实验动物全身性麻醉药物多为管制药品,在国内受到严格的监管。经典文献上推荐的多数实验动物全身性麻醉药物,在市面往往购买不到,或者购买时间非常长,以至于在实际的临床应用时可选择的麻醉药物非常有限。加之部分实验动物兽医师对不同种属实验动物全身性麻醉药物的选择和使用缺乏相应的经验,导致目前实验动物全身性麻醉成为限制行业发展的一个重要瓶颈。本文系统总结了市面上常见全身性麻醉药物的属性以及使用注意事项,并在此基础上归纳了常见实验动物种属全身麻醉的注意事项。
目的 使用不同剂量的舒泰联合盐酸赛拉嗪麻醉C57BL/6J小鼠,观察小鼠在不同麻醉剂量下的麻醉相关时间,为各类小鼠手术及相关实验设计提供参考。方法 100只C57BL/6J小鼠(雌雄各半)随机分成5组,每组20只(雌雄各半)。4个给药组小鼠分别按照舒泰55 mg/kg+盐酸赛拉嗪13.75 mg/kg、舒泰65 mg/kg+盐酸赛拉嗪16.25 mg/kg、舒泰75 mg/kg+盐酸赛拉嗪18.75 mg/kg、舒泰85 mg/kg+盐酸赛拉嗪21.25 mg/kg的剂量进行腹腔注射;小鼠翻正反射消失后,于双眼各滴注新乐敦滴眼液1滴(约20 μL),放置小鼠于保温垫上。对照组小鼠腹腔注射200 μL的0.9%氯化钠溶液。观察、记录并比较各组小鼠的麻醉诱导时间、麻醉维持时间、麻醉恢复时间。小鼠麻醉苏醒后饲养1 d,取血清,采用日立7080全自动生化分析仪测定肝肾功能指标:谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐。结果 舒泰联合盐酸赛拉嗪麻醉C57BL/6J小鼠的成功率为100%。当舒泰麻醉剂量在55~75 mg/kg时能迅速且安全地诱导小鼠麻醉,麻醉效果良好。麻醉维持时间与舒泰注射剂量成正比(雄鼠r2=0.827,雌鼠r2=0.841,P值均<0.05),麻醉诱导时间与注射剂量成反比(雄鼠r2=0.432,雌鼠r2=0.410,P值均<0.05)。麻醉苏醒后,各组小鼠的肝肾功能指标与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论 使用55~75 mg/kg舒泰联合盐酸赛拉嗪麻醉C57BL/6J小鼠可得到较好的麻醉效果且安全,并且可通过调整麻醉药剂量控制麻醉时间,提示这是一种稳定可靠的麻醉方法。
目的 研究舒泰和陆眠宁复合麻醉对巴马小型猪的麻醉效果,并初步观察麻醉对小型猪生理指标的影响。方法 对外科腹部手术实验中的32头小型猪进行复合麻醉,颈后肌内注射2 mg/kg陆眠宁和3.0~7.0 mg/kg不同剂量的舒泰,观察麻醉效果,记录麻醉诱导时间、维持时间和苏醒时间,监测术前生理指标。结果 舒泰剂量在3.0~3.9 mg/kg时诱导麻醉成功率为50%,4.0~7.0 mg/kg剂量时诱导麻醉成功率为100%;舒泰剂量在4.0~7 .0mg/kg时,麻醉药剂量越高,诱导麻醉时间越短,维持时间越长,苏醒时间未受影响;舒泰剂量在5.0~5.9 mg/kg时,各项生理指标更接近正常范围。结论 舒泰剂量5.0~5.9 mg/kg复合陆眠宁2 mg/kg对巴马小型猪起到良好的麻醉效果,手术过程中各项生理指标均趋于稳定。
中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)实验动物机构认可是我国实验动物管理的重要制度,是致力于保障我国实验动物质量和福利的一项具有中国特色的第三方评价制度。美国实验动物饲养管理评估认证协会(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care,AAALAC)认证是为全球实验动物管理和使用机构提供动物福利和伦理认证服务的一种评价活动。本文从CNAS与AAALAC的性质、CNAS认可和AAALAC认证本质、评价依据和文件、评审流程、评审人员管理、结果采信等方面进行了比较分析,探讨两项实验动物机构评价制度的差异与特点。
