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2011年 第31卷 第2期    刊出日期：2011-04-25

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论著

人肺癌高转移细胞系的转移相关基因观察

姚明, 李静, 荚德水, 张方琳, 闫明霞, 刘蕾, 张书霞

2011, 31(2):  79-82.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.001

摘要 ( 204 )   PDF (17941KB) ( 185 )  

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目的 观察人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci的转移相关基因表达,同时验证该细胞系的体内高转移特性。方法 通过Western blot、FICC、IHC等方法检测转移相关基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高、低转移细胞系间的差异表达;采用尾静脉注射方法观察高、低转移细胞系的转移特性。结果 与低转移细胞系相比,转移促进基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高转移细胞中的表达均显著上调。体内实验表明,8周时高转移细胞系的肺转移率为100%(12/12),而低转移细胞系的肺转移率仅为16.67%(2/12)。结论 人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci在转移相关基因表达和动物体内均表现出典型的高转移特性,为该细胞系的推广应用提供了参考依据



sp3111 RNAi转基因小鼠模型的评价以及sp3111下调表达对受精及早胚发育的影响

华叶, 贾晓峰, 华敏敏, 袁瑶, 范立强, 施惠娟

2011, 31(2):  83-86.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.002

摘要 ( 115 )   PDF (280KB) ( 236 )  

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目的 评价sp3111 RNAi转基因小鼠模型的应用价值以及探讨SP3111蛋白降低表达对受精及早期胚胎发育的影响。方法 ①采用Real-Time PCR方法分别检测F1代和F4代转基因RNAi小鼠中sp3111 mRNA的表达变化,并比较2代间干扰效率的差异。②将精子分为实验组(F4代小鼠精子组)和对照组(野生小鼠精子组),进行体外授精实验,观察受精率及碎裂胚胎的发生率。结果 ①F1代和F4代小鼠中干扰效率的差异无统计学意义(P>0.05)。②实验组的正常胚胎与碎裂胚胎的形成率分别为34.48%和46.21%,与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。结论 ①RNAi转基因小鼠中RNAi诱导的转录沉默可稳定遗传至F4代。②SP3111下调表达对小鼠受精及早期胚胎发育有明显的影响。

WHBE兔与日本大耳白兔冠脉结扎致心肌缺血模型的比较研究

徐孝平, 潘永明, 陈亮, 何欢, 徐剑钦, 朱科燕, 应华忠, 陈民利

2011, 31(2):  87-91.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.003

摘要 ( 155 )   PDF (1563KB) ( 287 )  

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目的 复制WHBE兔冠脉结扎所致心肌缺血模型,并与日本大耳白兔比较其心血管系统的敏感性。方法 雄性WHBE兔和日本大耳白兔各20只,随机分成伪手术组和模型组,每组10只,伪手术组只开胸不结扎,模型组采用冠脉结扎复制心肌缺血模型,各组分别在造模前、造模后60 min 观察ST段抬高程度,并取血测定血浆AST、CK、LDH活性的变化; 用NBT染色法,结合图像分析软件计算心肌缺血梗死程度。结果 与伪手术组比,冠脉结扎后WHBE兔和日本大耳白兔模型组ST段明显抬高(P<0.01),梗死面积程度明显增加(P<0.01),且血浆AST、CK、LDH活性水平均显著升高(P<0.05, P<0.01); 与日本大耳白兔比,WHBE兔冠脉结扎所致心肌缺血的ST段、梗死面积程度和血浆AST、CK、LDH活性水平的上升变化程度均略高于日本大耳白兔,以梗死面积程度变化最为显著(P<0.05)。结论 WHBE兔对冠脉结扎所致心肌缺血较为敏感,是比较理想的心肌缺血模型,更适合于心血管缺血性疾病的研究。



猴小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR快速检测方法的建立

温和心, 蒋荣华, 王杰, 苏栋, 李世照, 盘宝进

2011, 31(2):  92-95.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.004

摘要 ( 165 )   PDF (318KB) ( 316 )  

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目的 建立一种能快速检测猴小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR方法。方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌耐热肠毒素基因的保守区为靶区域设计特异引物和探针,建立一种能快速检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的实时荧光PCR方法, 并对方法的特异性、敏感性、线性相关性、重复性等因素进行试验。结果 建立的荧光PCR法对小肠结肠炎耶尔森氏菌具有特异的反应性,最低检出限为3.3×10 cfu/ml,菌液浓度在3.3×10⁷ cfu/ml 至3.3×10 cfu/ml时与Ct值有较好的线性关系,试验重复性良好。结论 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR检测方法适用于猴小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测。



