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2011年 第31卷 第3期    刊出日期：2011-06-25

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论著

以功能磁共振成像为主综合评价大鼠局灶性脑缺血模型究

曾贵刚, 张申, 陈国强, 顾坚忠, 顾卫忠

2011, 31(3):  153-159.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.001

摘要 ( 212 )   PDF (13154KB) ( 217 )  

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目的 采用功能核磁为主综合评价大鼠局灶性脑缺血模型,以期寻找一种准确评价大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型的方法,为后续实验提供一致性较好的模型。方法 采用功能磁共振成像(fMRI)检测MCAO模型的梗死部位、血管阻塞、神经纤维束等情况,对照Bederson评分、神经症状的综合行为学评分及脑TTC染色综合判断MCAO模型。结果 模型组大鼠术后fMRI检测显示,术侧颞顶叶及外侧出现明显水肿带,CCA、ICA、ECA完全堵塞, 神经纤维束稀少, 部分纤维束中断、缺失。等级相关性分析显示,神经功能缺失评分与脑梗死比例具有相关性(rs=0.879,P<0.01)。模型组前肢屈曲、躯体屈曲、前肢翻转、后肢翻转、自发活动能力、竖板攀爬、平衡功能等各项神经症状的综合行为学评分与假手术组均有显著差异(P<0.01)。结论 采用fMRI检测结果,同时结合常规神经症状评分以及TTC染色切片,综合分析其结果,可准确判断活体状态下大鼠脑卒中模型的损伤部位和程度,筛选出一致性较好的大鼠脑卒中模型。



实验性Ⅱ型糖尿病大鼠模型复制方法的改进及其评价

汪凌云, 汪萍, 孙玉秀, 李丹丹, 刘嵩, 章秋, 鲁云霞

2011, 31(3):  160-165.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.002

摘要 ( 333 )   PDF (33236KB) ( 219 )  

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目的 建立一种快速简便的Ⅱ型糖尿病(T2DM)大鼠模型并观察其胰岛及肾脏的病理学变化。方法 雄性SD大鼠随机分为3组: (1)对照组,尾静脉注射0.1 mol/L柠檬酸缓冲液,普通饲料喂养; (2)鸡蛋饲料组,尾静脉注射0.1 mmol/L柠檬酸缓冲液,50%鸡蛋饲料喂养; (3)模型组,尾静脉一次性注射30 mg/kg 链脲佐菌素(STZ),50%鸡蛋饲料喂养。4周后所有大鼠进行口服糖耐量实验(OGTT)。测定24 h尿微量白蛋白(U-ALB)和尿肌酐(U-CREA)水平。采血测定空腹血糖(FBG)、胰岛素(Fins)、血脂(TG和TC、FFA)、SOD、MDA水平。免疫组化染色观察胰岛β细胞的形态学改变。左肾称重并计算肾脏指数(KI),右肾进行病理学观察。结果 与对照组比较,模型组大鼠的体重增加(P<0.05),FBG、Fins、TG、TC、FFA、MDA水平升高(P<0.05),SOD水平、ISI显著降低(P<0.05)。胰岛体积明显变小,散在分布。24 h尿液、U-ALB、U-CREA和KI均增加(P<0.05),光镜和电镜结果表明肾小球毛细血管基底膜不均匀增厚,足突大部分增宽融合,说明该模型还伴有早期的肾脏损害。结论 该方法成功地制备了T2DM大鼠模型,STZ用量少,饲料配制方便,时间短,成模率高,死亡率低,可用于T2DM及其慢性并发症糖尿病肾病(DN)的发病机制及治疗的研究。



基于猕猴面部图像特征的计算机自动定位方法

杜希扬, 张惠云

2011, 31(3):  166-171.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.003

摘要 ( 312 )   PDF (5371KB) ( 942 )  

