目的 基于miRNA测序技术探讨清肺排毒汤（Qingfei Paidu decoction，QFPDD）对小鼠急性肺损伤的防治作用及其分子机制。 方法 24只4周龄雄性KM小鼠随机分为对照组、模型组和QFPDD组，每组8只。适应性饲养1周后，对照组和模型组灌胃给予超纯水（0.2 mL/次），QFPDD组灌胃给予QFPDD汤剂（0.2 mL/次，含生药1.6 g/mL），2次/d，连续8 d；第2~8天，模型组和QFPDD组给予2.5 g/L脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）水溶液4 mL雾化，连续雾化7 d。第9天深度麻醉后通过眼底静脉丛采血，取小鼠肺组织，称取各组小鼠体重和肺组织质量，计算肺系数。采用ELISA法检测小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β和IL-6水平。对肺组织进行石蜡切片后行HE染色，观察肺组织形态学变化。用Illumina HiSeq 2500测序平台检测小鼠肺组织miRNA表达谱，通过数据库预测差异表达miRNA的靶基因，利用基因本体（gene ontology，GO）和京都基因与基因组数据库（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析差异表达miRNA的靶基因功能；通过反转录实时荧光定量PCR技术对差异表达的miRNA进行验证。 结果 与对照组相比，模型组小鼠体重增长趋势一致，但肺系数显著升高（P＜0.01）。ELISA结果显示，与对照组相比，模型组小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著升高（P＜0.01）；与模型组相比，QFPDD组小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著降低（P＜0.05）。HE染色结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肺泡间隔增宽，大量炎症细胞浸润，部分肺泡扩张，少量毛细血管扩张伴淤血；与模型组相比，QFPDD组小鼠肺泡间隔稍增宽，少量炎症细胞浸润。miRNA测序结合交集分析筛选出模型组与对照组、QFPDD组与模型组之间均存在显著差异的13个miRNA，其中6个miRNA（分别为mmu-miR-203-3p、mmu-miR-181b-5p_R-1、hsa-miR-4286_R+1、mmu-miR-1843b-5p_L+1R-1_2、mmu-miR-22-3p和mmu-miR-1964-3p）在模型组中显著上调（P＜0.05），QFPDD治疗后显著下调（P＜0.05），呈治疗性回调趋势。GO分析显示，差异表达miRNA的靶基因主要富集于RNA聚合酶Ⅱ转录调控等生物学过程。KEGG分析显示，靶基因主要富集于丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路。针对mmu-miR-203-3p的PCR验证结果显示与测序分析结果一致。 结论 QFPDD可能通过调控mmu-miR-203-3p等表达，调节炎症反应和MAPK信号通路，参与肺损伤的病理过程，发挥防治急性肺损伤的作用。