目的 通过建立大鼠肠系膜淋巴管-颈静脉辅助回流方法,实现肠系膜淋巴液的持续引流。 方法 将16只雄性SD大鼠随机均分为2组。对照组大鼠进行十二指肠和肠系膜淋巴管双插管手术,术后收集肠系膜淋巴液。实验组大鼠进行颈静脉和肠系膜淋巴管双插管手术,建立肠系膜淋巴管-颈静脉循环模型。术后第7天利用清醒活动装置收集肠系膜淋巴液,记录各组大鼠的肠系膜淋巴液流量,检测其细胞成分及部分生化指标。 结果 成功建立了大鼠肠系膜淋巴管-颈静脉辅助回流方法,模型维持时间达7 d以上。实验组大鼠的肠系膜淋巴液流量多于对照组流量[(2.01±0.12)mL/h vs(0.92±0.09)mL/h,P<0.01]。实验组淋巴液中淋巴细胞数和淋巴细胞百分率高于对照组(P<0.01,P<0.05),而中性粒细胞比例和单核细胞比例均低于对照组(P<0.01)。实验组淋巴液中K+、Na+、CO2和尿素水平均高于对照组(P<0.01),而三酰甘油和P3+水平均低于对照组(P<0.01)。 结论 肠系膜淋巴管-颈静脉辅助回流技术能够实现大鼠在清醒、不限制饮食和正常活动状态下,实时并长期收集淋巴液,避免了手术应激、全身麻醉或动物受限对实验结果的影响。
提高生物医学研究结果的可重复性是一项重大挑战,研究人员透明且准确地报告其研究过程有利于读者对该研究结果的可靠性进行评估,进而重复该实验或在该成果的基础上进一步探索。ARRIVE 2.0指南是2019年英国国家3Rs中心(NC3Rs)组织发布的一份适用于任何与活体动物研究报告相关的指导性清单,用以提高动物体内实验设计、实验实施和实验报告的规范性,以及动物实验结果的可靠性、可重复性和临床转化率。ARRIVE 2.0指南的使用不仅可以丰富动物实验研究报告的细节,确保动物实验结果信息被充分评估和利用,还可以使读者准确且清晰地了解作者所表述的内容,促进基础研究评审过程的透明化和完整性。目前,ARRIVE 2.0指南已经被国际生物医学期刊广泛采纳。本文是在国际期刊遵循ARRIVE 2.0指南的最佳实践基础上,对2020年发表于PLoS Biology期刊上的ARRIVE 2.0指南完整解读版(原文请见 https://arriveguidelines.org )进行中文编译(第一部分包括前言和“关键10条”里的“研究设计”“样本量”“纳入和排除标准”),以期促进国内研究人员充分理解并使用ARRIVE 2.0指南,提高实验动物研究及报告的规范性,助推我国实验动物科技与比较医学研究的高质量发展。
目的 探究应用肿瘤细胞原位注射和肿瘤组织块移植法建立小鼠胰腺癌原位模型的优缺点,为以精准消融治疗研究为目的的小鼠胰腺癌原位模型的建立提供技术参考。方法 取20只6~8周龄的健康雄性C57BL/6小鼠,分为4组,每组5只:A组采用小鼠胰腺癌Panc02细胞悬液直接注射法;B组采用含基质胶的小鼠胰腺癌Panc02细胞悬液注射法;C组采用小鼠胰腺癌组织块移植法;D组采用小鼠肿瘤组织块水凝胶粘接法。术后观察各组小鼠胰腺癌的成瘤率、肿瘤大小、腹腔脏器粘连程度和肿瘤转移情况,分别采用HE染色法和免疫组织化学法检测肿瘤组织形态学变化以及Ki67和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达差异。