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    1. 复杂疾病小鼠模型构建新策略:类精子单倍体胚胎干细胞介导的半克隆技术
    赖梭梅, 丁一夫, 李劲松
    实验动物与比较医学    2021, 41 (5): 369-383.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.143
    摘要645)   HTML243)    PDF (6213KB)(723)    收藏
    类精子单倍体胚胎干细胞是源自小鼠孤雄囊胚中的一种新型单倍体胚胎干细胞,仅含有父源遗传物质,性染色体为X染色体,能在体外长期自我更新、增殖或诱导分化,并可以利用CRISPR系统进行单基因或多基因的编辑,能替代精子使卵母细胞受精。区别于原核注射、卵胞质内注射获得嵌合体或利用四倍体补偿技术等传统构建基因修饰小鼠模型的方法,通过将基因编辑后的类精子单倍体胚胎干细胞注射到卵母细胞中,可以高效稳定地一步获得基因型确定的半克隆小鼠,不会存在嵌合现象,原代小鼠即可用于研究。基于类精子单倍体胚胎干细胞获得的多基因精准编辑的复杂疾病小鼠模型,可以在生物个体水平上阐述多个基因协同互作的效应,从而更充分地模拟复杂的、可能受多个基因影响的人类疾病的各种病理特征,以挖掘新的诊断和治疗方法。
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    2. CNAS实验动物机构认可进展
    吴孝槐
    实验动物与比较医学    2021, 41 (5): 384-391.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.141
    摘要769)   HTML278)    PDF (1886KB)(929)    收藏
    中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)实验动物机构认可制是既与国际接轨又符合中国国情的第三方评价制度,与实验动物许可证制度互为补充,是我国实验动物机构管理的一项重要制度。本文介绍了CNAS实验动物机构认可的起源、发展历程、认可现状,以及面临的问题与挑战,并提出了完善实验动物机构认可制度的对策和建议。
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    3. 云南省实验动物工作40年发展历程与思考
    罕园园, 李娜, 代解杰
    实验动物与比较医学    2021, 41 (5): 399-408.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.136
    摘要484)   HTML235)    PDF (1769KB)(554)    收藏
    实验动物是支撑科技进步与创新不可或缺的战略性资源,是国家保持科技领先、提高国际科技竞争力的核心要素之一。本文对近40年云南省实验动物工作的法制化与标准化建设、主要的研究机构、科学研究特色与学术成就等发展历程,以及存在问题与对策等进行梳理归纳,以期为我国实验动物事业的发展提供参考。
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    4. 脑缺血动物模型的制备及评估进展
    胡志斌, 黄缨, 丁玉强
    实验动物与比较医学    2021, 41 (4): 271-283.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.085
    摘要744)   HTML256)    PDF (17292KB)(522)    收藏
    脑缺血是临床上常见的脑血管疾病,约占所有脑血管疾病的80%,其主要是由于脑血管供血不足引起。目前已有多种动物模型被用来进行脑缺血致病机制及治疗研究。本文结合造模示意图,介绍全脑及局灶性相关脑缺血动物模型的种类及制备方法,并对其优缺点进行了概括;同时对脑缺血模型制备所用的动物种类、啮齿类动物相关感觉运动能力评估及组织学评估的研究进展进行综述,以期为脑缺血动物模型的选择和应用提供参考。
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    5. 2020版美国兽医协会动物安乐死指南解析
    卢今, 张颖, 潘学营, 王剑, 严国锋, 周晶, 朱莲, 陈学进, 李垚, 庞万勇
    实验动物与比较医学    2021, 41 (3): 195-206.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.086
    摘要1614)   HTML420)    PDF (963KB)(1119)    收藏
    巴比妥酸盐及其衍生物的过量注射是绝大多数动物种类首选的安乐死方法,然而在此类药物不能或很难获得时,兽医可参考美国兽医协会现行版《动物安乐死指南》(AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals)(简称《指南》)选用其他合适的安乐死方法。2020版《指南》根据最新的研究文献,对现有的安乐死方法、技术和药物进行补充及修改。本文总结了2020版《指南》的更新内容,并在此基础上归纳列举了适用于常见实验动物种类的首选安乐死方法、条件性接受安乐死方法和不可接受的安乐死方法,另外简述了实施动物安乐死的基本原则和注意事项。
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    6. 两种不同类型实验动物屏障设施的气流组织计算流体力学模拟技术分析
    周斌, 赵勇, 汪亚兵, 刘吉宏
    实验动物与比较医学    2021, 41 (3): 252-258.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.077
    摘要479)   HTML221)    PDF (1353KB)(430)    收藏
    选取动物实验和生产两种不同类型屏障设施作为研究对象,以余热排除效率、氨气排污效率、二氧化碳排污效率以及平均空气龄作为其气流组织的评价指标。采用计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)数值模拟技术,对比分析了在不同换气次数、不同排风口位置情况下,两种类型实验动物设施的气流组织优劣势。结果表明,以上述指标评价时,顶部送风、下侧排风辅助的送排风形式较为适合。此外,对于饲养密度高的实验动物生产设施,建议根据饲养室的热负荷程度调整最低换气次数。
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    7. 利用基质胶阻断门静脉建立改良ALPPS手术小鼠模型
    沈皓, 陈瑶, 沈锋, 吴孟超
    实验动物与比较医学    2021, 41 (2): 91-99.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.204
    摘要457)   HTML172)    PDF (6179KB)(482)    收藏
    目的 建立一种不依赖显微外科技术的改良联合肝脏分隔和门静脉结扎的二步肝切除(ALPPS)手术小鼠模型,并验证其刺激肝再生的有效性。 方法 75只C57BL/6小鼠随机分为ALPPS-显微手术(ALPPS-micro)组、ALPPS-基质胶(matrigel)封堵(ALPPS-matri)组和基质胶封堵对照(Control-matri)组。ALPPS-micro组和ALPPS-matri组分别采用显微镜下结扎法和基质胶封堵法阻断门静脉;Control-matri组作为对照,验证手术的有效性和安全性。记录各组手术时间、术中出血以及围手术期生存数据,并采集术后不同时间的血液和肝脏标本;通过计算肝脏质量与体质量比值(肝体比)以及检测增殖相关分子Cyclin D1和Ki-67的表达水平,比较ALPPS-显微手术和ALPPS-基质胶封堵手术对肝脏再生的刺激作用。 结果 与ALPPS-micro组相比,ALPPS-matri组手术操作时间短[(19.0±4.6)min 比(37.5±9.3)min,P<0.05],术中出血量少[(153±39)mL 比(317±124)mL,P<0.05],一期术后死亡率更低(4.0%比20.0%,P<0.05)。肝体比数据和增殖相关分子检测结果提示,ALPPS-matri组具有与ALPPS-micro组类似的刺激肝脏再生的效果。 结论 利用基质胶的改良ALPPS模型与基于显微外科的传统ALPPS模型相比,具有相似的肝脏再生刺激效果,但手术时间更短,术中出血更少,围手术期死亡率更低。