束缚应激致亚健康状态大鼠脑组织Bax、c-Fos的表达及中药干预作用

刘瑞敏, 冷晓霞, 陈民利, 潘永明, 寿旗扬, 周卫民, 陶涛, 朱科燕

2011, 31(2):  96-101.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.005

摘要 ( 187 )   PDF (45791KB) ( 205 )  

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目的 观察束缚应激致亚健康模型大鼠的脑组织Bax、c-Fos表达情况以及抗衰老片和六味地黄丸的干预作用。方法 取雄性SD大鼠20只,体重320~360 g,随机分成4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组5只,采用每天限制活动3 h模拟人类束缚应激,建立大鼠亚健康状态模型,造模同时,用抗衰老片、六味地黄丸进行干预。造模14 d结束后,测定大鼠大脑皮质及海马区Bax和c-Fos的表达。结果 造模14 d后,模型对照组大鼠脑组织皮质、海马区Bax的表达面积显著增加(P<0.05); 给予抗衰老片和六味地黄丸后,大鼠大脑皮质及海马区Bax表达量明显减少(P<0.05, P<0.01); 模型对照组大鼠脑组织皮质、海马区c-Fos表达量增加; 给予抗衰老片和六味地黄丸后,大鼠的大脑皮质及海马区c-Fos表达有不同程度的减少(P<0.05,P<0.01)。结论 束缚应激致亚健康状态的大鼠大脑皮层、海马区Bax、c-Fos表达量增加。抗衰老片和六味地黄丸可减少束缚应激致亚健康状态大鼠脑组织Bax、c-Fos的表达,预防和减少应激引起的神经元损伤,从而改善亚健康状态。



三聚氰胺妊娠期给药对胎鼠肾发育影响的病理学观察

苏萍, 冯洋, 吴玉, 刘智涛, 蔡仕彬, 王继红, 杜永洪

2011, 31(2):  102-104.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.006

摘要 ( 217 )   PDF (22198KB) ( 202 )  

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目的 观察不同剂量三聚氰胺对初生大鼠肾的影响。方法 56只雌鼠随机分成7组。实验组(M1~M6)从妊娠第一天开始每天灌服浓度为120、240、360、480、600、720 mg/kg三聚氰胺,对照组(M0)同期灌服蒸馏水,大鼠出生12 h后取肾组织进行病理学观察。结果 对照组肾脏无明显病理改变,实验组: M1与M2组肾组织病理变化不明显,M3组以肾小球和间质毛细血管扩张出血为主; M4组有明显的组近曲小管严重水肿; M5组集合管和肾盂中有大量血细胞; M5和M6组仔鼠肾髓质间质中出现纤维增生, M6组仔鼠肾髓质可见大量成纤维细胞。结论 三聚氰胺可以通过胎盘屏障,导致孕期初生大鼠肾病理性改变,且存在剂量依赖性。



精神压力对C3H/HeJ小鼠斑秃发病率的影响

汤球, 蔡丽萍, 江鹏亮

2011, 31(2):  105-107.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.007

摘要 ( 225 )   PDF (237KB) ( 488 )  

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目的 研究精神压力对C3H/HeJ小鼠斑秃发病率的影响。方法 选取C3H/HeJ小鼠80只,随机分为4组,即精神压力组、药物诱导组、精神压力与药物诱导组和对照组,每组20只,干预后观察4个月,统计斑秃发病率,并比较各组差异。结果 精神压力组斑秃发病率为10%,对照组没有发生; 精神压力与药物诱导组发病率为90%,药物诱导组发病率为60%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 精神压力在药物诱导下显著提高C3H/HeJ小鼠斑秃发病率。

水溶性氮酮对斑马鱼胚胎药物渗透及致畸性作用的影响

陈锡强, 韩利文, 刘可春, 侯海荣, 王希敏, 何秋霞

2011, 31(2):  108-110.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.008

摘要 ( 175 )   PDF (6243KB) ( 459 )  

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目的 研究水溶性氮酮对白藜芦醇透过斑马鱼胚胎性能与斑马鱼致畸性的影响。方法 利用对斑马鱼胚胎发育致畸作用,考察氮酮在斑马鱼筛选模型上的适用性,确定氮酮的使用剂量; 利用氮酮的透皮促进作用, 观察对白藜芦醇抑制斑马鱼节间血流的影响。结果 在0.01~0.5 μg/ml范围内氮酮对斑马鱼较安全,0.5 μg/ml溶性氮酮可显著促进斑马鱼对白藜芦醇的透过,斑马鱼节间血管的抑制率达到了22.9%。结论 浓度高于0.5 μg/ml的水溶性氮酮对斑马鱼胚胎的发育有明显致畸作用; 0.5 μg/ml的氮酮对白藜芦醇的斑马鱼胚胎透过效果最佳。



