、停风后34 min（15.61 mg/m3）；在恢复送风后11 min内，氨浓度可降至日常水平。 结论 空调系统停机会导致实验动物设施氨浓度快速上升，氨浓度的上升程度与停止送风时长成正相关。因此，在由于维修等原因需要进行空调系统应急停机时，应按照GB 50447—2008《实验动物设施建筑技术规范》要求，设置备用风机。对于老旧设施，相关人员需提前做好全面准备，并制定科学合理的应急预案。
果蝇（Drosophila）作为一种经典的模式生物，它在器官发育中所涉及的分子调控网络、信号通路转导及细胞命运决定机制等方面，均展现出与哺乳动物高度的进化保守性。本文围绕果蝇背血管（心脏）、脂肪体与绛色细胞（肝脏）、马氏管及肾原细胞（肾脏）和气管系统（肺脏）等主要器官或组织，通过多维度对比分析，深入解析了果蝇与哺乳动物在器官发生中核心调控通路、关键基因功能及细胞行为模式上的保守特征，明确了二者发育机制的同源性基础。结合具体的研究实例，进一步阐述了果蝇在人类心血管疾病、代谢性疾病、肾脏疾病及呼吸系统疾病等模型构建中的应用价值，及其在药物靶点高通量筛选、疾病致病机制解析，以及进化发育生物学理论体系完善中的独特作用。果蝇与哺乳动物核心发育调控机制的进化保守性搭建了从基础发育研究到人类疾病转化的关键桥梁，为深入解析人类复杂疾病的分子机制和开发新型治疗策略提供了重要理论支撑与技术平台，对推动发育生物学与转化医学的交叉融合具有重要意义。
目的 动态观察经大鼠足背静脉注射长春瑞滨溶液诱导静脉炎模型的临床症状和病理变化。 方法 28只11周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为模型组（20只）和对照组（8只）：模型组经右后肢足背静脉单次注射0.1 mL长春瑞滨溶液（4 mg/mL），对照组同法注射等体积生理盐水。每日观察两组大鼠的静脉炎发生情况并记录其分级，采用排水法测量患肢体积并计算肿胀率，双足平衡测痛仪测试患肢承重占比，红外热像仪检测患肢皮肤温度，连续9 d。模型组从第1天起隔日处死3只大鼠，取从注射点至向心端1 cm处的静脉组织，采用苏木精-伊红染色法观察静脉组织病理学改变，用扫描电子显微镜观察血管内膜表面微观结构变化。 结果 与对照组大鼠比较，模型组大鼠第1天出现红肿，至第3天肿胀率达到（81.89±15.75）%（P<0.001），而后红肿逐渐缓解，至第9天降至（15.41±0.33）%（P<0.01）；模型组大鼠患肢第1天出现痛觉，至第3天明显加剧，承重占比降低至（36.35±4.91）%（P<0.001），同时患肢病灶皮肤发热，第5天明显升高至（36.36±0.40）℃（P<0.001），痛觉和发热在第9天均基本恢复至正常。模型组大鼠患肢静脉炎分级显示，第1天Ⅱ级占75.0%；第3天Ⅲ级、Ⅳ级各占37.5%；第5 ~ 9天多数出现条索状静脉，以Ⅲ级为主。患肢静脉组织从第1天的周围水肿和炎性细胞浸润，逐渐进展为第3 ~ 9天的内膜破溃、管壁增厚，甚至管腔狭窄；同时静脉内膜亦从内皮细胞紧密连接破坏、血细胞粘附，进展为内膜表面粗糙、褶皱及隆起。 结论 经后肢足背静脉单次注射0.1 mL长春瑞滨溶液（4 mg/mL）建立的静脉炎大鼠模型在第3 ~ 5天以局部红、肿、热、痛为典型特征，至第9天基本消退，但仍可见条索状静脉；随病程延长，静脉组织出现水肿、管壁增厚及管腔狭窄，静脉内膜破溃、表面粗糙甚至完全缺失。
目的 通过原核表达和纯化得到树鼩Vasorin（VASN）重组蛋白，以此蛋白免疫小鼠制备抗树鼩VASN单克隆抗体，并初步评估其应用价值。 方法 采用反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法体外扩增树鼩VASN基因全长序列，将树鼩VASN基因片段插入到pET-30a载体中，构建pET-30a-VASN重组质粒，用BamHⅠ和SalⅠ对重组质粒进行双酶切鉴定，并通过测序进一步鉴定其正确性；将测序正确的重组质粒转化至BL21（DE3）感受态细胞中，利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl β-D-thiogalactoside，IPTG）诱导表达重组蛋白VASN；通过SDS-PAGE分离蛋白VASN，并利用KCl纯化重组蛋白VASN；用纯化的重组蛋白VASN对BALB/c小鼠进行4次免疫，并通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测小鼠血清抗体效价；取血清抗体效价达到1∶10 000以上的小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，先利用含黄嘌呤、氨基蝶呤及胸腺嘧啶核苷（hypoxanthine-aminopterin-thymidine，HAT）的培养基筛选杂交瘤细胞，随后通过ELISA筛选出能够分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株，并通过有限稀释法进行亚克隆，获得单克隆杂交瘤细胞株；通过腹水诱生法制备大量VASN单克隆抗体，利用rProtein G纯化抗体，采用ELISA和蛋白质印迹法检测单克隆抗体的结合常数和体外反应的特异性。 