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    8. 大鼠尾椎间盘不同切片方式及染色方法的组织学观察比较
    赵宇朋, 周平辉, 官建中
    实验动物与比较医学    2021, 41 (2): 100-107.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.108
    摘要951)   HTML113)    PDF (3883KB)(590)    收藏
    目的 比较大鼠尾椎间盘不同切片方式及染色方法的优缺点,为相应的临床诊断及实验研究奠定理论基础。 方法 收集SD大鼠尾椎间盘,制成冷冻切片及石蜡切片后,分别行苏木精-伊红染色(HE染色)、番红-固绿染色、Masson染色、甲苯胺蓝染色,以及针对一型胶原蛋白(typeⅠcollagen,COL-Ⅰ)、二型胶原蛋白(typeⅡcollagen,COL-Ⅱ)和糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)的免疫荧光染色,对比观察椎间盘各层组织形态及蛋白表达的情况。 结果 在染色方法中,石蜡切片HE染色能清晰显示各层组织;Masson染色能清晰显示纤维环组织及髓核组织;番红-固绿染色及甲苯胺蓝染色能较好地显示软骨各层及软骨下骨结构。冷冻切片的免疫荧光染色中,纤维环组织的胶原蛋白多为COL-Ⅰ,髓核组织中胶原蛋白多为COL-Ⅱ,而GAG多由髓核细胞及髓核样细胞分泌。 结论 观察椎间盘各层组织时,选用HE染色及Masson染色等染色,其中石蜡切片优于冷冻切片;观察椎间盘各种蛋白的表达及分布时,选用免疫荧光染色,其中冷冻切片优于石蜡切片。
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    9. 皮肤光老化小鼠模型的构建及效果评估
    孔悦, 郭砚
    实验动物与比较医学    2021, 41 (2): 116-121.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.191
    摘要1231)   HTML56)    PDF (1677KB)(645)    收藏
    目的 建立中波紫外线诱导小鼠皮肤光老化动物模型,为皮肤光老化的研究提供参考。 方法 30只雄性KM小鼠分为对照组和模型组,对照组接受正常光照,模型组使用D-半乳糖皮下注射联合中波紫外线每日照射40 min,每次辐射量为120 mJ/cm 2,持续40 d。通过小鼠背部脱毛皮肤表面肉眼观察,皮肤组织HE染色和Masson染色病理学观察,皮肤组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量测定,以及采用蛋白质印迹法检测小鼠背部脱毛皮肤中基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、c-fos和c-jun的表达水平,进行建模效果评估。 结果 与对照组相比,模型组小鼠的皮肤颜色加深、松弛、干燥、粗糙,且褶皱加深;组织病理染色观察发现,模型组的表皮增厚,真皮层纤维减少、断裂、排列杂乱。模型组的皮肤中GSH-PX和SOD 活性降低,HYP含量降低,MDA含量增加,而且MMP-1、c-fos和c-jun表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。 结论 皮下注射D-半乳糖联合中波紫外线照射后,小鼠产生的皮肤损伤与光老化的皮肤损伤一致;该模型可作为一种有效的皮肤光老化小鼠模型。
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    10. 高等院校实验动物管理中面临的问题及对策
    李莉, 赵善民, 崔淑芳
    实验动物与比较医学    2018, 38 (1): 65-68.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.01.014
    摘要194)      PDF (677KB)(333)    收藏
    实验动物是医科类院校教学科研工作中的重要载体和工具,其在教学实践、科研创新等工作中扮演着的必不可少的角色,实验动物管理工作直接影响着高等院校,特别是医科院校教学及科研质量与效率。本文针对我校实验动物管理过程中,在人才队伍建设、管理力度、科研水平与特色、生物安全隐患、动物福利、设施使用效率等方面存在的诸多问题,提出了未来提升实验动物管理工作的具体措施,以期进一步提升我校的实验动物管理水平,并为广大医科院校的实验动物管理工作提供参考。
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    11. 刺山柑果实精制提取物抗类风湿关节炎的实验研究
    周海凤, 乐心逸, 王娴娴, 丁广宇, 李默影, 沈龙海, 吴彤
    实验动物与比较医学    2018, 38 (3): 227-230.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.02.012
    摘要315)      PDF (374KB)(401)    收藏
    目的 评价刺山柑果实精制提取物对弗氏完全佐剂和II型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的治疗效果。 方法 采用弗氏完全佐剂和II型胶原为造模剂分别建立大鼠类风湿性关节炎模型,测定刺山柑精制提取物对关节炎大鼠足趾肿胀抑制率和相关炎症因子表达的影响。 结果 刺山柑精制提取物对大鼠佐剂性关节炎继发性病变具有一定的治疗作用,治疗效果均持续至实验结束,其中刺山柑高剂量的抑制率基本稳定在20%以上,对大鼠关节周围组织滑膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)有一定下调作用。刺山柑提取物对II型胶原诱导的大鼠类风湿关节炎足趾肿胀也具有显著抑制作用, 100 mg/kg剂量组在给药后3 d, 开始出现一定程度的抑制足关节的肿胀,给药后14 d抑制率达到40.3% (P<0.05)。 结论 刺山柑精制提取物具有抑制弗氏完全佐剂和II型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的作用,能有效缓解其关节附件的肿胀,其作用机制可能是通过下调TNF-α、IL-1、IFN-α等相关炎症因子的表达。
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    12. 肿瘤患者来源的异种移植(PDX)模型
    师长宏
    实验动物与比较医学    2018, 38 (3): 165-168.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.03.001
    摘要604)      PDF (348KB)(423)    收藏
