实验动物与比较医学 ›› 2017, Vol. 37 ›› Issue (2): 89-93.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.02.002
所属专题: 实验动物资源开发与利用
顾晓雯1, 孙瑞林2, 费俭1
收稿日期:
2017-02-05
出版日期:
2017-04-25
发布日期:
2017-04-25
作者简介:
顾晓雯(1988-),女,博士,从事生物化学与分子生物学研究。E-mail:17guxiaowen@tongji.edu.cn
基金资助:
GU Xiao-wen1, SUN Rei-lin2, FEI Jian1
Received:
2017-02-05
Online:
2017-04-25
Published:
2017-04-25
摘要: 目的 研究甲胎蛋白(Afp)阳性细胞的增殖分化在组织生长修复,肿瘤发生过程中的作用,建立Afp-CreERT转基因小鼠细胞示踪系统。方法 采用DNA雄原核显微注射方法获得Afp-CreERT转基因小鼠,筛选出合适的品系后,使之与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠。结果 显微注射后,共出生小鼠56只,经PCR鉴定Cre阳性小鼠共4只,阳性小鼠传代后各为一系。筛选内源性Afp表达与Cre表达相对符合的品系作为Afp-CreERT转基因小鼠品系建系。Afp-CreERT转基因小鼠与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,经PCR鉴定后获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠。经实时PCR,X-gal染色,免疫荧光染色鉴定后得到Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,同时证实该系统能够正确示踪Afp表达阳性的细胞,同时也能够应用于肝损伤小鼠模型中。结论 成功构建了Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,为研究这类细胞的谱系发生提供了工具。
中图分类号:
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