结果 A、B、C、D四组小鼠胰腺癌成瘤率分别为60%、80%、100%和100%。建模16 d后,A组小鼠肿瘤体积为(47.80±42.99)mm3,均质性差;B、C与D组小鼠肿瘤体积分别为(68.43±16.77)mm3、(105.86±17.25)mm3和(128.98±13.41)mm3,比A组明显增大(P<0.01),且均质性较好。A组小鼠腹腔重度粘连率为100%,B组重度粘连率为80%,C组与D组均未出现重度腹腔粘连。A组小鼠肿瘤转移率为100%,B组转移率为60%,C组与D组小鼠均未发现肿瘤转移。4组小鼠的肿瘤在组织学上无明显差异,且肿瘤组织中Ki67和α-SMA蛋白的相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采用肿瘤组织块移植法及水凝胶粘接法建立小鼠胰腺癌原位模型的成瘤率高,转移少,腹腔粘连轻,且未改变肿瘤细胞的生物学特性,易于操作和普及,造模效果更好。
泰泽病原体(Tyzzer’s organism)是一种能引起实验动物肝肠坏死和腹泻的毛发状芽孢杆菌(Clostridium piliforme,旧称Bacillus piliformis)。该病原体引起的泰泽病是一种急性疾病,其发病迅速、致死率高、临床症状不明显,往往难以进行早期诊断和治疗,一旦爆发,将会造成严重的经济损失和实验室安全问题。本文从泰泽病原体的生物学特性、流行病学与疾病特征、检测方法、研究进展及防治多个方面进行综述。
生物安全实验室的有效、安全管理是保障国家生物安全的重要环节之一。作为生物医学研究最广泛的材料之一,实验动物被大量应用于各类感染相关的生物安全实验研究中,而感染性动物实验必须在动物生物安全实验室中开展。在动物生物安全实验室中,实验动物及动物实验相关的风险评估与控制至关重要。通过无线追踪技术实现实验动物身份识别及可追溯性是未来动物生物安全实验室风险控制与管理的重要手段之一。本文对实验动物身份识别及追踪技术进行了概括,并描述了无接触识别技术尤其是无线射频识别技术在实验动物生物安全管控中的应用前景,可为相关从业人员更好地应用实验动物身份识别与追踪技术进行生物安全管控提供参考。
目的 探讨在普通环境设施内用微屏障笼具饲养和维持清洁级小鼠的可行性。 方法 在普通环境内采用正压微屏障笼具饲养和维持清洁级小鼠,其间以每个季度一次对微屏障内动物的微生物状况进行第三方抽样检测。 结果 自2020年6月开始用微屏障笼具饲养清洁级小鼠,至2022年7月文章成稿时,在连续两年的抽样检测中没有检出国家标准中要求清洁级小鼠必须排除的微生物。 结论 微屏障笼具可以在普通环境设施内实现清洁级小鼠的饲养和维持。
生物安全是国家安全的重要组成部分,有效控制实验动物生物危害是使用实验动物的基础。本文从实验动物设施管理者的角度,以上海市第一人民医院实验动物中心的生物安全管理经验为基础,分析了目前实验动物屏障设施在保证动物实验顺利开展过程中所面临的潜在生物安全威胁,并探讨了降低此类风险的相关对策,以期为良好控制动物实验中生物安全问题提供借鉴。
2022版加拿大实验动物管理委员会(Canadian Council On Animal Care, CCAC)动物人道终点指南——《动物科学终点、人道干预点和累积终点确定指南》(Identification of Scientific Endpoints, Humane Intervention Points, and Cumulative Endpoints)简称“指南”)根据最新的研究文献,对现有的实验动物人道终点理论进行了补充和拓展。本文总结了该指南的主要内容,对动物实验的科学终点、人道干预点、累积终点的确定、实施和监督进行了阐述和分析,以期为同行提供有益的参考和借鉴。