    将患者新鲜肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠建立的患者来源异种移植(patient-derived xenograft, PDX)模型较好地保持了原发肿瘤的遗传特性和异质性,在肿瘤的个体化治疗研究中具有独特的优势。常用PDX模型的移植方法主要有皮下移植、肾包膜移植和原位移植。移植瘤的溯源方法包括组织形态学比较、肿瘤特异性标志物分析、短片段重复序列分型和测序分析。在PDX模型研究中,需要重点关注影响模型成功率的因素、人源化问题、淋巴瘤的发生和药物评价中治疗策略的选择。虽然从目前临床数据来看,基于PDX模型的个体化治疗还没有显示出实质性疗效,仍处于临床验证阶段,但PDX模型的建立和应用为肿瘤学研究,特别是肿瘤的个体化治疗提供了良好的实验平台。我们在强调PDX模型个体化的同时,要善于应用共性思维,开展基于PDX模型基因组学的肿瘤靶向药物筛选。
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    13. 大鼠放射性心脏损伤机制的比较医学意义
    马金柯, 高世乐, 胡宗涛, 王崇, 高杉, 董六一, 刘阳, 唐正中
    实验动物与比较医学    2018, 38 (3): 188-193.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.03.005
    摘要260)      PDF (1099KB)(446)    收藏
    目的 探讨大鼠放射性心脏损伤(RIHD)模型的建立及观察不同时间点超声心动图、心电图及血清标志物的变化规律。 方法 清洁级SD雄性大鼠90只, 随机分为正常对照组和照射组, 其中照射组分为5 Gy、10 Gy、20 Gy、30 Gy 4个不同剂量组, 每组18只,瓦里安直线加速器分别给予不同剂量照射心脏, 照射后2周、4周、12周末分批处死大鼠。处死前称量大鼠体质量, 超声测左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP),记录心电图,酶联免疫法检测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CKMB)、心肌肌钙蛋白I变化(CTnI),称取心脏质量。 结果 同正常对照组比较, 照射组大鼠随照射剂量增加, LVEF、LVSP逐渐下降,LVEDP逐渐上升(P<0.05或P<0.01); 心电图随照射剂量增加, 心率加快, ST段抬高明显(P<0.05或P<0.01); 血清CKMB、CTnI值不同程度升高(P<0.05或P<0.01); 30 Gy组同20Gy组比较, 检测指标差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 单次20 Gy照射大鼠全心, 至第4周末, 发生大鼠RIHD, 模型制备成功。
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    14. 睡眠剥夺对小鼠生长发育影响初探
    张雅荃, 杨文静, 林丽芳, 阮文婕
    实验动物与比较医学    2018, 38 (3): 212-216.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.03.009
    摘要342)      PDF (627KB)(404)    收藏
    目的 检测睡眠不足对大鼠体质量、部分血液指标、激素水平及免疫水平的影响,研究睡眠对青少年生长发育的作用。 方法 利用一种平台式睡眠剥夺仪构建小鼠慢性睡眠剥夺模型,持续观察20 d。观测睡眠剥夺对小鼠体质量及部分血液学指标,血清中皮质酮、生长激素、白介素-2及脾脏皮质酮受体水平,MicroCT检测小鼠骨量指标。 结果 与作息正常对照组小鼠比较,睡眠剥夺组小鼠体质量及血液学指标,血清中皮质酮、生长激素、白介素-2(IL-2)及脾脏皮质酮受体(GR)水平都都出现明显变化。MicroCT检测表明,睡眠剥夺组小鼠骨量指标显著劣于对照组。 结论 睡眠不足影响小鼠正常生长发育,对小鼠整体的免疫功能和神经系统功能等造成潜在的损害。提示睡眠在青少年生长发育中具有重要作用。
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    15. 不同浓度四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的比较
    孙家昌, 孙妩弋, 厉歆然, 彭文婷, 杜佳佳, 魏伟
    实验动物与比较医学    2018, 38 (4): 255-260.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.003
    摘要761)      PDF (5907KB)(643)    收藏
    目的 对比观察不同剂量四氯化碳(CCl 4)诱导小鼠肝纤维化模型的效果,探索一种稳定可行且较为高效的肝纤维化小鼠造模方法。 方法 将60只C57BL/6J小鼠随机分为正常组和模型组,模型组小鼠分别腹腔注射体积分数10% 的CCl 4(5 mL/kg)以及体积分数20%的 CCl 4(1 mL/kg),每周2次,连续8周。分别在造模2周、4周、6周、8周注射后处死小鼠,进行HE染色和Masson染色,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,以及肝匀浆氧化/抗氧化指标,丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)和超氧化物岐化酶(SOD)变化,Western blotting法检测肝组织中胶原表达情况。 结果 随着造模时间的延长,病理染色显示肝纤维化程度不断加重,胶原表达逐步增加,血清ALT、AST水平逐渐升高,肝匀浆SOD、GSH活性降低,氧化产物MDA含量升高。在造模的相同时间点,体积分数10% CCl 4、5 mL/kg剂量组相比于体积分数20% CCl 4、1 mL/kg剂量组,病理染色显示肝纤维化程度更加严重,血清ALT、AST水平明显升高,肝脏中SOD、GSH活性明显降低,氧化产物MDA含量明显升高,肝纤维化形成的时间更短,效果更好。 结论 两种造模方法都能形成肝纤维化小鼠模型,但体积分数10% CCl 4(5 mL/kg)剂量组的纤维化形成时间更短且效果更好。因此,每周2次,连续8周腹腔注射10% CCl 4(5 mL/kg)可作为一种较为理想的纤维化小鼠造模方法。
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    16. 不同部位注射6-羟基多巴胺建立帕金森病大鼠模型比较分析
    黎民, 常学辉, 张良芝, 雷震, 罗申
    实验动物与比较医学    2018, 38 (4): 261-266.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.004
    摘要318)      PDF (7313KB)(210)    收藏
    目的 探索6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑内不同部位注射建立稳定、有效的帕金森病(PD)大鼠模型的方法。 方法 SD大鼠随机分为中脑单点组、中脑双点组、纹状体单点双注组及对照组,将6-OHDA按照分组方案注入大鼠脑内,分别在注射后1周、2周、4周、8周观察大鼠的行为学变化;8周取大鼠脑组织进行病理学检测并对络氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学阳性细胞进行分析。 结果 ①中脑单点组造模成功率为72.7%,中脑双点组为60.0%,纹状体单点双注组为47.6%,对照组为0% (P<0.05)。②中脑单点组第1周时PD模型大鼠平均旋转圈数为(7.3±0.2) r/min,2周时较前增加(P<0.05),4周时较前增加(P<0.05),8周时有所增加但无差别(P>0.05);中脑双点组和纹状体单点双注组平均旋转圈数亦有相似变化趋势,但相同时间点各组间平均旋转圈数无差异(P>0.05)。③中脑单点组、中脑双点组及纹状体单点双注组PD大鼠损毁侧TH阳性细胞平均积分光密度(IOD)明显比对照组小(P<0.01);中脑单点组PD大鼠损毁侧TH阳性细胞IOD比中脑双点组及纹状体单点双注组小(P<0.05)。 结论 6-OHDA中脑黑质致密区单点注射法建立的PD大鼠模型成功率高,模型稳定,死亡率低。
