目的 通过对青春期前小鼠进行来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理，构建小鼠多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）模型，比较模型小鼠与安慰剂对照小鼠的肝脏转录组差异，以探索PCOS发病过程中肝脏的作用机制。 方法 定制剂量为2 mg的来曲唑缓释片，缓释周期为 40 d。分别将对照安慰剂缓释片和来曲唑缓释片包埋在3～4周龄的C57BL/6J小鼠颈后皮下，每组8只，构建对照组及来曲唑诱导的PCOS模型，并在包埋次日给予小鼠高脂饮食处理。造模周期5周，每周监测每组小鼠的体重和24 h进食量。收样时记录小鼠肝脏重量，通过HE染色观察小鼠卵巢和肝脏组织病理变化，通过油红O染色观察肝脏脂质沉积水平，通过F4/80免疫组织化学染色观察肝脏巨噬细胞浸润程度，通过Masson染色观察肝脏纤维化水平；通过转录组学测序技术分析对照组和模型组小鼠肝脏组织中基因表达的差异，并对显著差异表达的基因进行富集分析；通过实时荧光定量PCR验证两组小鼠肝脏组织中显著差异表达的基因。 结果 与对照组相比，来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理后的模型组小鼠体重显著增加（P<0.001），卵巢的多囊样表型显著，肝重比显著下降（P<0.05），但小鼠的肝脏重量、肝组织形态和脂质沉积没有显著影响（P>0.05）。转录组学测序发现，来曲唑处理后小鼠肝脏中有119个上调、217个下调的差异表达基因，广泛参与胆固醇和类固醇合成、类固醇激素合成及炎症反应相关通路。荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肝脏的HSD3B2和HMGCR基因的mRNA表达上调（P<0.01），IL4、CCL2和COL1A1基因的mRNA 表达下调（P<0.05）。但Masson染色与F4/80免疫组织化学染色未见肝脏纤维化水平与巨噬细胞浸润程度的显著改变。 结论 来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理可以成功构建小鼠PCOS模型。模型小鼠肝脏中基因表达变化显著，可能通过调控胆固醇和类固醇代谢，参与PCOS的发病机制。

目的 通过模拟排卵功能障碍型异常子宫出血（abnormal uterine bleeding-ovulatory dysfunction，AUB-O）病因，建立异常子宫出血大鼠模型，为异常子宫出血病理机制研究及治疗药物开发提供可靠的模型支持。 方法 将24只成年（10周龄）雌性SD大鼠适应性饲养后，随机分为正常对照组（6只）和模型组（18只）。正常对照组大鼠在屏障环境中正常饲养；模型组大鼠在屏障环境中经背侧入路行双侧卵巢切除术，休养1周后开始造模用药。模型组造模第1 ~ 3天每日每只大鼠背部皮下注射雌二醇0.5 mg，第4 ~ 7天每日皮下注射孕酮5.0 mg；同时于第6天经背侧相同手术切口向双侧子宫腔各注射0.5 mL大豆油，于第8天行米非司酮（10 mg/kg）灌胃，造模期间持续观察大鼠所处动情周期的阶段及其变化趋势。造模后48 h内观察并记录大鼠子宫出血情况，米非司酮灌胃后0、12、24、36、48 h模型组动态收集血清和子宫组织样本，正常对照组在36 h同时取材。取材后分别进行HE染色、血清性激素ELISA测定、免疫组织化学检测、TUNEL凋亡染色、蛋白质印迹检测、转录组学测序和生物信息学分析，对异常子宫出血大鼠模型进行综合评价。 结果 异常子宫出血大鼠表现为子宫出血，内膜剥脱损伤、复旧不全，内膜炎性细胞浸润、凋亡增强，间质、腺体和血管结构破坏。与正常对照组相比，异常子宫出血大鼠的血清卵泡刺激素、雌二醇和促黄体生成素水平明显升高（P<0.05）；子宫内膜血管密度明显降低（P<0.05）；血管内皮生长因子在子宫内膜剥脱处表达定性观察到明显增强，而在间质血管周围表达显著下降（P<0.01）；基质金属蛋白酶-9在内膜损伤部位表达定性观察到明显增强，而在未剥脱间质和腺体处表达显著降低（P<0.01）；子宫内膜间质细胞凋亡显著增强（P<0.01）；成纤维细胞生长因子2和内皮素-1在子宫组织中的表达水平均明显下降（P<0.05）。比较异常子宫出血大鼠与正常大鼠子宫组织的转录组测序结果，共筛选到4 723个差异表达基因，其中表达上调基因为2 191个，表达下调基因为2 532个；KEGG富集分析显示，差异基因显著富集在炎症、免疫凋亡、细胞信号转导、增殖分化和肌肉收缩等相关通路。 结论 采用雌激素、孕激素和米非司酮序贯给药模拟AUB-O病因的方法，可成功建立异常子宫出血大鼠模型。该模型的子宫内膜损伤与炎症和凋亡相关，病理表现受血管收缩和内膜再生能力异常影响。该大鼠模型具有与临床非结构性病因异常子宫出血相近的病理特征，可以作为研究病理机制和治疗方法的有效模型。