实验动物是生命科学研究的重要基础和支撑条件,是衡量一个国家和地区生物医药科技研究水平的重要标志。本文系统回顾了江西省实验动物科技发展的基本情况,以及江西省实验动物学会对实验动物科技发展的作用;并对以往存在的问题进行分析,指出江西省实验动物研究底子薄、对实验动物科技的战略定位认识不足、缺乏稳定的经费支撑等问题,一定程度上致使生物医药基础研究及技术创新的能力略显不足;同时在分析现状的基础上,提出了“十四五”期间江西省实验动物科技发展的对策和建议。
神经病理性疼痛困扰约10%的人群,治疗该疾病的方法和药物效果均有限。脊髓中小胶质细胞在外周神经损伤诱导的神经病理性疼痛中起着重要而又相互矛盾的作用,既有促进神经病理性疼痛发展的作用,又有减缓疼痛的效果。2022年4月,Science杂志发表了Keita Kohno等的一项研究成果,提示外周神经损伤后小鼠脊髓中出现的CD11c+小胶质细胞是起缓解神经病理性疼痛和抑制疼痛复发作用的一类小胶质细胞。本文对这类镇痛小胶质细胞亚群的重要发现进行文献点评,并对后续相关工作进行展望。
动物实验在生物医药科学研究过程中发挥着重要作用,是基础医学向临床医学转化的必要途径。动物实验研究及报告的规范性决定了研究结果的可靠性和可重复性,也是其研究成果能够向临床试验转化应用的关键。针对如何更加规范地设计、实施动物实验,撰写动物实验报告,以及发表相关学术论文,《实验动物与比较医学》期刊从2023年起推出“比较医学研究及报告规范”专栏,重点推介并解读实验动物与比较医学相关的国际通用规范,如ARRIVE 2.0等。本文对动物实验研究报告的国际指南ARRIVE 2.0的制定和使用、基本内容和优先级别,以及国际生物医学期刊实施ARRIVE 2.0指南的计划方案进行了重点介绍,并说明《实验动物与比较医学》期刊遵循ARRIVE 2.0指南的目前情况及未来计划。动物实验医学研究及报告遵循ARRIVE 2.0指南等国际规范是助推我国实验动物科学与生物医药学高质量发展的重要动力之一,也是落实3R原则和提高实验动物福利强有力的一种手段,广大科研工作者和期刊工作者均应该高度重视并积极践行。
目的 利用成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白核酸酶9(CRISPR-associated nuclease 9,Cas9)基因编辑技术构建稳定遗传的脂多糖结合蛋白(lipopolysaccaride binding protein,Lbp)基因敲除小鼠。 方法 根据C57BL/6J小鼠的Lbp基因序列特征,设计sgRNA靶点,删除Lbp基因5’-端蛋白编码保守序列并引入移码突变,使编码LBP失活。提取F0、F1、F2、F3代小鼠基因组,PCR鉴定并测序验证Lbp基因敲除效果,RT-PCR测序验证Lbp基因转录水平,蛋白质印迹法验证F2代LBP蛋白表达水平。 结果 F0代获得5只杂合子敲除小鼠(Lbp+/-)、F1代获得3只Lbp+/-小鼠,F2代获得4只Lbp纯合子敲除小鼠(Lbp-/-),F3代获得30只Lbp-/-小鼠。RT-PCR测序表明,Lbp-/-小鼠mRNA缺失244 bp且发生移码突变,导致翻译提前终止。蛋白质印迹证明Lbp-/-小鼠肝脏组织中无LBP蛋白表达。 结论 通过CRISPR/Cas9技术成功构建可以稳定遗传的Lbp基因敲除小鼠,为后续进一步研究LBP的免疫及其生理作用提供基础。