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    17. 动物实验教学中贯彻动物福利理念措施分析
    金成文, 陆洪英, 王建英, 王忠伟, 郭顺生, 成敏
    实验动物与比较医学    2018, 38 (4): 307-309.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.013
    摘要250)      PDF (520KB)(350)    收藏
    动物实验是医学教育基本技能培训的重要内容,是医学教育不可或缺的主要手段。在动物实验教学中涉及到很多动物福利问题,但在以往的动物实验教学中,我们多注重专业知识和操作技能的培训,而较少涉及实验动物福利理念相关内容的传授。随着医学与人文越来越紧密的结合,如何将动物福利理念贯穿于整个实验过程,实现动物福利,达到医学人文教育目的 ,是实验教学需要面对的课题。
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    18. 肥胖大鼠的胰岛素抵抗指数与血脂的相关性观测
    盛译萱, 曾国威, 姚亮亮, 李冰涛, 姜丽, 张启云, 徐国良
    实验动物与比较医学    2018, 38 (6): 417-421.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.003
    摘要299)      PDF (384KB)(260)    收藏
    目的 通过高脂饮食诱导建立肥胖大鼠模型,观测肥胖大鼠血脂等生化指标与胰岛素抵抗的相关性。 方法 采用36%脂肪供能的高脂饲料持续喂养雄性SD大鼠12周,检测摄食量,观测大鼠体质量,计算Lee's 指数,多时间段收集血清测定血清胰岛素(Fins)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,求算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。聚类分析筛选产生胰岛素抵抗的大鼠,分析其生化指标与正常组的差异。 结果 高脂饲料诱导大鼠4周后产生肥胖,体质量、Lee's指数显著升高(P<0.01,P<0.05)。以肥胖大鼠12周末HOMA-IR为筛选条件,通过聚类分析选出产生胰岛素抵抗的大鼠16只,经统计学处理,与正常组相比,16只大鼠8周后即产生胰岛素抵抗(P<0.05),TC和HDL-C显著下降(P<0.05,P<0.01),但FBG、TG、LDL-C水平无显著改变。 结论 采用36%脂肪供能高脂饲料诱导的肥胖大鼠在8周末出现50%大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗大鼠的脂代谢发生明显紊乱。
    参考文献 | 相关文章 | 多维度评价
    19. 灵芝多糖对脂多糖诱导的巨噬细胞TLR4/NF-κB通路调控及下游炎症因子的影响
    杨燕燕, 谢金东, 周建华, 林玮, 王训立
    实验动物与比较医学    2018, 38 (6): 434-439.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.006
    摘要277)      PDF (730KB)(242)    收藏
    目的 探讨灵芝多糖(GLPs)对脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)核因子-κB(NF-κB)信号通路及炎症因子的影响机制。 方法 体外实验分为5组,分别为对照组,LPS组及GLPs药物低、中、高剂量组。除对照组外,其余均用l µg/mL LPS刺激16 h,药物组分别同时给予GLPs 40 µg/mL、80 µg/mL、160 µg/mL干预2 h,收集细胞。采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法测定TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的mRNA和蛋白表达情况。 结果 与对照组相比,LPS组小鼠RAW264.7细胞TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6 mRNA表达明显升高(P<0.05)。采用GLPs干预后显著抑制TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6的表达,与LPS组相比,GLPs中、高剂量组TLR4、MyD88、TRAF-6 mRNA及GLPs低、中、高剂量组NF-κB mRNA均具有显著性差异(P<0.05)。各组的TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6蛋白表达趋势与mRNA基本一致。与对照组相比,LPS组小鼠RAW264.7细胞TNF-α、LOX-1 mRNA水平显著升高(P<0.01),采用GLPs干预后TNF-α、LOX-1 mRNA均显著低于LPS组(P<0.05)。各组的TNF-α、LOX-1蛋白表达趋势与mRNA基本一致。 结论 GLPs可阻断TLR4高表达及下游MyD88依赖性途径,还可明显抑制TNF-α、LOX-1等炎症因子的表达。
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    20. 慢性低氧性肺动脉高压大鼠动脉血气分析指标的变化及其意义
    张舒婷, 姚青青, 李宜珊, 施熠炜
    实验动物与比较医学    2021, 41 (1): 27-32.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.080
    摘要555)   HTML78)    PDF (1117KB)(459)    收藏
    目的 探讨慢性低氧诱导的低氧性肺动脉高压大鼠模型中动脉血气分析指标的变化及意义。 方法 随机将36只SD雄性大鼠分为常氧对照组和低氧(1、3、7、14和21 d)组,低氧组置于低氧舱(O 2体积分数为10%)相应的天数。采用右心导管法测定右心室收缩压(RVSP),计算右心室(RV)与左心室(LV)+室间隔(S)质量比值,得出右心室肥厚指数(RVHI)。采用Masson染色法观察肺动脉病理结构改变。经腹主动脉取血进行动脉血气分析,测定指标包括酸碱度(pH)、动脉血二氧化碳分压(PaCO 2)、动脉血氧分压(PaO 2)、动脉血氧饱和度(SaO 2)、碳酸氢盐(HCO 3 )、钠离子(Na +)、钾离子(K +)、钙离子(Ca 2+)、血细胞比容(Hct)和血红蛋白(Hb)。 结果 低氧各组大鼠RVSP和RVHI均明显高于常氧对照组(P<0.05)。与常氧对照组相比,低氧(7、14、21 d)组大鼠肺动脉异常重塑。与常氧对照组相比,低氧各组pH和HCO 3 含量均明显降低(P<0.05),低氧21 d组PaCO 2显著增高(P<0.05),低氧14 d组PaO 2和SaO 2均明显降低(P<0.05),除低氧1 d外各组Na +浓度和低氧3 d组Ca 2+浓度明显降低(P<0.05),除低氧14 d外各组K +浓度显著升高(P<0.05),低氧各组Hct和Hb水平均明显升高(P<0.05)。低氧性肺动脉高压大鼠动脉血气分析中Na +水平与RVSP呈负相关(P<0.05)。 结论 低氧性肺动脉高压大鼠动脉血气分析指标pH、PaCO 2、PaO 2、SaO 2、HCO 3 、Na +、K +、Ca 2+、Hct和Hb发生明显变化,参与并调控低氧性肺动脉高压的发生发展,其中Na +水平可能成为间接评估低氧性肺动脉高压严重程度的指标。
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    21. 葡聚糖硫酸钠不同给药方式建立小鼠溃疡性结肠炎模型
    赵亚妮, 李瑶, 张妍, 王四旺, 安军明