目的 研究db/db小鼠口腔菌群的改变，为探寻2型糖尿病与口腔微生态的联系提供实验基础。 方法 选取8只10周龄雄性db/db小鼠为糖尿病实验组，8只10周龄雄性db/m小鼠为正常对照组。适应性喂养5 d后，在相同饲料饲养的第6天和第37天行尾静脉采血，测定两组小鼠的空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）水平和口服葡萄糖耐量（oral glucose tolerance test，OGTT），以验证糖尿病模型的可靠性。在相同饲料饲养的第15天采集两组小鼠两侧颊黏膜、舌背与舌腹、口底黏膜、上腭硬区黏膜、上下颌牙龈的龈上区域的口腔菌群样本，提取口腔微生物的基因组DNA后，使用GeneAmp 9700热循环仪对其中16S核糖体RNA（16S ribosomal RNA，16S rRNA）基因的V3～V4 区进行扩增，然后在Illumina MiSeq平台上通过双标引扩增和测序对口腔菌群结构进行评估，然后应用QIIME（version 1.6.0）软件进行生物信息学分析。 结果 实验开始后第6天和第37天的FBG水平和OGTT检测结果均显示db/db小鼠比db/m小鼠表现出明显的2型糖尿病症状。α多样性分析显示两组小鼠的口腔菌群在多样性上无显著差异（P＞0.05），而在丰富度上差异显著（P＜0.05）。主坐标分析显示db/db小鼠的口腔菌群结构与db/m小鼠存在显著差异（P＜0.05），物种组成分析以及LEfSe分析显示db/db小鼠口腔菌群在门水平以变形菌门（p_Proteobacteria）为主的相对丰度显著上升（P＜0.05），而在属水平上变形杆菌属（g_Proteus）和肠球菌属（g_Enterococcus）的相对丰度极显著上升（P＜0.001）。 结论 2型糖尿病db/db小鼠的口腔菌群结构和丰富度均较血糖正常的对照小鼠出现了显著变化。

药物成瘾也被称为药物依赖或物质使用障碍，是一种慢性复发性脑疾病，其主要特征为强迫性地寻求和使用药物以及失去对用药的控制能力。长期摄入成瘾物质会导致生理和心理上的依赖，一旦停止使用，患者便会经历一系列强烈的不适反应，如焦虑、失眠、恶心、呕吐等，同时还会产生对药物的强烈渴求。药物依赖分为躯体依赖和精神依赖。躯体依赖也被称为生理依赖，是指因反复使用成瘾性药物而导致的病理性适应状态，其在停药后会产生严重的躯体症状，即戒断综合征。精神依赖也被称作心理依赖，是指使用者对成瘾性药物在心理层面的渴求，以获取服药后的特殊快感，并需要定期或持续使用以维持这种欣快感。成瘾机制复杂，受到遗传、环境等多种因素的影响，并涉及记忆、奖赏和决策等高级神经活动。目前在药物成瘾领域仍缺乏有效的治疗手段。面对复杂的成瘾问题，实验动物研究是不可或缺的。合理运用动物行为模型来模拟人类药物成瘾的情况，可以促进对成瘾机制和脑科学奥秘的深入探索与研究。本文以啮齿类动物为主，介绍了与躯体依赖和精神依赖相关的多种动物实验模型，包括躯体依赖模型、行为敏化模型、条件性位置偏爱模型、药物辨别模型和自身给药模型的构建原理、方法和流程，同时对比各实验模型的特点，论述相关模型在揭示成瘾机制方面的适用条件，旨在为成瘾机制的研究和治疗手段的开发提供支持。