壮骨胶囊抑制去势大鼠骨密度降低的作用

施志冲, 杨隽, 谭延斌, 孙宇立, 俞筱琦, 潘杰, 肖萍

2011, 31(2):  111-114.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.009

摘要 ( 312 )   PDF (255KB) ( 267 )  

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目的 探讨壮骨胶囊抑制去势雌性大鼠骨密度降低的效应及其作用机制。方法 分别以0.17、0.33和1.00 g/kg体重三种剂量的壮骨胶囊喂养去势雌性大鼠3个月,测定大鼠体重、股骨重量、股骨钙含量及骨密度等指标; 同时以相同剂量的该壮骨胶囊对离乳大鼠进行钙吸收实验,测定大鼠体重、身长、粪钙和摄食量等指标,计算钙表观吸收率。结果 剂量为0.33和1.00 g/kg组大鼠的股骨远心端和中点骨密度、股骨骨钙含量显著高于对照组大鼠; 三种剂量的壮骨胶囊对离乳大鼠粪钙、摄入钙和钙表观吸收率与碳酸钙对照组相比亦均无显著性差异(P>0.05)。结论 该壮骨胶囊可能通过补钙和调节骨代谢等途径抑制去势雌性大鼠的骨密度降低。

双橘颗粒药效学实验研究

郭晟, 郑国安, 李良

2011, 31(2):  115-119.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.010

摘要 ( 196 )   PDF (26180KB) ( 221 )  

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目的 探讨双橘颗粒对SD大鼠和家兔乳腺增生的作用。方法 1)大鼠乳腺增生模型: 取SD大鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg/kg制作乳腺增生模型后, 连续给双橘颗粒 30 d, 末次给药后1 h腹主动脉采血5 ml测定血清雌二醇、孕酮的含量, 并取乳腺组织进行病理组织学检查; 2)大鼠足肿胀模型: 取SD大鼠连续给药10 d, 末次给药后1 h左足爪中部皮下注射10%鸡蛋清0.1 ml,然后于0.5、1、2、4、6 h测量同一部位大鼠足肿胀度; 3)家兔乳腺增生模型: 取未孕雌性家兔,肌肉注射苯甲酸雌二醇 0.2 mg/kg,每天 1次, 连续 25 d, 随后肌肉注射黄体酮1 mg/kg, 每天 1次, 连续 5 d; 从造模第5天起,双橘颗粒组和乳增宁片组灌胃相应浓度药液连续给药30 d, 末次给药后1 h, 心脏采血5 ml, 测血清雌二醇、孕酮含量。另取第2对完整的乳房, 进行病理组织学检查。结果 1)SD大鼠注射雌激素后,乳房明显肿胀,乳头明显增高等现象。双橘颗粒各剂量组皆能降低乳头高度,与模型组比较,差异具有显著性(P<0.05); 与空白对照组比较, 乳腺增生模型组动物血清雌二醇含量明显升高,孕酮含量明显降低。双橘颗粒10.0、3.0 g/kg剂量组能降低血清雌二醇含量,与模型组比较,有显著性意义(P<0.05),双橘颗粒各剂量组小叶缩小,腺泡数减少,腺泡腔和腺导管腔扩张不明显,分泌物减少,与模型组比较,有显著性意义(P<0.05)。2)SD大鼠足肿胀模型与空白对照组比较,模型组动物注射鸡蛋清后0.5、1、2、4、6 h,其左足注射部位肿胀明显,在0.5、1 h达到高峰,其后肿胀变轻,但至6 h仍未消退。双橘颗粒各剂量组有减轻足肿胀的作用,但1.0 g/kg 剂量组作用较弱,10.0、3.0 g/kg剂量组作用较明显,其各时间段足肿胀度与模型组比较,差异具有显著性或非常显著性意义(P<0.05或0.01)。3)家兔乳腺增生模型血清性激素水平与空白对照组比较 ,乳腺增生模型组动物血清雌二醇含量明显升高,孕酮含量明显降低。双橘颗粒5.0、1.5、0.5 g/kg剂量组能降低血清雌二醇含量,升高血清中孕酮,与模型组比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。对乳腺组织增生病理改变均有明显的改善作用。结论 双橘颗粒对实验性大鼠及家兔乳腺增生具有较好的防治作用。