    实验动物与比较医学    2021, 41 (1): 33-39.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.090
    摘要1073)   HTML48)    PDF (1465KB)(750)    收藏
    目的 研究小鼠分别经灌胃或自由饮用葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)后发生溃疡性结肠炎的成模情况。 方法 选取32只雄性C57BL/6小鼠,随机分为空白组、3% DSS自由饮用组、5 g/kg和6 g/kg DSS灌胃组,每组8只,连续给药7 d。每天记录各组小鼠的饮水量、体质量、粪便性状及便血情况,进行小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分。第8天处死小鼠,分离小鼠结肠、胸腺及脾脏,称胸腺和脾脏质量,计算免疫器官指数;测量结肠长度,观察结肠病理变化,进行组织病理学评分。 结果 各给药组小鼠7 d的DSS总摄入量均超过30 mg/g。与空白组比较,灌胃组小鼠的DAI评分无明显差异(P>0.05),自由饮用组小鼠从第3天起DAI评分明显升高(P<0.01)。与空白组比较,各给药组小鼠的结肠明显缩短(P<0.01),但胸腺指数差异无统计学意义(P>0.05);自由饮用组小鼠的胸腺指数下降和结肠萎缩程度较灌胃组更明显(P<0.05)。组织病理学改变方面,6 g/kg灌胃组小鼠结肠发生轻微病理学变化;自由饮用组小鼠结肠的病理学改变更为显著,组织病理学评分明显高于灌胃各剂量组(P<0.01或P<0.05)。 结论 采用DSS建立小鼠溃疡性结肠炎模型时,自由饮用的方式较灌胃造模效果更好。
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    22. 痰热清注射液的安全药理学动物实验评价
    胡俊, 张小利, 杨春, 陆锦遥, 王琼, 谷颖敏, 谢家骏, 张超超, 田雪松
    实验动物与比较医学    2021, 41 (1): 46-54.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.068
    摘要483)   HTML27)    PDF (1073KB)(399)    收藏
    目的 观察痰热清注射液对Beagle犬心血管系统、呼吸系统及ICR小鼠中枢神经系统的影响,为其临床用药提供安全性实验数据。 方法 24 只Beagle犬雌雄各半,按体质量随机分为低剂量(2.5 mL原液/kg)、中剂量(5.0 mL原液/kg)、高剂量(10.0 mL原液/kg)痰热清注射液组和溶剂对照组,每组6只;麻醉状态下,右前肢内侧皮下头静脉推注给药,测定给药前、给药40 min和80 min,以及给药后5、10、20、30、60、90、120、150、180、210和240 min的血压、心率、心电图及呼吸情况。160只ICR小鼠雌雄各半,其中60只按体质量随机分为低剂量(3.6 mL原液/kg)、中剂量(6.25 mL原液/kg)、高剂量(12.5 mL原液/kg)痰热清注射液组和溶剂对照、阳性对照组,尾静脉注射给药后观察小鼠一般行为和自发活动;对50只同样分组的小鼠,测定给药后不同时间点的协调运动情况;对另外50只同样分组的小鼠,测定给药后阈下睡眠剂量戊巴比妥钠的协同作用。 结果 痰热清注射液各剂量组与相同时间点的溶剂对照组及自身给药前相比,Beagle犬的收缩压、平均动脉压、心电图及呼吸频率的差异均无统计学意义(P>0.05),个别时间点的舒张压和心率差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),但未见明显的剂量或时效相关性。给药后高剂量组ICR小鼠各时间点的自发活动均减少(P<0.05,P<0.01或P<0.001),而协调运动评级在给药后30、50及90 min均明显增高(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。 结论 在本实验条件下,单次静脉推注痰热清注射液对Beagle犬的心血管、呼吸系统无明显影响;高剂量痰热清注射液对ICR小鼠的中枢神经系统有一定影响,主要表现为自发活动减少,协调运动障碍,可能与其主要有效成分熊胆粉相关。
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    23. 高脂饲料诱导代谢性疾病动物模型
    罗建波, 李军晖, 王海江, 周小玉, 曾涛, 周佳, 朱献军
    实验动物与比较医学    2021, 41 (1): 70-78.   DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2021.050
    摘要529)   HTML36)    PDF (666KB)(502)    收藏
    采用饲喂高脂饲料的方式造成动物代谢异常,此法常被用来探索疾病的发生、发展规律,为临床研究提供理论依据。本文综述了常用高脂饲料诱导的代谢性疾病动物模型,并探讨疾病模型形成机制及各营养成分的作用方式,为相关研究人员建立疾病模型时提供理论和实践参考。
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    24. 关于建设我国实验动物福利保障体系的思考
    刘晓宇, 赵海龙, 卢选成, 李晓燕
    实验动物与比较医学    2019, 39 (4): 326-330.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.04.014
    摘要213)      PDF (546KB)(371)    收藏
    基于我国实验动物福利现状,本文阐述自《实验动物管理条例》发布以来我国实验动物福利工作被提出、重视,而后逐步进入制度化建设的过程。从梳理现况、发现不足、借鉴国际经验、立足我国国情等方面分析了“建设什么样的实验动物福利保障体系”的问题。提出我国实验动物福利保障体系应建立在许可证制度和质量合格证制度基础上,确保实验动物的基本福利; 以实验动物机构认可制度为支点,推动全国实验动物福利工作达到更高水平; 管理网应覆盖所有实验动物和所有环节,消灭盲区。我国应在宣传贯彻实验动物福利理念、推动实验动物福利立法和发挥科技的引领和支撑作用等方面继续推进我国实验动物福利保障体系建设,争取在下个三十年实验动物管理工作能取得更辉煌的成绩。
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    25. 树鼩在生物医学研究中的优势与挑战
    贾杰, 代解杰
    实验动物与比较医学    2019, 39 (1): 3-8.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.01.002
    摘要412)      PDF (463KB)(366)    收藏
    动物模型是研究人类疾病发生机制和药物筛选及有效性和安全性评价的重要手段。随着分子生物学技术的发展及对疾病分子遗传机制研究的深入,啮齿类动物与人类遗传背景、生理及代谢特征等方面的差异使得啮齿类动物很难体现人类疾病的复杂症状,在生命科学研究中的局限性日益突出。灵长类动物在进化上与人类更为接近,其生物学特性与人类非常相似,在生命科学研究中有着不可替代的作用,但目前灵长类动物遗传操作困难、研究周期长、成本高。树鼩是一种在进化上比啮齿类更为接近灵长类的小型哺乳动物,其神经功能障碍和感染性疾病等多个系统的关键因子和信号通路与人有保守和独特的特征,同时与灵长类动物比较,具有易饲养、繁殖快、研究成本低等优点,目前已越来越多地应用于生物医学研究领域。本文基于树鼩在生理代谢过程和组织解剖结构方面的特点,分析其在生物医学研究中的优势与面临的问题。
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    26. 两种小鼠肺癌模型的构建及Micro PET-CT观察
    沈艳, 王韵, 张汝, 阮铮, 毛建华