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目的 提出一种基于猕猴面部图像特征的计算机自动定位方法。方法 针对猕猴面部图像的特点建立其在HSI颜色空间中的肤色模型,然后根据各分量的阈值对图像进行分割,分割后的结果再经过数学形态学的腐蚀与膨胀处理得到猕猴面部较为完整的区域。结果 基于面部器官位置的相对比例关系,实现了对猕猴眼睛、嘴巴等特征部位的自动定位,并且使用边缘提取算子获取了特征部位的细节轮廓。结论 本文的算法经过了猕猴面部图像的测试,能准确的自动定位猕猴面部并找到眼部与嘴部区域,其结果可以为进一步的表情识别提供依据。



转基因兔与克隆兔高效胚胎移植体系的建立

李海滨, 田江天, 宋军, 赖良学, 顾为望

2011, 31(3):  172-177.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.004

摘要 ( 320 )   PDF (2941KB) ( 631 )  

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目的 建立高效的转基因兔和克隆兔的胚胎移植实验技术平台。方法 通过外科手术移植的方法将受精胚胎、转基因胚胎和体细胞核移植胚胎分别移植到同步发情或异步发情的受体兔输卵管。结果 移植受精胚胎、转基因胚胎和体细胞核移植胚胎的受体兔怀孕率分别为100%、66.67%、36.36%,产仔数分别为19、24及17只, 仔兔的成活率分别为90.48%、92.31%、17.65%。出生仔兔与移植胚胎数的比率分别为43.75%、21.31%、8.54%。结论 成功建立了高效的转基因兔和克隆兔的胚胎移植的实验技术平台。



小型猪腹壁拉链模型制备效果评价指标体系的建立

汤球, 余琛琳, 崔淑芳

2011, 31(3):  178-182.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.005

摘要 ( 223 )   PDF (431KB) ( 501 )  

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目的 建立小型猪腹壁拉链模型制备效果评价指标体系。方法 通过文献调研与专家咨询,初步收集评价小型猪腹壁拉链模型制备效果的调研指标,利用德尔菲法和层次分析法,结合专家咨询意见,进一步确定指标及指标权重值,运用人类疾病动物模型评价指标体系软件EISAMHD.SMMU 1.0 (The Evaluation Index System Of Animal Model Of Human Diseases,EISAMHD),建立小型猪腹壁拉链模型制备效果综合评价指标体系。结果 通过实证,确认该评价体系良好。结论 本研究建立的评价指标体系清晰、简便,利于科研人员使用。



高脂和低雄激素对SD雄性大鼠阴茎COX-2表达的影响

匡琳, 翟华玲, 姜博仁, 夏芳珍, 陈奕, 余娇, 赵丽娟, 李影, 李艳香, 陆颖理

2011, 31(3):  183-187.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.006

摘要 ( 305 )   PDF (9217KB) ( 246 )  

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目的 通过建立高脂饮食和低雄激素水平SD大鼠模型,探讨高脂和低雄激素对SD雄性大鼠阴茎结构及其COX-2(环氧化酶-2)表达的影响。方法 将10周龄SD大鼠随机分为6组: 正常饮食对照组,正常饮食去势组,正常饮食去势+激素替代治疗组,高脂饮食对照组,高脂饮食去势组,高脂饮食去势+激素替代治疗组。10周后,检测各组大鼠体内雄激素水平,及其阴茎结构和海绵体中COX-2的表达。结果 去势组大鼠体内雄激素水平明显下降,替代治疗组激素水平有所升高。高脂饮食喂养组中,阴茎结构破坏明显,海绵体中COX-2表达呈阳性。结论 去势手术可以导致SD雄性大鼠体内雄激素水平低下的模型,低雄激素水平可导致阴茎海绵体结构损伤,高脂饮食大鼠组的COX-2表达阳性,提示高脂诱导低雄激素大鼠炎症激活。



F344大鼠自发性肿瘤的病理学观察

尹纪业, 董延生, 袁本利, 余寿忠, 瞿文生, 原野, 王和枚, 丁日高

2011, 31(3):  188-192.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.007

摘要 ( 358 )   PDF (18558KB) ( 222 )  

