猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的初步建立

实验动物与比较医学 ›› 2008, Vol. 28 ›› Issue (2): 114-117.

猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的初步建立

1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106；2.上海实验动物研究中心，上海 201106

收稿日期:2007-11-20 出版日期:2008-02-29 发布日期:2013-06-06
基金资助:
上海市科技发展基金（024909006），上海市农科院青年基金（2004-02）资助

Establishment of Polymerase Chain Reaction for Detection of Pseudorabies Virus in Pigs

1. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Sciences, Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201106，China; 2. Shanghai Laboratory Animal Research Center, Shanghai 200052, China

Received:2007-11-20 Published:2008-02-29 Online:2013-06-06

摘要/Abstract

摘要： 目的建立猪伪狂犬病病毒（PrV）的PCR检测方法 .方法根据PrV gB基因序列，应用primer 5.0软件自行设计、合成一对引物进行PCR反应，优化反应条件，建立检测 PrV的PCR方法，并应用于临床样品的检测.结果以PrV上海株细胞培养物DNA为模板，扩增出263 bp的特异性条带，对扩增产物进行克隆测序和BLAST在线比对，与 GenBank中PrV的gB序列一致.对临床样品进行PCR检测，与病毒分离结果一致.结论所建立的PCR方法敏感、特异，可用于实验用猪伪狂犬病病毒的快速检测.

关键词: 伪狂犬病病毒, PCR, 检测

Abstract: Objective To establish the method of polymerase chain reaction (PCR) for detection of the pseudo rabies vims (PrV) in pigs. Methods A pair of primers were designed and synthesized according to the sequence of gB gene of PrV. PCR method for PrV was established by optimizing the reaction parameters，and utilized for detection of PrV m clinical samples. Result The 263 bp product was amplified specifically by using the DNA of PrV SH strain as template. The amplified product was cloned into pMDl 8-T vector and sequenced. The identity of nucleotide sequence of this fragment and gB gene of genbank was 99.2%. The identical results were obtained by PCR and virus isolation of clinical samples. Conclusion The PCR method established is sensitive and specific for the rapid detection of PrV in pigs.

Key words: Pseudo rabies vims (PrV), Polymerase chain reaction (PCR), Detection

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