支气管哮喘（简称哮喘）是一种以气道炎症、气道高反应性和气道重塑为特征的常见的慢性呼吸系统疾病，其发病机制复杂且具有异质性，涉及遗传、免疫、环境等多种因素。目前针对哮喘的治疗手段相对有限，深入探究哮喘的发病机制、探寻有效的治疗方法以及开发新型药物已成为当务之急。因此，哮喘动物模型的建立至关重要。然而，至今仍没有一种理想的哮喘动物模型能够全面、准确地复刻人类哮喘发生与发展的所有特征。本文对近5年来哮喘动物模型建立方法的研究进展进行了系统梳理，详细综述了常见实验动物（如小鼠、大鼠、豚鼠）、常见致敏剂（包括卵清蛋白、屋尘螨、脂多糖、甲苯二异氰酸酯），以及用常见实验动物及致敏剂建立哮喘动物模型的方法，并对这些模型的优缺点和适用范围进行了客观评价。本文总结了哮喘模型的评价指标，涉及行为学、肺功能、病理学、免疫学、药效学等多个方面。难治性哮喘动物模型的建立方式虽尚未完善，但通过相关文献检索，总结了难治性哮喘动物模型造模的几种思路，旨在为相关研究提供有价值的参考。根据现有的科学技术，笔者推测未来哮喘动物模型的研究将更加聚焦于临床相关性、技术创新以及多学科融合。具体而言，未来哮喘动物模型将通过多重致敏原联合诱导并应用基因编辑等新技术，提升模型的临床相关性，实现模型的多样化与个性化，并使用生物成像、传感技术动态监测哮喘气道炎症及气道重塑等相关反应，甚至可利用芯片技术寻找动物模型替代方法，最终致力于开发出更能模拟人类哮喘复杂性和异质性的多因素复合模型。

重症肌无力（myasthenia gravis，MG）是一种自身免疫性疾病，主要表现为骨骼肌无力，严重时可累及呼吸功能。目前，西医治疗MG以免疫抑制剂为主，但长期用药的不良反应显著；而中医治疗具有多靶点干预的优势。由于MG的发病机制尚未完全明确，因此建立契合中西医临床特征的动物模型对机制研究及新药开发至关重要。本文系统梳理了MG的中西医病因病机、诊断标准及动物模型研究进展。西医认为MG发病与遗传易感性、环境因素及自身抗体介导的突触后膜损伤密切相关；中医则将其归为“痿证”，病机为先天禀赋不足与后天失养。西医诊断需综合典型症状、疲劳试验、血清抗体检测及电生理检查；中医诊断则以主症结合次症及舌脉辨证分型。现有动物模型以实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis，EAMG）和被动转移重症肌无力（passive transfer myasthenia gravis，PTMG）为主。其中，电鳐乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor，AChR）诱导的EAMG模型与西医诊断标准吻合度较高，但中医次症吻合度不足；人工合成AChR多肽模型应用广泛，但中医证候吻合度低；肌肉特异性酪氨酸激酶（muscle-specific tyrosine kinase，MuSK）、低密度脂蛋白受体相关蛋白4（low density lipoprotein receptor associated protein 4，LRP4）诱导模型及转基因模型创新性强，但临床吻合度偏低。模型评估需结合行为学、电生理及免疫指标，而中医证候模型尚缺系统性构建。笔者认为，未来研究需融合中医病因学造模法与西医病理机制，构建病证结合模型，并建立基于“以方验证”的中医证候评价体系，结合新兴技术提升模型科学性与实用性。本文将为优化MG动物实验设计、推动中西医结合研究提供理论依据，也为中药复方疗效评价及机制探索奠定基础。

职业健康安全管理体系作为现代企业管理制度之一，越来越受到人们的重视。近年来，职业健康安全管理体系在各个领域不断完善和发展，逐渐成为企业竞争力的重要指标。目前，国际实验动物评估和认可委员会（Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International，简称AAALAC International）和中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）均对实验动物相关的职业健康管理提出了要求。而在国内实验动物行业，由于各机构对职业健康相关的法律法规不够熟悉，缺乏经验丰富的管理人员，实验动物机构的职业健康安全管理体系发展相对滞后，尚处于发展初期。本文通过总结作者在实验动物机构建立职业健康安全管理体系的实践经验，首先介绍了国内外有关实验动物的职业健康安全法律法规、我国实验动物机构常见职业病及其危害因素，然后从建立职业健康安全管理制度、开展职业健康安全培训、从业人员职业健康检查、职业病危害因素现场检测、落实建设项目职业病防护设施“三同时”制度、建立及维护职业健康档案、建立职业危害告知管理制度、建立职业病危害事故应急救援预案等方面指出实验动物机构进行职业健康安全管理体系建设的要点，以供行业内作参考。