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目的 积累本中心F344大鼠自发肿瘤背景数据,为开展新药诱癌试验做准备。方法 SPF级F344大鼠336只,雌雄各半,体重180~200 g,本中心屏障环境下饲养,随机分为4个组,即分别于6、12、18和24个月4个时间点处死动物32、64、64,176只,称量动物心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、胸腺、脑、睾丸(或卵巢)和附睾(或子宫)等器官并计算脏器系数,常规病理学取材制片后显微镜检查,观察统计4个时间点动物自发性肿瘤的类型和发病率。结果 高发的肿瘤性病变主要包括睾丸间质细胞瘤、垂体腺瘤、单核细胞白血病、皮下纤维瘤、乳腺纤维腺瘤、嗜铬细胞瘤等。结论 本实验结果丰富了现有F344大鼠自发性肿瘤的发病数据,为开展新药诱癌试验提供了背景资料。



氨基葡萄糖及硫酸软骨素对豚鼠软骨组织结构及组织中糖胺多糖含量的影响

肖萍, 王宁, 范玉兰, 董妙珠, 洪新宇, 仲伟鉴

2011, 31(3):  193-197.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.008

摘要 ( 336 )   PDF (273KB) ( 1236 )  

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目的 观察氨基葡萄糖(GS)及硫酸软骨素(CS)对原发性骨关节炎(OA)模型雌性豚鼠膝关节软骨组织结构和组织中糖胺多糖(GAG)含量的影响。方法 取120只2周龄雌性豚鼠随机分为3个试验组和1个空白对照组。空白对照组给予蒸馏水(对照组),试验组分别给0.5%GS(GS组),0.25%CS(CS组), 0.5%GS+0.25%CS(联合使用组),分别于给药前,给药1个月、2个月、3个月、4个月和5个月后,每组各取5只动物膝关节进行组织病理学(HE染色)和组织化学(PAS、Alcian Blue、和Mallory染色)检查以及组织中GAG含量的检测。结果 病理及组化检查: 对照组在实验开始1个月后软骨组织病理积分即不断增高; GS组在给药3个月后才开始上升; CS组在给药的5个月中病理积分增高缓慢,仅第4个月上升较明显; 联合使用组在给药的5个月中病理积分一直没有增高,并且给药5个月后期的病理积分显著低于同组给药前期的积分。组织中GAG含量: 随着豚鼠月龄的增大,各试验组软骨组织GAG含量均有下降,但与同期对照组相比,下降减缓; 从第3个月起,各实验组的软骨组织GAG含量开始回升。与同期对照组相比,给药的前2个月,各试验组软骨组织中GAG含量均有显著性差异(P<0.05); 第3个月开始,GS组与联合使用组软骨中GAG含量差异显著(P<0.01),而CS组软骨GAG含量差异不如GS组与联合使用组显著(P<0.05)。给药4个月后,各试验组软骨组织GAG含量开始回升,与各自同期对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论 GS、CS无论单独使用,还是联合使用,都能促进软骨组织生长并延缓软骨组织的退行性变,特别是联合使用的作用最强。

乳康汤对乳腺增生大鼠乳头形态和雌二醇、孕酮受体表达的影响

陈泳晖, 肖柳英, 潘竞锵

2011, 31(3):  198-202.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.009

摘要 ( 342 )   PDF (4041KB) ( 700 )  