大、小鼠肝、肾、胃细胞超微结构的比较观察

潘华, 俞彰, 周光兴

2011, 31(2):  120-122.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.011

摘要 ( 279 )   PDF (4454KB) ( 590 )  

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目的 比较常用啮齿类鼠科实验动物大鼠和小鼠肝、肾、胃细胞超微结构的差异。方法 成年雄性SD大鼠、KM小鼠各10只,处死后取材,制作电镜标本,用透射电镜观察大、小鼠肝细胞、近曲小管上皮细胞、胃黏膜壁细胞超微结构的异同点。结果 大鼠肝细胞线粒体略大、小鼠粗面内质网稍多。大鼠胃壁细胞分泌小管更发达。大、小鼠近曲小管上皮细胞核椭圆,线粒体长杆状,平均短径0.2 μm,每个细胞可见数个溶酶体,粗面内质网丰富,无明显差异。结论 大鼠肝、肾细胞线粒体代谢功能较强; 小鼠肝、肾细胞则以内质网合成较强,提示损伤后肝细胞具有较强的修复能力,但肾细胞损伤后会影响蛋白合成功能。大鼠胃酸分泌功能强于小鼠。



一种兔圆小囊抗菌肽对绿脓杆菌的抗菌作用及透射电镜观察

王可洲, 赵玉忠, 窦如海

2011, 31(2):  123-125.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.012

摘要 ( 141 )   PDF (1025KB) ( 316 )  

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目的 探讨由兔圆小囊提取的一种抗菌肽对绿脓杆菌有无抗菌作用及其对细菌的损伤情况进行电镜观察。方法 培养绿脓杆菌并用提取的兔圆小囊抗菌肽进行处理,计算抗菌率,并制备电镜样品进行电镜观察。结果 在圆小囊抗菌肽浓度为100 μg/ml、细菌浓度为1.0×10⁵CFU/ml条件下,圆小囊抗菌肽对绿脓杆菌ATCC27853株的杀菌率为74.2%,经兔圆小囊抗菌肽处理过的细菌菌体皱缩,膜通透性发生改变以及对鞭毛损伤,细菌表面形成囊泡样结构。结论 表明兔圆小囊抗菌肽对绿脓杆菌具有损伤作用。



禁食对SD大鼠血清生化指标的影响

胡建廷, 王韶艳, 屈卉锦, 英永, 李艳, 李莉

2011, 31(2):  126-127.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.013

摘要 ( 271 )   PDF (214KB) ( 463 )  

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目的 探讨禁食对SD大鼠血液生化指标的影响。方法 采用全自动生化分析仪对禁食/不禁食条件下,不同性别SPF 级SD 大鼠血液中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBiL)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)等生化指标进行测定。结果 禁食因素对雄性SD 大鼠的AST、ALP、GLU、Urea影响最为显著,对雌性SD 大鼠的ALT、ALP、TBiL、TG影响最为显著。结论 在长期毒性试验中,要考虑禁食对血液生化指标的影响,建议试验动物采血前禁食。

大鼠颈静脉埋管二种方法比较

唐甩恩, 赖苗军, 张富强, 刘惠芬, 周文华

2011, 31(2):  128-129.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.014

摘要 ( 138 )   PDF (226KB) ( 1123 )  

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目的 大鼠颈静脉埋管二种方法的速度、质量比较。方法 32只清洁级SD大鼠随机分为辅助管组、对照组,用PE-20导管加硅胶管作为插管进行颈静脉埋管。对照组直接用硅胶管进入静脉切口,辅助管组增加一条5 cm长的PE-10导管作辅助管,先进入静脉切口约0.5 cm,再引导硅胶管进入颈静脉。一周后进行自身给药训练,每天给药针数最多50针,14 d训练结束。结果 辅助管组硅胶管进入静脉时间25.1±7.0 s,对照组硅胶管进入静脉时间150.7±102.5 s,插管的速度有极显著差异(P<0.01)。自身给药实验,对照组4只大鼠分别在第3天 、第5天(2只)、第8天 发生插管堵塞,退出实验。辅助管组16只大鼠至实验结束插管仍畅通,插管质量有显著差异(P<0.05); 给药针数,对照组12只大鼠42.1±3.0针,辅助管组16只大鼠43.3±2.0针,两者比较无统计学意义(P>0.05),插管畅通的大鼠都建立了自身给药模型。结论 大鼠颈静脉埋管时用辅助管可加快埋管的速度,提高埋管的质量。