非人灵长类因其与人类在遗传学和生理学上的高度相似性，成为生命科学研究和生物医药开发的关键性实验动物，不仅为神经系统疾病和传染病的机制研究提供理想平台，还被广泛用于大分子药物的临床前安全性评估，被誉为“金标准”。然而，这种生物学相似性也导致从业人员因接触非人灵长类实验动物或其组织、体液而面临较高的人兽共患病传播风险。结合近年来国内外人兽共患病暴发情况及国家生物安全法颁布实施的背景，本文综述了非人灵长类实验动物从业人员面临的职业风险因素（包括生物因素、化学因素、物理因素）、常见的人兽共患病及其病原体分类、传播途径、危害程度，以及从业人员职业危害暴露的处理方式，进而提出建立多维防控体系：（1）风险评估与应急处理，即通过职业健康安全委员会（Occupational Health and Safety Committee，OHSC）定期识别危险源，制定暴露后紧急处理流程 ；（2）管理体系优化，即完善设施设计、个人防护装备配置，并强化从业人员健康监护与疫苗接种 ；（3）技术培训与规范操作，即开展非人灵长类实验动物行为学、生物安全操作等专项培训，推广智能监控技术以减少攻击性事件等措施。本文旨在提高非人灵长类实验动物从业人员的健康安全意识，加强人员个人防护及专业技能操作的规范性指引，从而保障从业人员健康安全，降低职业暴露率，有效预防实验动物相关职业病。

随着国内实验动物行业的飞速发展，动物实验成为高校科研成果产出和课堂教学的重要辅助手段，实验动物从业人员队伍也日益壮大。虽然近年来国家开始重视实验动物从业人员职业健康，并出台了相关的法规政策，但是现阶段高校针对实验动物从业人员的职业健康风险防控还处于薄弱环节。因此，笔者围绕高校实验动物研究中心管理规范，通过走访、座谈以及学术交流，对国内9家普通高校实验动物从业人员的职业健康管理与防护现状进行了深入调研，揭示了高校实验动物从业人员面临的5大职业健康风险，包括实验动物过敏症、人兽共患传染病、机械性损伤、化学性刺激以及心理因素，指出当前高校普遍存在管理体系不健全、风险评估机制缺失和防护设施不足等核心问题。针对上述问题，本研究提出了三级防控体系：在高校层面，需健全制度并加大经费投入；在实验动物中心层面，应建立动物生物安全实验室，并强化危险源管控、应急预案演练与健康监护；在实验动物从业人员层面，需规范防护装备使用，参与职业健康培训，严格执行安全操作规程，及时上报职业暴露事件。在多方协作的基础上，笔者尝试分析并探讨构建国内普通高校科学、高效的职业健康保障体系的可行路径，以期为实验动物行业的可持续发展提供理论支撑与实践参考。

实验动物机构建立职业健康安全管理体系中重要的一环是建立职业健康档案。此档案是保障实验动物从业人员合法权益的重要环节，也是对实验动物机构本身的保护。依据相关法律法规，实验动物机构有责任为从业机构及实验动物从业人员建立职业健康（也称职业卫生）监护档案并妥善保存。依据《职业卫生档案管理规范》，实验动物机构至少要建立7个职业健康档案盒：建设项目职业健康“三同时”档案，职业健康管理档案，职业健康宣传培训档案，职业病危害因素监测与检测评价档案，用人单位职业健康监护管理档案，从业人员个人职业健康监护档案，以及其他档案。在此基础上，《工作场所职业卫生监督管理规定》又细化了职业健康档案的要求及细节，包括：职业病防治责任制文件；职业卫生管理规章制度、操作规程；工作场所职业病危害因素种类清单、岗位分布及作业人员接触情况等资料；职业病防护设施、应急救援设施基本信息，以及其配置、使用、维护、检修与更换等记录；职业病防护用品配备、发放、维护与更换等记录；职业病危害事故报告与应急处置记录等12项要求。总之，职业健康档案包含了一系列与从业人员职业健康相关的资料和信息，是一个综合性的档案。基于作者的实践经验，本文简述了职业健康档案的主要类型及每个类型的基本内容及建设要点，并对怎样建立职业健康档案进行了详细解析，以期帮助实验动物机构顺利建立职业健康管理档案，完善机构的职业健康安全管理体系。