目的 比较和探讨6月龄和12月龄的APP/PS1双转基因模型小鼠嗅球组织病理形态、超微结构特征、空间记忆能力的变化以及美金刚干预的作用。方法 将SPF级3月龄雄性APP/PS1小鼠按随机数字表法分为6月龄、12月龄的模型组(分别为命名为6-APP/PS1组、12-APP/PS1组)和盐酸美金刚(memantine hydrochloride,MEM)干预组(分别命名为6-MEM组、12-MEM组,MEM剂量均为2.60 mg/kg/d),每组10只。另设同龄C57BL/6小鼠作为空白对照组。MEM连续(分别自3月龄和9月龄)灌胃3个月,非MEM处理小鼠接受等容积纯净水灌胃。于6月龄和12月龄时进行Morris水迷宫实验检测,固定取材进行HE染色后光学显微镜下观察嗅球病理组织形态,超薄切片染色后透射电子显微镜下观察嗅球超微结构。 结果 水迷宫结果显示,与同龄的空白对照组比较,6-APP/PS1组和12-APP/PS1组小鼠的穿台次数、穿梭目标象限的时间及路程明显降低(均P<0.05),且12-APP/PS1组比6-APP/PS1组的降低程度更明显(均P<0.05);与同龄的模型组比较,6-MEM组和12-MEM组的穿台次数、目标象限停留时间及路程显著提高(均P<0.05)。组织病理学观察发现,与同龄的空白对照组比较,6-APP/PS1组小鼠嗅球的神经细胞无明显萎缩变形且僧帽细胞数量显著减少(P<0.05),12-APP/PS1组小鼠嗅球的神经细胞萎缩变形且球周细胞、僧帽细胞数量显著减少(均P<0.05);与同龄模型组比较,6-MEM组球周细胞无显著增多但僧帽细胞数量显著增多(P<0.05),12-MEM组球周细胞、僧帽细胞数量有增加趋势但差异无统计学意义(均P>0.05)。超微结构观察显示,与同龄的空白对照组比较,6-APP/PS1组突触结构出现肿胀,突触后致密物厚度及非对称性突触数量减少;12-APP/PS1组突触结构肿胀,非对称性突触及突触后致密物厚度无法观测。与同龄模型组比较,6-MEM组突触肿胀改善明显,突触后致密物厚度及非对称性突触数量增加;12-MEM组突触肿胀改善不明显,突触后致密物及非对称性突触无法观测。结论 随月龄增加,不同时程的APP/PS1小鼠出现了阿尔茨海默病相关的行为学改变,同时伴随嗅球病理及突触特征的显著变化。MEM干预不仅改善空间记忆能力,还可增加6-APP/PS1小鼠嗅球的僧帽细胞数量,减轻突触结构损伤,早期干预的改善效果显著。
缺血性脑卒中是指因脑部血液循环障碍,缺血、缺氧所致局限性脑组织缺血性坏死或软化,而出现相应的神经系统功能缺损。该病是导致残疾甚至死亡的主要原因之一,严重威胁着人类健康。目前治疗缺血性脑卒中仍存在困难。为了研究缺血性脑卒中的发病机制,更好地预防和治疗缺血性脑卒中,建立合适的动物模型至关重要。本文针对缺血性卒中动物模型的制备方法及其优缺点进行综述。
目的 建立并优化花生四烯酸诱导的大鼠弥漫性脑血栓模型。方法 经颈内动脉注射花生四烯酸,建立大鼠弥漫性脑血栓模型;同时设定假手术组作为对照。通过检测脑组织中伊文思蓝(Evans blue,EB)渗出含量以及HE染色法检测脑组织病理损伤程度评价建模效果。结果 与假手术组相比,模型组大鼠损伤侧脑组织中均出现弥漫性EB渗出(P<0.01),且渗出情况均一性较佳。损伤侧脑组织病理表现为细胞排列混乱,细胞核皱缩,细胞间隙增大,空泡细胞增多,个别微血管呈红色条形管型的缺血病理损伤。结论 花生四烯酸可成功诱导弥漫性脑血栓模型,且优化方法后模型稳定性较好,死亡率较低。
慢性疼痛伴发抑郁症状是常见的健康问题,严重危害了患者的身心健康,但这些症状的发生机制仍不清楚。为全面了解疼痛抑郁共病的发生机制及其治疗方法,疼痛抑郁共病动物模型的建立至关重要。本文就目前国内外疼痛抑郁共病相关的动物模型建立及行为学评价方法进行综述。