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目的 探讨乳康汤对乳腺增生模型大鼠乳头形态和血清性激素水平的影响。方法 采用苯甲酸雌二醇配合应用少量黄体酮,建立大鼠乳腺增生病模型,研究乳康汤对该模型大鼠乳头形态、组织学和雌激素水平变化的影响, 取大鼠第3对乳腺组织,观察乳腺组织病理变化,并采用免疫组化方法观测乳腺组织中雌二醇受体(ER)和孕酮受体(PR)的变化。结果 乳康汤均能明显改善模型鼠乳头增生性形态学改变(P<0.01), 能明显降低模型大鼠血清中雌二醇和泌乳素的水平 (P<0.01或P <0.05); 能明显升高模型大鼠血清中孕酮的水平(P<0.01或P<0.05)。结论 乳康汤具有抑制乳腺增生模型鼠乳头增生形态的改变; 乳康汤抑制乳腺增生; 对乳腺增生模型大鼠的治疗作用可能与改善机体内分泌环境有关。



不同饲料诱发大、小鼠肥胖的比较观察

钟志勇, 饶子亮, 谢超敏, 黎雄才, 刘科, 邝少松, 王刚

2011, 31(3):  203-206.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.010

摘要 ( 345 )   PDF (465KB) ( 703 )  

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目的 筛选用于建立大鼠和小鼠肥胖模型的高脂饲料配方。方法 用5种改进配方的高脂饲料分别喂养大鼠8周,观察其体重、Lee's指数、脏器系数、腹腔脂肪指数、血脂及血糖等指标,选择高脂饲料C饲喂小鼠8周,观测相应指标。结果 与对照组比较,高脂饲料C组大鼠体重、Lee's指数、肝脏系数、肾脏系数、脾脏系数、睾丸系数、腹腔脂肪指数、甘油三脂、胆固醇、血糖显著增加(P<0.05); 与对照组比较,高脂饲料C组小鼠体重和心、肝、脾、肾的脏器系数、腹腔脂肪指数、胆固醇及血糖显著增加(P<0.05),而Lee's指数、甘油三脂和睾丸脏器系数无显著性变化(P>0.05)。结论 总油脂含量15％和黄豆粉含量24%的高脂饲料配方较为合理,可引起大鼠营养性肥胖,伴随高脂血症和高血糖;可引起小鼠体重快速增加和脏器系数增加,伴随高胆固醇血症和高血糖。



云南滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNA D-Loop的初步研究

倪丽菊, 谢建云, 胡建华

2011, 31(3):  207-210.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.011

摘要 ( 256 )   PDF (569KB) ( 666 )  

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目的 研究封闭群滇南小耳猪与广西巴马小型猪线粒体DNA(mtDNA)的多态性,探索小型猪遗传监测的方法。方法 用18种限制性内切酶对23头滇南小耳猪和21头广西巴马小型猪mtDNA D-loop的PCR产物进行RFLP分析。结果 滇南小耳猪和广西巴马小型猪的mtDNA D-loop在品种内和品种间均表现出相同的酶切图谱, 未见多态性。结论 滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNAD-loop的遗传多样性贫乏, mtDNA PCR-RFLP技术在其遗传监测中不具应用价值。



经验交流

视网膜变性模型大鼠部分生物学特性分析

沈艳, 彭秀华, 徐春华, 周文江

2011, 31(3):  211-214.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.012

摘要 ( 185 )   PDF (368KB) ( 588 )  

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目的 了解视网膜变性模型大鼠(RCS大鼠)的部分生物学特性,为视网膜变性模型大鼠的推广与应用提供基础资料。方法 应用定期测定RCS大鼠体重、统计繁殖特性和检测RCS大鼠主要脏器重量、系数以及血液生理与生化指标的方法,初步探索RCS大鼠的生物学特性。结果 RCS大鼠平均产仔数为6~7只,仔鼠成活率为69%,平均胎间隔为45.3±7.5 d。RCS大鼠的体重随周龄增加而增长,前20周增长快,后期增重较慢,基本保持在平台期; 雄鼠的生长速度比雌鼠快,30周龄的雄鼠和雌鼠的体重分别可达300.14±10.32 g和202.01±9.45 g。雌雄大鼠之间的血液白细胞数(WBC)存在显著差异(P<0.05),白细胞分类中淋巴细胞绝对值(LYMPH) 存在显著差异(P<0.05)。雌雄大鼠之间肝、脾、肾的重量及系数均有显著差异(P<0.05)。结论 RCS大鼠种群引进繁育成功,为RCS大鼠生物学特性的标准化提供可靠数据。