职业健康是一门致力于识别、评估、预测和控制工作场所内的职业性有害因素以及这些因素对健康潜在影响的科学。其核心目标是通过有效的预防措施和保护机制，保障劳动者的安全，降低职业性有害因素给健康带来的风险，从而促进从业人员在职业活动中的身体健康、心理健康，并增进其社会福利。建设项目职业健康防护设施“三同时”（以下简称职业健康“三同时”）即建设项目的职业病防护设施应与主体工程同时设计、同时建设、同时投入生产和使用。职业健康“三同时”实施的过程包括了职业病危害预评价、职业健康防护设施的设计，确保其符合职业病防治的要求。在建设项目的施工阶段，职业健康防护设施必须与主体工程同时施工，确保设施的完整性和有效性。最后，由建设单位组织对职业病危害控制效果进行评价及职业健康防护设施验收，以保障员工的职业健康。实施建设项目职业健康防护“三同时”是国家的强制性规定，如违规将会面临罚款、强制性停工等后果。然而，对于一些实验动物机构而言，如何实施建设项目职业健康防护设施“三同时”，仍然是个难点。本文通过介绍职业健康“三同时”的发展历程、实验动物机构履行建设项目职业健康“三同时”的意义及具体实施步骤，旨在为实验动物机构完成职业健康“三同时”提供有效的信息和具体的实施方法。

目的 探究登革病毒（dengue virus，DENV）对树鼩不同组织来源细胞的易感性及感染特征，为扩充DENV的树鼩易感细胞库提供依据。 方法 将DENV以感染复数（multiplicity of infection，MOI）为0.02的剂量分别接种于树鼩皮肤成纤维细胞（tree shrew skin fibroblasts，TSFs）、原代树鼩肾上皮细胞（primary tree shrew renal epithelial cells，pTRECs）、树鼩主动脉内皮细胞（tree shrew aortic endothelial cells，TAECs）、树鼩主动脉平滑肌细胞（tree shrew aortic smooth muscle cells，TASMCs）、树鼩肝细胞（tree shrew hepatocytes，THs）、树鼩角膜基质细胞（tree shrew corneal stromal cells，TCSCs）、树鼩脑微血管内皮细胞（tree shrew brain microvascular endothelial cells，TBMECs）及树鼩视网膜微血管内皮细胞（tree shrew retinal microvascular endothelial cells，TRMECs），用常规培养DENV的C6/36、Vero、A549及BHK-21细胞系作为阳性对照。在感染病毒后6 d内，每12 h用倒置显微镜观察各种细胞的病变效应，用实时荧光定量PCR检测细胞培养物中病毒核酸载量，绘制病毒增殖曲线，用噬斑实验检测病毒滴度。 结果 除TRMECs外，DENV对7种树鼩细胞均易感。随着感染时间的延长，7种树鼩细胞均出现变圆、脱落、坏死及裂解等明显的病变效应。在pTRECs、TBMECs、TASMCs、TAECs和THs这5种树鼩细胞的培养裂解物中检测到的病毒核酸载量与4种阳性对照细胞接近，大于4×10⁷ 拷贝/μL。以上5种树鼩细胞均能产生感染性子代病毒，其中3种树鼩细胞TAECs（3.13×10⁵ PFU/mL）、THs（2.03×10⁵ PFU/mL）、pTRECs（1.58×10⁵ PFU/mL）中的DENV滴度较接近阳性对照细胞 C6/36（3.85×10⁵ PFU/mL），且能更早收获病毒。 结论 DENV对树鼩多种组织来源的细胞易感，且病毒增殖速度快于常见其他物种来源的传代细胞系，其中TAECs、THs和pTRECs尤其适于DENV增殖培养。同时，这些细胞可能参与DENV在树鼩体内的感染。

感染性动物疾病模型是研究传染病传播方式、发病机制及抗感染药物不可或缺的重要工具。在感染性动物疾病模型制备及应用过程中不可避免会遇到动物疼痛、痛苦等违背动物福利伦理的情况。因涉及生物安全管理，多数感染性动物实验仍以动物的死亡为实验终点，这对动物福利与伦理的保障工作提出了极高的要求。针对感染性动物实验的福利与伦理指导原则或规范亟待建立。本文以实验动物福利与伦理的基本原则为依据，探讨感染性动物实验中福利与伦理的特殊性，强调感染性动物实验应充分考量研究计划的科学研究目的、人员职业健康安全和动物福利伦理三者之间的平衡。本文还通过文献研究以及与常规实验动物福利伦理要求的对比分析，从人员要求、实验动物选择标准、生存环境管理及设施设备、特殊照料和兽医护理、人道终点等方面提出感染性动物实验对福利伦理的特殊要求。笔者认为，开展感染性动物实验的人员应接受有效的生物安全培训，机构应赋予实验动物使用与管理委员会（Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC）、兽医和兽医技术人员足够权限，以保障人员与动物福利伦理；实验动物的选择需充分考虑研究目的、福利、伦理及生物安全等要求，实验动物易感性和体型大小是高等级生物安全实验室重点关注的内容；明确人道终点是感染性动物实验不可或缺的福利伦理要素，环境丰富化和特殊护理是实现动物福利伦理必要的保障。本文内容可为相关工作提供参考。