目的 探究间歇禁食(intermittent fasting,IF)对奥氮平诱导小鼠代谢紊乱的保护作用及其机制。 方法 将C57BL/6J小鼠随机分为4组:生理盐水+自由摄食组(Saline+ Ad libitum)、生理盐水+间歇禁食组(Saline+IF)、奥氮平给药+自由摄食组(Olanzapine+ Ad libitum)、奥氮平给药+间歇禁食组(Olanzapine+IF),每组8只。其中间歇禁食组采用5∶2方案,即每周的周一、周四禁食,其余时间自由摄食,干预12周;以自由摄食作为间歇禁食的对照(Control),以生理盐水灌胃作为奥氮平给药的对照(Saline)。比较奥氮平处理组与对照组经过间歇禁食干预后小鼠体质量、肝脏质量和附睾旁脂肪组织质量的差异,并分别采用磁共振和HE染色法分析小鼠体脂、瘦素以及内脏脂肪浸润的变化;同时,分别采用葡萄糖氧化酶法和放射免疫法测定小鼠糖代谢过程中空腹血糖、胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的水平差异,分别采用ELISA和实时荧光定量PCR法测定H2O2含量和线粒体损伤相关标志物细胞色素C(Cytochrome C)mRNA水平。 结果 分组处理12周后,奥氮平诱导小鼠体质量、体脂、瘦素和内脏脂肪浸润明显增加(P<0.05),空腹血糖、胰岛素和胰岛素指数也明显增加(P<0.05);然而间歇禁食可以使上述指标明显降低(P<0.05)。进一步研究表明:间歇禁食处理后小鼠脂肪组织部位的H2O2释放和Cytochrome C mRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。 结论 间歇禁食可以减轻奥氮平引起的小鼠代谢紊乱,其机制可能与抑制氧化应激水平和维持线粒体功能有关。
目的 通过一种新型的肠系膜淋巴管-颈静脉辅助回流模型,比较普罗布考橄榄油制剂与普罗布考混悬液制剂对大鼠肠系膜淋巴转运及药代动力学的影响。 方法 12只SD大鼠随机分为4组,即混悬液制剂-颈静脉单插管组(H-JD组)、混悬液制剂-颈静脉和肠淋巴管双插管组(H-JCS组)、橄榄油制剂-颈静脉单插管组(G-JD组)、橄榄油制剂-颈静脉和肠淋巴管双插管组(G-JCS组)。用液相色谱和串联质谱联用(LC-MS/MS)法测定各组大鼠在不同时间全血和淋巴液中普罗布考的浓度,绘制药-时曲线,计算药代动力学参数、相对生物利用度(Frel)和淋巴液剂量百分比。 结果 各组的药-时曲线符合非房室模型。前述各组到达峰值时间(Tmax)分别为(11±12)h、(5±2)h、(13±9)h和(19±9)h;到达峰值浓度(Cmax)分别为(148±60)ng/mL、(207±137)ng/mL、(453±204)ng/mL和(309±177)ng/mL;药-时曲线下面积(AUClast)分别为(3 210±885)h·ng·mL-1、(3 677±2 014)h·ng·mL-1、(12 360±6 629)h·ng·mL-1和(8 080±3 064)h·ng·mL-1。H-JCS组和G-JCS组的淋巴液剂量百分比分别为(1.29±0.50)%和(2.59±0.43)%。与H-JD组相比,G-JD组中普罗布考的Frel为(409±269)%;与H-JCS组相比,G-JCS组中普罗布考的Frel为(309±256)%。与H-JD组和H-JCS组相比,G-JD组和G-JCS组大鼠全血的Cmax、Tmax、AUClast和淋巴液剂量百分比显著升高(P<0.05);其中G-JD组全血的AUClast显著高于G-JCS组(P<0.05),而H-JD组和H-JCS组差异无统计学意义(P > 0.05)。 结论 使用橄榄油制剂可以提高普罗布考通过肠系膜淋巴液的转运吸收率和生物利用度。