结果 成功扩增出树鼩VASN基因并构建了树鼩pET-30a-VASN重组质粒，重组质粒经测序得到的序列与树鼩VASN目的基因序列完全一致；重组蛋白VASN主要以包涵体的形式存在，纯化后的蛋白纯度达到90%，符合后续免疫实验的要求；利用重组蛋白VASN 4次免疫小鼠后，小鼠血清抗体效价达1∶729 000；利用杂交瘤技术及有限稀释法获得单克隆阳性杂交瘤细胞株，通过腹水诱生和纯化得到单克隆抗体，ELISA测定单克隆抗体的结合常数值达2.59×107 L/mol；蛋白质印迹法结果显示，树鼩VASN单克隆抗体能与树鼩VASN重组蛋白结合，与猪视黄醇结合蛋白4重组蛋白、人源VASN-富含亮氨酸重复序列重组蛋白以及牛血清白蛋白均无结合反应；而抗树鼩VASN单克隆抗体能特异性识别树鼩心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉组织中的VASN蛋白，且条带明显、背景清晰。免疫组织化学检测结果显示，该单克隆抗体可以识别蛋白VASN mRNA表达水平较高的树鼩脾脏、肺脏和树鼩永生化成纤维细胞中的VASN蛋白。 结论 成功制备了抗树鼩VASN的单克隆抗体，该抗体可用于树鼩永生化成纤维细胞、树鼩脾脏组织和肺脏组织的免疫组织化学检测，为进一步探索VASN在树鼩模型中的功能提供了重要的工具。
目的 基于自研设备“多通道小动物长时连续烟雾暴露的自动控制系统”，采用新型香烟烟雾连续暴露方法，建立稳定可靠的慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）小鼠模型，并进行表型评估分析，为研究COPD发病机制及防治策略提供动物实验基础。 方法 20只6周龄雄性C57BL/6J小鼠被随机分成对照组和模型组，每组10只。模型组小鼠每日进行6 h连续烟雾暴露（6支香烟/d，持续12周），对照组小鼠无干预。小鼠每隔2周进行一次体重监测；造模结束后，对小鼠进行小动物CT（micro-CT）活体成像；小鼠安乐死后，用ELISA法检测小鼠血清与支气管肺泡灌洗液中炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的水平；对肺组织进行HE染色和Masson染色检测，观察肺组织形态和炎症细胞含量的变化，计算小鼠肺泡平均截距（mean linear intercept，MLI），以综合评估小鼠模型的COPD临床特征。 结果 从第4周开始，与对照组相比，模型组小鼠体重显著降低（P<0.01）。ELISA检测结果显示，与对照组相比，模型组小鼠血清和支气管肺泡灌洗液中的IL-6质量浓度分别增高了27.2%和140.0%，差异均具有统计学意义（P<0.01）；与对照组相比，模型组小鼠血清和支气管肺泡灌洗液中的TNF-α浓度分别增高了16.7%（P<0.01）和19.3%（P<0.05）。HE染色结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肺泡壁变薄，肺泡出现不同程度扩张，部分肺泡间隔断裂，融合成肺大泡，肺泡数量减少，支气管管壁变厚，管腔变窄，周围有炎症细胞浸润，MLI显著增大（P<0.01）。Masson染色结果显示，模型组小鼠出现胶原沉积及支气管重塑。Micro-CT结果显示，模型组小鼠出现局部高密度影，呈现出慢性支气管炎的典型特征。 结论 自研装置可实现长期连续烟雾暴露，构建的COPD小鼠模型病理特征与临床症状高度吻合，可为COPD研究提供高效可靠的工具。
围绝经期综合征（perimenopausal syndrome，PS）是女性在绝经前后因雌激素水平减少或波动而出现的月经紊乱、烘热汗出、焦虑抑郁、头痛失眠等一系列生理和心理症状，严重影响生活质量。目前，针对PS的治疗方式主要为绝经激素治疗和中医治疗2种。其中，绝经激素治疗起效速度快，但常常受激素治疗禁忌证和患者接受度的制约。中医治疗则通过整体调节及个体化治疗，在改善潮热、情绪障碍等症状方面具有独特优势，且具有较高的安全性，为不愿或不宜接受绝经激素治疗的患者提供了有效替代选择。然而，中医治疗PS及其并发症的机制阐释不清、循证证据薄弱等问题，限制了其在PS中的进一步应用。因此，构建既能精准模拟复杂证候演变规律，又能系统解析中药多靶点调控机制的病证结合PS 动物模型，对于探究PS发生机制、药物的筛选评价，以及中药复方、中药单体和针灸治疗的效果评估尤为重要。本文从PS的中医病因病机、治疗方法与效果，PS动物模型的建模方法与评价指标，以及动物模型在PS中医治疗中的应用3个方面，对近年来中医病证结合PS 动物模型的最新研究进行总结与分析，不仅为后期应用PS动物模型开展的实验研究提供了科学支撑，而且有助于深化人们对中医治疗PS效果及其作用机制的理解。