东方田鼠种群的生物净化方法

柏熊, 王晓东, 谢建云, 邢正弘, 高诚, 胡建华

2011, 31(3):  215-217.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.013

摘要 ( 222 )   PDF (237KB) ( 851 )  

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目的 对普通级东方田鼠孕鼠实施剖宫取胎,获得一种东方田鼠种群的生物净化培育方法。方法 根据东方田鼠生殖特性,准确判断妊娠天数,实施剖宫取胎手术,用SPF级ICR小鼠和SD大鼠作为代乳母鼠带乳。结果 自2008年6月~2009年3月,总共对52只东方田鼠孕鼠实施剖宫取胎手术,成功实施手术35只,共获得东方田鼠幼仔186只,实际成活125只,成活率为67.2%。经检测无SPF等级大、小鼠要求排除的微生物和寄生虫。结论 东方田鼠生物净化获得成功,为其它特别是野生鼠类的生物净化提供可借鉴之处。

C57BL/6J亚系Nnt部分功能基因丢失的检测

刘吉宏, 周艳, 王建飞

2011, 31(3):  218-219.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.014

摘要 ( 349 )   PDF (461KB) ( 663 )  

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目的 介绍一种判定C57BL/6小鼠亚系中烟酰胺核苷酸转氢酶(Nnt)基因是否丢失的PCR检测方法。方法 用PCR方法分别对5只购自杰克逊的C57BL/6J小鼠以及10只本公司C57BL/6背景的转基因小鼠基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行分析。结果 从杰克逊实验室购得的5只C57BL/6J小鼠基因组以及本公司抽取的3只C57BL/6小鼠Nnt部分功能基因丢失,本公司C57BL/6中有6只小鼠含有Nnt基因未丢失, 另外还有1只小鼠为Nnt基因杂合小鼠。结论 在选择C57BL/6作为代谢性实验的模型时,应考虑选择适当的亚系。



实验动物环境设施检测分析

沈志敏, 刘雄伟, 胡建华

2011, 31(3):  220-222.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.015

摘要 ( 203 )   PDF (246KB) ( 816 )  

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目的 了解上海市目前实验动物屏障环境设施(静态)质量情况。方法 按GB 14925-2001《实验动物环境及设施》中的方法,对上海市2010年新建、改建和扩建的实验动物屏障环境设施(静态)进行检测。结果 除温度、空气洁净度和噪声外,其他环境指标均存在不符合国家标准的情况。对存在不符合项的单位提出了整改建议。结论 实验动物屏障环境应从设计布局开始综合考虑,规范施工、科学安装、全面调试,并加强在日常运行中的维护、监控和管理,才能保证设施正常有效运行,以提高实验动物的质量和动物实验的可靠性。

实验动物环境卫生学的课程建设

卢静, 王晶晶, 王钜

2011, 31(3):  223-225.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.016

摘要 ( 102 )   PDF (250KB) ( 649 )  

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《实验动物环境卫生学》是实验动物专业本科生的专业课程之一。人类使用和培育实验动物的历史进程,伴随着实验动物环境改造过程,实验动物的繁育和应用都离不开环境卫生,所以,实验动物专业开设《实验动物环境卫生学》是非常必要的。实验动物环境与质量的关系是实验动物环境卫生学研究的主要内容。

综述

环介导等温扩增技术的研究进展和微生物检测应用

张小飞, 白杰英, 赵爽, 袁菊芳, 曾林

2011, 31(3):  226-230.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.03.017

摘要 ( 151 )   PDF (469KB) ( 1098 )  

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环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)是一种新型的核酸扩增技术。本文概述其反应原理、技术特点、相关技术、微生物检测应用及发展前景。