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是最常见的老年性神经退行性疾病之一,严重威胁着老年人的健康。目前被批准用于治疗AD的药物只能缓解AD的症状,不能治愈AD或阻止其恶化。近40年来,虽然AD的治疗方法层出不穷,包括阻止脑淀粉样蛋白沉积或清除已有淀粉样蛋白斑块的化合物,但是它们的临床疗效并不显著。因此,需要更多的基础和临床研究来深入探讨AD疾病生物学机制。实验动物模型不仅对AD发病机制的研究,还对AD药物的开发都非常重要。本综述从AD病理组织学特征和遗传因素出发,论述已有的AD动物模型以及其评价方法。
目的 探索2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)诱导急性肠纤维化大鼠模型的方法及不同药物配比的效果。 方法 30只雌性SD大鼠随机分为5组,每组各6只。A~D组为模型组,模型组大鼠采用不同配比的药物溶液通过改良保留灌肠法一次性造模:A组,5%TNBS+ 50%乙醇(体积比1∶1);B组,5%TNBS+ 75%乙醇(体积比1∶1);C组,5%TNBS+ 100%乙醇(体积比1∶1);D组,5%TNBS+ 50%乙醇(体积比2∶1);对照组用生理盐水(0.9%氯化钠溶液)灌肠;观察造模后1周内动物的症状、体征和体质量变化,并进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分。分别于造模后7 d和14 d,随机选择每组内一半大鼠进行取材,观察结肠组织大体损伤程度并以结肠炎损伤指数(colon macroscopic damage index,CMDI)评分;结肠组织病理切片以HE染色观察肠炎严重程度,Masson染色观察胶原纤维沉积情况。 结果 各模型组大鼠均出现轻重不等的肠炎及肠纤维化病变,其中以体积比为1∶1的5%TNBS+75%乙醇溶液造模观察期内未导致大鼠死亡,造模后24 h大鼠体质量明显下降、出现稀便及血便症状,结肠壁纤维化病变明显,体质量下降、DAI评分与CDMI评分升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);光学显微镜下炎症程度较重,呈透壁性;Masson染色显示造模部位的肠壁增厚明显,黏膜下层、肌层及浆膜层均出现弥漫性胶原纤维沉积。 结论 改良的TNBS保留灌肠法能有效构建肠纤维化大鼠模型,体积比为1∶1的5%TNBS+75%乙醇溶液所建模型可模拟克罗恩病纤维化两大特征,即透壁性炎症和肠壁纤维化。该造模方法简便、高效,动物死亡率低。
目的 对实验用英国短毛猫(简称英短猫)解剖结构特征和背景病变进行收集与分析,为该类动物的实验研究、标准建立和商业应用提供有效依据。方法 对14只英短猫(雌雄各半)进行大体系统剖检和组织病理学检查,收集并分析其区别于其他实验动物的组织结构特征和背景病变数据。结果 大体剖检发现成年雄性英短猫体质量高于雌性(P<0.05),雌性英短猫脾脏脏器指数低于雄性(P<0.01),雌性英短猫胸腺和脑脏器指数高于雄性(P<0.05),英短猫睾丸、心脏、甲状腺、幕骨解剖结构与常用啮齿类及犬类动物有所不同。组织病理学检查发现英短猫心脏、胰腺和脾脏等器官的组织结构较上述常用实验动物有所差异,另可见英短猫多发肝脏肝细胞空泡变性(9/14),同时还发现部分动物偶发的肾脏、脑和淋巴组织等背景病变。结论 英短猫体质量、脾脏、胸腺和脑的脏器指数存在性别差异性,同时具有肝脏空泡变性和部分动物偶发的背景病理改变。