    实验动物与比较医学    2019, 39 (1): 39-45.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.01.008
    摘要681)      PDF (1430KB)(465)    收藏
    目的 比较尾静脉注射与肋间隙肺部原位注射人源非小细胞肺癌(NSCLC)细胞制备肺癌小鼠模型肿瘤形成情况的差异。 方法 使用NSCLC株NCI-H1975细胞,通过尾静脉注射以及经肋间隙肺部原位注射的方法制备NOD-SCID小鼠肺癌模型,于造模后15 d,应用小动物PET-CT技术观察小鼠肺部肿瘤形成情况; 解剖小鼠,检测肺部病理改变。 结果 造模15 d后,经尾静脉注射NCI-H1975细胞的小鼠在肺部不能检测到肿瘤,而经肋间隙肺部原位注射NCI-H1975细胞的小鼠能够在肺部检测到明显的肿瘤形成。 结论 肋间隙肺部原位注射肺癌细胞制备的肺癌小鼠模型肺部肿瘤形成均一、稳定、可重复、高效,是较好制备原位肺癌模型的方法。
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    27. 子宫内膜异位症大鼠模型研究进展
    纪莲, 马铁, 刘冬妍
    实验动物与比较医学    2019, 39 (1): 72-76.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.01.014
    摘要270)      PDF (471KB)(356)    收藏
    为临床深入研究子宫内膜异位症(EMs)的病因、发病机制、治疗药物和预防对策提供合理的大鼠模型。本文对EMs大鼠模型的发病机制、建模方法、优化措施、评价标准以及模型应用等进行综合阐述和比较,研究者可根据实验需要选择合适的建模方法,使其更加贴合实验及临床研究的需要。
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    28. 内窥镜引导气管注入博来霉素建立小鼠肺纤维化模型
    余华军, 吴尚, 黄慧, 林碧云, 伍俊, 欧华俊, 张海涛
    实验动物与比较医学    2019, 39 (2): 94-98.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.005
    摘要394)      PDF (1029KB)(460)    收藏
    目的 建立在内窥镜直视下气管插管法,并采用此方法建立博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型。 方法 将5只C57BL/6J小鼠,在内窥镜直视下进行小鼠气管插管,建立气管插管方法及步骤。将10只C57BL/6J小鼠随机均分为对照组和实验组,按照建立的方法进行气管给药,对照组气管插管给予50 µL的生理盐水,实验组气管插管给予50 µL 3.5 mg/kg的博来霉素,观察各组小鼠的死亡率。灌注后28 d,颈椎脱臼法处死小鼠,比较两组小鼠肺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和羟脯胺酸(HYP)、丙二醛(MDA)含量。取小鼠肺组织进行病理切片,HE、Masson染色观察肺组织的病理情况。 结果 15只C57BL/6J小鼠采用多功能内窥镜直视下气管插管均能成功,无小鼠因插管后死亡,5只给予印度墨汁的预实验小鼠气管下端开始直至肺部均有黑色物质均匀分布。与对照组比较,实验组小鼠肺组织中HYP、MDA含量增高(P<0.01); GSH-PX、SOD含量降低(P<0.01)。进行HE、Masson染色显示,与对照组比较,实验组小鼠肺组织胶原沉积严重,病理学表现符合肺纤维化改变。 结论 采用多功能内窥镜直视下气管给药的方法,给药量准确、安全、简便。以此方法建立博来霉素诱导小鼠肺纤维化的模型成功率高,值得推广应用。
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    29. 树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养
    王文广, 匡德宣, 陆彩霞, 罕园园, 李娜, 仝品芬, 孙晓梅, 代解杰
    实验动物与比较医学    2019, 39 (2): 105-110.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.007
    摘要343)      PDF (1750KB)(523)    收藏
    目的 建立适用于树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养方法。 方法 分别采用组织块贴壁培养法和胰酶消化法,分离培养新生树鼩肺成纤维细胞,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,用波形蛋白(Vimentin)对分离的成纤维细胞进行免疫荧光鉴定; 传代培养并开展冻存复苏实验,采用MTS法绘制细胞生长曲线,以人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)作对照。 结果 通过组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可获取树鼩肺成纤维细胞,细胞主要呈现梭形,波形蛋白免疫荧光鉴定普遍呈阳性,与KMB-17一致。树鼩肺成纤维细胞可连续传代4~5次,经冻存复苏后细胞仍能保持活力,以5×10 4细胞/mL的密度传代,细胞可在3 d左右进入对数生长期。 结论 组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可有效获取树鼩的肺成纤维细胞,可为肺部相关疾病的体外研究提供实验材料。
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    30. 基于多重PCR靶向二代测序的近交系小鼠遗传质量监测方法建立
    钱强, 徐园, 王亚恒, 周宇荀, 肖君华, 韩琳, 鲍世民, 李凯
    实验动物与比较医学    2019, 39 (2): 111-117.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.008
    摘要307)      PDF (1130KB)(379)    收藏
    目的 建立基于多重PCR靶向二代测序的小鼠遗传质量监测方案。 方法 从小鼠单核苷酸多态性(SNP)数据库筛选出相对均匀分布在20条染色体上的112个SNP位点,然后对SNP位点附近片段进行多重PCR扩增,建库后进行Illumina高通量测序,对原始测序数据进行生物信息学分析获得SNP信息。 结果 测序结果显示, 多重PCR的扩增子均一性好, 各片段成功率高达90%以上, 特异性高, 高深度测序条件下, SNP位点的等位基因比例趋近于1或0, 符合纯合子条件; 分析4批近交系小鼠样本, 表明SNP位点成功鉴定的比例分别为99.82%, 92.00%, 99.10%和90.35%, 且所有小鼠品系个体的SNP位点均为纯合,并被成功确定为目标品系; 品系间两两比较,最大差异数为73个,最小差异数为3个,差异位点平均数为53个,差异中位数为60个,显示出本方案对常见近交系小鼠品系分辨率较高。 结论 多重PCR靶向二代测序方案的SNP分型方案是一种准确、快速、高效的基因分型方案,可用于遗传质量检测和品系鉴定。
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    31. 不同时间紫外线照射对SD大鼠的皮肤光毒性损伤作用
    孙侠, 刘香梅, 庞增雄, 刘冬虹, 徐颖愉, 江漪, 李敏, 丘智峰, 黄宇锋
    实验动物与比较医学    2019, 39 (2): 124-130.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.010
    摘要403)      PDF (2211KB)(450)    收藏
