实验动物与比较医学 ›› 2021, Vol. 41 ›› Issue (5): 409-417.DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2020.157
张波扬1, 陈焕鹏2, 余文兰1, 刘忠华1, 黄朝峰2
ZHANG Boyang1, CHEN Huanpeng2, YU Wenlan1, LIU Zhonghua1, HUANG Chaofeng2
摘要: 目的 观察荷瘤小鼠肿瘤浸润免疫细胞在肿瘤发展过程中的动态变化。方法 将小鼠结肠癌MC38细胞移植到24只C57BL/6J小鼠皮下,荷瘤后每周一次记录小鼠体质量及肿瘤大小的变化,每周一次采用流式细胞术检测肿瘤浸润免疫细胞水平,包括CD45+细胞、CD3+ T细胞、CD8+ T细胞、CD4+ T细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、树突状细胞、巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞、髓源抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)、单核样髓源抑制细胞(monocytic-MDSC,M-MDSC)、粒样髓源抑制细胞(granulocytic-MDSC,M-MDSC),共检测4周。结果 随着小鼠结肠癌肿瘤的增长,CD45+细胞水平总体表现出下降趋势,CD8+ T细胞水平稳步下降至不可逆的水平,而CD4+ T细胞比例在荷瘤早期迅速增长,单位体积中浸润细胞数增长了近8倍,肿瘤浸润的T细胞几乎为CD4+表型。以NK细胞为代表的非特异性免疫应答水平持续下降,而树突状细胞在肿瘤内持续累积,并通过激活精氨酸酶1(Arginase-1,ARG1)和诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthetase,iNOS),进一步加深免疫抑制作用。巨噬细胞浸润水平整体无显著变化,但Ⅰ型巨噬细胞浸润细胞数的下滑速度显著高于Ⅱ型。单位体积肿瘤内MDSC数未出现下降趋势,在肿瘤内持续累积;其中G-MDSC浸润水平呈稳降趋势,M-MDSC浸润水平持续上升,且占比远高于G-MDSC。结论 小鼠移植MC38结肠癌细胞后,肿瘤组织内免疫细胞浸润水平整体下降,促肿瘤免疫逐渐占据主导地位,从而促进结肠癌的发展。肿瘤内产生了Th1/Th2漂移现象,特异性和非特异性免疫应答水平均显著降低,浸润的单核细胞和粒细胞主要是Ly6C+表型。肿瘤相关树突状细胞和巨噬细胞发挥了重要的免疫抑制作用,CD4+ T细胞和M-MDSC可能是发挥促肿瘤免疫效应的关键点。
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