II型糖尿病模型GK大鼠部分生物学特性观测

梁磊, 陈立新, 唐慧青, 符杰, 顾坚忠, 徐平

2011, 31(2):  130-133.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.015

摘要 ( 136 )   PDF (245KB) ( 412 )  

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目的 研究Ⅱ型糖尿病模型GK大鼠的部分生物学特性。方法 采用不同周龄的GK大鼠及相应的Wistar大鼠作为研究对象,测定繁育、生长数据及空腹、随机血糖值,进行糖耐量试验、血胰岛素测定及发病率计算。结果 GK大鼠1~4胎繁育数据间无显著差异(P>0.05); 7周龄后体重增长迅速。3周龄时部分鼠随机血糖已达7 mmol/L,糖尿病发病率在8周龄时基本稳定在86%左右。同条件下GK大鼠血糖值均高于相应的Wistar大鼠,二者相比差异显著(P<0.05)。GK大鼠糖耐量实验中早期葡萄糖刺激下胰岛素分泌几乎停止,后期分泌量反而增加。结论 GK大鼠的繁育性状几乎不受其血糖值影响。从3周龄开始已出现糖尿病征兆且发病后快速出现高血糖、胰岛素分泌减弱、胰岛素抵抗等症状,是良好的II型糖尿病模型。

猕猴开放式饲养管理技术

陈子亮, 张秀娟, 李学家, 金石军, 刘晓明, 饶军华

2011, 31(2):  134-136.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.016

摘要 ( 169 )   PDF (269KB) ( 244 )  

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猕猴属于生命科学研究领域中最高级的模式动物之一,对生物医药等相关研究具有重要的比较医学价值,饲养管理标准化的建立与实施对提高猕猴的质量提供了重要保障,本文从猴舍的建设特点与基本设施、猴群的日粮结构与饲喂方式、猴群的繁育管理、猴群的疾病防治和标准化管理等方面概述了猕猴开放式饲养管理的技术要点,为华南地区猕猴的人工饲养和繁育提供了良好借鉴。

实验动物进口工作的实践和思考

卫振, 高翔, 丁贤明, 周天华, 刘迪文

2011, 31(2):  137-139.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.017

摘要 ( 88 )   PDF (242KB) ( 252 )  

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实验动物是进行生物医学研究非常重要的支撑条件。随着科学技术的发展,动物模型开发的新技术不断出现,规模不断扩大,速度也越来越快。动物资源的交流实现了世界范围内的资源共享,促进沟通合作,避免了重复开发和资源浪费,缩短了动物模型开发的时间,推动生物医学科技更快发展。实验动物交流也促进了实验动物标准化的进程。实验动物对遗传质量、微生物和寄生虫控制有特殊的要求,在实验动物进出口过程中,加强动物质量控制,对于保证动物安全,维护工作人员健康都有重要意义。我国实验动物科技行业起步较晚,资源开发的速度还比较慢,科研中使用的实验动物进口的需求很大。作者学习了国家目前实验动物进口的一些规定后,结合单位实验动物进口的经验,对实验动物进口提出一些建议。

综述

GK糖尿病大鼠发病机理的研究进展

赵先哲, 乔伟伟

2011, 31(2):  140-146.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.018

摘要 ( 111 )   PDF (327KB) ( 520 )  

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自发II型糖尿病GK大鼠与人类非肥胖型II型糖尿病进展极为相似。GK大鼠主要特点为胰岛素分泌受损、胰岛β细胞数量减少,空腹血糖升高,肝糖原生成增多,肌肉和脂肪组织中度胰岛素抵抗等特点。文章主要从GK大鼠遗传学特征、胰腺的形态学异常及胰腺、肝脏、肌肉和脂肪组织的细胞因子的变化以及它们与II型糖尿病的发病机理的关系的研究进展作一综述。

斑马鱼分子遗传位标及多态性研究进展

赵莹, 沈志敏, 刘雄伟, 魏晓锋, 胡建华

2011, 31(2):  147-152.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.019

摘要 ( 110 )   PDF (280KB) ( 303 )  

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过去二十年间,分子遗传位标可揭示DNA水平的多态性,在斑马鱼的遗传研究中所占比重越来越大。本文介绍分子遗传位标及斑马鱼遗传图谱,探讨这些遗传位标使用时的优缺点,展示斑马鱼品系的多态性。