    目的 比较不同辐射时间紫外线引起的SD大鼠皮肤光毒性损伤差异。 方法 采用长波紫外线(UVA,320~400 nm)(4.5 mJ·cm -2·s -1)+中波紫外线(UVB,280~320 nm)(0.036 mJ·cm -2·s -1)辐射的方法,建立皮肤光毒性损伤大鼠模型, 每周照射2次, 连续4周, 模型1组、模型2组、模型3组累计辐射时间分别为342 min、440 min、520 min,正常对照组不予照射。实验结束后,对大鼠皮肤进行组织病理学观察,并采用免疫组化方法检测皮肤黑色素瘤特异性标记(HMB45)、波形蛋白(Vimentin)、内皮细胞标记(CD34)的表达情况。 结果 与正常对照组比较,模型1组、模型2组、模型3组均出现部分表皮角化过度、表皮厚薄不均、皱纹加深、毛囊增大、皮脂腺增生等变化; 另外, 随着辐射时间的增加, 表皮病变更为严重, 表皮厚度、皮脂腺横截面积更大, 皮肤损伤评分也更高。与正常对照组比较, 各模型组大鼠的皮肤成纤维细胞Vimentin、真皮层毛细血管CD34表达均增多, 其中模型2组、模型3组增多更为明显; 模型2组、模型3组皮肤HMB45表达明显增多。 结论 随着紫外线辐射时间的延长, 皮肤损伤程度也逐渐加重, 本研究或可为防晒功效评价提供合适的动物模型。
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    32. 兔VX2肿瘤模型的研究进展
    米金霞, 方肇勤
    实验动物与比较医学    2019, 39 (2): 163-168.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.02.017
    摘要592)      PDF (553KB)(475)    收藏
    兔VX2肿瘤模型是目前比较常用的建立在较大动物身上的移植瘤模型,因其体型大、容易复制,在外科手术、影像学及介入治疗等研究中广泛应用。VX2肿瘤模型的建立方法包括肿瘤细胞悬液接种和肿瘤组织块移植接种,根据移植部位的不同可以建立多种类型的肿瘤模型,研究人员可以根据自己的研究目的选用合适的类型。随着影像设备的普及和新兴局部治疗方法的应用,采用兔VX2肿瘤模型的研究越来越多。本文从VX2细胞的来源及生物学特性、兔VX2肿瘤模型的建立方法及类型、研究应用等方面进行综述。
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    33. 套环法和空气干燥法建立兔颈动脉粥样硬化斑块模型的比较分析
    王琮, 陈筱雪, 杨少玲, 王凤翎, 范林艳, 贺倩倩
    实验动物与比较医学    2019, 39 (3): 208-212.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.03.006
    摘要354)      PDF (1119KB)(352)    收藏
    目的 比较颈动脉内膜空气干燥法及套环法建立兔粥样硬化斑块模型的优劣。 方法 20只新西兰白兔随机分为空气干燥法组(A组)和套环法组(B组), 分别行颈动脉内膜空气干燥术及颈动脉外膜硅胶套环术, 术后高脂喂养。术后0周、4周、8周采用ELISA检测血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL)浓度; 术后4周、8周、12周采用常规二维超声检查兔颈总动脉情况。术后12周完成超声检查后, 对2组兔颈总动脉斑块行HE染色, 病理学观察。 结果 高脂饮食4周后血清TG、TC、LDL的浓度升高(P<0.05), 并持续升高, 而同一时间点A组与B组间上述指标未见明显差别; 高脂喂养8周后超声检查见2组兔的损伤段颈总动脉内中膜增厚, 管壁现斑块强回声; 病理学观察见大量泡沫细胞, 且套环组上述病变较空气组更早更显著。 结论 颈总动脉套环法使兔颈总动脉在更短时间内出现部位明确预定的斑块, 安全性和有效性优于内膜空气干燥法。
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    34. 不同浓度含铬垫料对小鼠血液学及脏器的毒性观察
    贾欢欢, 曾业文, 罗挺, 龚宝勇, 麦冬梅, 潘迎春, 赵维波
    实验动物与比较医学    2019, 39 (6): 454-461.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.006
    摘要329)      PDF (2134KB)(413)    收藏
    目的 评价不同浓度含铬垫料对BALB/c裸小鼠及KM小鼠血液学及脏器的毒性影响。 方法 制备稳定的不同浓度含铬垫料,48只BALB/c裸小鼠及48只KM小鼠分别被随机分为4组,每组12只,雌雄各半。对照组垫料铬含量为(2.30±1.12) mg/kg、低、中和高剂量组垫料铬含量分别为(15.50±0.71) mg/kg、(71.50±3.54) mg/kg和(347.00±35.36) mg/kg。小鼠分别于不同垫料中饲养15周,每周更换1次垫料,每日对动物进行一般观察,于饲养15周采血解剖,检测血常规、血生化、脏器系数及脏器病理等。 结果 BALB/c裸小鼠及KM小鼠饲养于不同铬含量垫料中15周,大体观察未见异常,动物均未见死亡,大体解剖均未见异常;与对照组比较,血常规指标及脏器系数均未见明显差异;血液生化检查发现BALB/c裸小鼠低、中、高剂量组血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)及 尿素氮(BUN)水平均显著升高,中、高剂量组碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(Crea)水平显著升高,而低、高剂量组甘油三脂(TG)水平显著下降,KM小鼠血液生化指标均未见明显差异;病理检查发现,2种小鼠各剂量组均出现不同程度的肝脏局灶性炎细胞浸润、肝细胞水肿、肾脏炎性细胞浸润、睾丸曲细精管萎缩及卵巢黄体数量减少等改变。 结论 本实验垫料中六价铬含量达到(15.50±0.71) mg/kg及以上时可导致BALB/c裸小鼠及KM小鼠出现不同程度的肝、肾、睾丸及卵巢毒性。
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    35. 裸鼹鼠与小鼠抗辐射能力比较研究
    陈超, 丛薇, 杨文静, 崔淑芳
    实验动物与比较医学    2019, 39 (6): 479-483.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.010
    摘要471)      PDF (936KB)(383)    收藏
    目的 通过不同剂量和不同频率的γ射线照射裸鼹鼠和小鼠及两者的皮肤成纤维细胞,比较两者的抗辐射能力。 方法 选择成年小鼠(8周龄)、成年裸鼹鼠(52周龄),分别使用 60Coγ射线分多次小剂量或一次性高剂量全身照射,分析两者的基本生命体征、外周血淋巴细胞变化及主要脏器组织病理变化。选择裸鼹鼠和小鼠的皮肤成纤维细胞,进行不同剂量一次性照射,检测两者的氧损伤。 结果 小鼠在6 Gy一次性照射下,30 d存活率为30%;外周血辅助性T淋巴细胞和杀伤性淋巴细胞比值(CD4+/CD8+)、树突状细胞(DC)百分比无显著变化;而裸鼹鼠30 d存活率为100%,辐照后4 d外周血CD4+/CD8+显著升高、DC百分比呈显著先升高后回落趋势。小剂量多次辐照后,小鼠骨髓、胸腺、肝脾等主要组织器官均出现不同程度病变,裸鼹鼠相应器官则无明显异常。裸鼹鼠和小鼠的皮肤成纤维细胞在6 Gy剂量辐照后细胞活性氧含量无显著变化。而在50 Gy剂量照射下,裸鼹鼠皮肤成纤维细胞的氧损伤显著低于小鼠皮肤成纤维细胞。 结论 裸鼹鼠对于电离辐射具有天然的抗性,其生命体征、组织器官的形态与功能都没有因外部辐射因素刺激而发生明显的改变,机体免疫水平呈激活状态。裸鼹鼠的皮肤成纤维细胞同样具有抗电离辐射特性。
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    36. 医学院校实验动物学课程改革的几点建议