目的 探讨新型肠道钠磷转运蛋白小分子抑制剂DZ1462在大鼠5/6肾切除高磷血症动物模型中的降磷效果。方法 首先随机选取156只Wistar大鼠,分为4组:第Ⅰ组6只为正常对照,饲喂正常饲料;第Ⅱ组60只,经过5/6肾切除后饲喂正常饲料;第Ⅲ组60只,经过5/6肾切除后饲喂高磷饲料;第Ⅳ组30只为假手术组,即只打开腹腔,不摘除肾脏,闭合伤口后饲喂高磷饲料。造模周期为10周。每两周检测各组大鼠血清磷含量,记录大鼠死亡数量,并进行HE染色观察肾脏病理变化,筛选高磷血症动物模型。选取符合入组标准的18只模型大鼠(均来源于第Ⅲ组),随机分为3组:模型对照组,记为G2组;DZ1462给药组(每次30 mg/kg,每日3次),记为G3组;商品化的降血磷药物碳酸司维拉姆片(Sevelamer) 给药组(每次250 mg/kg,每日3次),记为G4组。每组6只,连续给药21 d。另外设正常对照组,记为G1组。运用无机磷检测试剂盒分析各组大鼠的血清磷水平变化。结果 在手术建模后的第8周和第10周,5/6肾切除手术+高磷饲料饲喂的第Ⅲ组大鼠血清磷水平均明显高于正常对照第Ⅰ组(P<0.01);第Ⅲ组大鼠的肾脏出现了明显的肾小球硬化、肾小管萎缩、退化、间质炎症、纤维化和钙化,与人慢性肾病并发的高磷血症相似,提示肾性高磷血症动物模型建立成功。用药后,在各测量时间点上,DZ1462组大鼠的血清磷抑制率显著高于Sevelamer组(P<0.05)。结论 DZ1462作为一种新型肠道钠磷转运蛋白小分子抑制剂,在大鼠高磷血症模型中能够有效抑制肠道磷离子的吸收,有望成为临床上治疗高磷血症的一种潜在有效药物。
目的 研究环境丰富对实验用英国短毛猫应激反应的缓解作用。方法 将14只实验用英国短毛猫按有无环境丰富干预措施随机分为福利组和对照组,每组7只,实验共持续11周。测定并分析比较各组实验猫的血液生理生化指标、神经内分泌指标、免疫学指标,评价不同组别的应激水平。结果 福利组的平均红细胞体积明显小于对照组(P<0.05),淋巴细胞百分比极明显大于对照组(P<0.01),中性粒细胞百分比极明显小于对照组(P<0.01)。另外,福利组的尿素、肌酐、球蛋白和总蛋白水平均明显低于对照组(P<0.05),肾上腺素、多巴胺两项指标也明显低于对照组(P<0.05),而Ⅱ型干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ/IL-4比值、IL-2/IL-4比值、IFN-γ/IL-5比值和IL-2/IL-5比值均高于对照组;其中IFN-γ、IL-2、IFN-γ/IL-5比值和IL-2/IL-5比值差异明显(P<0.05),IL-5差异极明显(P<0.01)。结论 采取环境丰富的干预措施能够有效提高实验猫的福利水平,缓解应激反应。
作为一种炎性肠病,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的发病机制尚未被完全揭示,其治疗策略仍需继续探索。动物模型是疾病研究中不可或缺的工具。因此,建立与人类UC发病机制、病理表现类似的动物模型有利于对该疾病进行充分研究。本文梳理了UC动物模型的研究进展,发现化学药物诱导是迄今为止最常用的UC造模方法;基于基因组学技术的发展,基因编辑或基因敲除诱导的自发性结肠炎则是未来动物模型研究的重要方向;评价UC动物模型造模结果的指标仍需进一步探索。