    肖春兰, 盛雅洁, 王禹斌, 周慧英, 周正宇
    实验动物与比较医学    2019, 39 (6): 496-498.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.013
    摘要468)      PDF (348KB)(329)    收藏
    生命科学的研究离不开实验动物和动物实验。本文基于医学院校实验动物学课程教学的现状,提出了对医学院校实验动物学课程改革的几点建议。在课程设计方面,提出了应确立理论与实践并重的指导思想,加强实验课的占比,提高学生动手能力;应提高对动物福利的认知;应加强关于基因编辑、免疫缺陷模型等前沿内容的传授。在教学方面,提出了应加强因材施教、因人施教,合理安排教学内容,丰富教学手段,提高教学效果。在学科建设方面,提出了应建立实验动物学教师的学习、培训、进修制度,建立一支专业化的实验动物学教学队伍,同时应编写高水平实验动物科学教材,统一课程标准,提高教学质量。
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    37. 芍药苷对Bayk8644诱导大鼠抑郁焦虑样行为的改善作用及机制研究
    李萍, 李艺杰, 薛玲, 宋春红
    实验动物与比较医学    2020, 40 (6): 489-495.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.06.005
    摘要428)      PDF (1781KB)(678)    收藏
    目的 基于L型电压依赖型钙通道探讨芍药苷改善大鼠抑郁焦虑样行为的药理作用机制 。 方法 48只大鼠分为正常组,L型钙通道激动剂Bayk8644组,芍药苷高、中、低剂量组(200 mg·kg -1·d -1、100 mg·kg -1·d -1、50 mg·kg -1·d -1),阳性对照尼莫地平组(1 mg·kg -1·d -1)。正常组和Bayk8644组给予相同剂量的0.9%NaCl溶液,其余组给予相应药物。连续给药7 d后,除正常组外,其余组腹腔注射Bayk8644(0.2 mg·kg -1·d -1)。利用旷场实验和高架十字迷宫实验评价大鼠行为学变化,蛋白质印迹法检测海马体脑区钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(calmodulin-dependent protein kinase type Ⅱ,CaMKⅡ)、磷酸化的CaMKⅡ(pho-CaMKⅡ)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表达水平。 结果 与正常组大鼠相比,Bayk8644组大鼠旷场总路程、中央区停留时间、中央区总路程及直立次数均明显下降(P<0.05或P<0.01),大鼠进入开放臂次数百分比(OE%)和时间百分比(OT%)明显降低(P<0.05或P<0.01),CaMKⅡ、pho-CaMKⅡ蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),BDNF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与Bayk8644组相比,芍药苷高、中剂量组旷场总路程延长,直立次数明显增多(P<0.05),芍药苷高剂量组中央区总路程明显延长(P<0.05),芍药苷高、中、低剂量组中央区停留时间明显延长(P<0.05),芍药苷高剂量组的OE%、OT%(P<0.05或P<0.01)和芍药苷中剂量组的OT%明显升高(P<0.05),芍药苷高剂量组大鼠CaMKⅡ和pho-CaMKⅡ蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),而BDNF蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。 结论 Bayk8644能引起大鼠抑郁焦虑样表现,芍药苷能拮抗Bayk8644的作用。芍药苷可能通过抑制L型钙通道影响CaMKⅡ蛋白的活化,从而发挥其药理作用。
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    38. 斑马鱼糖尿病模型的构建及应用进展
    江霞, 钱豪杰, 魏迅, 郑羽旋, 周正宇
    实验动物与比较医学    2020, 40 (6): 547-552.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.06.016
    摘要619)      PDF (410KB)(604)    收藏
    糖尿病是一组代谢紊乱性疾病,其发病机制至今尚未完全阐明。糖尿病主要分为1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。常用的糖尿病模型动物主要有小鼠、大鼠、兔、小型猪和猕猴等。另外,斑马鱼(Danio rerio)作为一种模式生物,在很多领域已被用于构建人类疾病模型,包括1型糖尿病和2型糖尿病研究中斑马鱼模型也取得了一定的应用进展。本文总结了现有的斑马鱼糖尿病模型构建方法以及应用进展,以期为今后糖尿病斑马鱼模型研究及应用提供参考。
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    39. 不同剂量顺铂腹腔注射建立大鼠化疗损伤性卵巢早衰模型
    董若曦, 朱小丹, 樊伯珍, 许文娟
    实验动物与比较医学    2020, 40 (2): 104-109.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.02.003
    摘要320)      PDF (1348KB)(361)    收藏
    目的 探索不同剂量顺铂(CP)腹腔注射建立化疗损伤性卵巢早衰(POF)大鼠模型的方法。 方法 取48只雌性未生育Wistar大鼠分为6组,每组8只。在不同时间点腹腔注射不同剂量CP。对照组(A组)无处理; CP腹腔小剂量(1.5 mg/kg)注射1组(B组)、小剂量(2.0 mg/kg)注射2组(C组)和小剂量(2.5 mg/kg)注射3组(D组),均每日1次,连续5 d; CP腹腔注射大剂量1组(E组),4 mg/kg,间隔一周再次注射4 mg/kg; CP腹腔注射大剂量2组(F组),4 mg/kg,间隔一周注射6 mg/kg,建立大鼠化疗损伤性POF模型。观察大鼠一般情况、动情周期, 检测体质量变化和血清抗苗勒氏管激素(AMH)水平,以及卵巢病理学改变和各级卵泡数量。 结果 与A组比较,各给药组大鼠动情周期明显紊乱,体质量明显下降,血清AMH水平也有明显降低(P<0.05),其中E组下降最为明显;各模型组大鼠卵巢各级卵泡数均有显著减少(P<0.05),其中E组、F组各级卵泡数量减少更为明显(P<0.01)。 结论 大鼠腹腔注射4 mg/kg CP,间隔一周再次注射,诱导化疗损伤性POF的造模效果更好,造模方法简便。
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    40. 骨性关节炎动物模型研究进展
    夏梦熊, 韩海慧, 梁倩倩, 翟伟韬, 徐浩
    实验动物与比较医学    2020, 40 (2): 159-165.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.02.013
    摘要454)      PDF (516KB)(417)    收藏
    骨性关节炎(OA)动物造模方式繁多,国内外众多学者针对其发病特点,利用不同种类的动物进行造模。各造模方案不同,其动物模型特点亦不同。本文从原发性OA和继发性OA两点入手,以转基因模型和实验诱导模型为主要切入点进行整理,并分析其优缺点,以期对OA的发病机制、疾病发展变化、过程、转归以及相关的科学研究有所帮助。
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