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当期目录

    2023年 第43卷 第1期    刊出日期:2023-02-25
    主编卷首语
    坚定信念,继续推进期刊规范化和服务能力建设
    吴宝金, 王健
    2023, 43(1):  1-2.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2023.009
    摘要 ( 202 )   HTML ( 32)   PDF (494KB) ( 194 )  
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    人类疾病动物模型:药学专题
    间歇禁食法在改善奥氮平诱导小鼠代谢紊乱中的机制研究
    李晗, 张笑瑞, 张成芳
    2023, 43(1):  3-10.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.089
    摘要 ( 473 )   HTML ( 66)   PDF (2914KB) ( 353 )  
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    目的 探究间歇禁食(intermittent fasting,IF)对奥氮平诱导小鼠代谢紊乱的保护作用及其机制。 方法 将C57BL/6J小鼠随机分为4组:生理盐水+自由摄食组(Saline+ Ad libitum)、生理盐水+间歇禁食组(Saline+IF)、奥氮平给药+自由摄食组(Olanzapine+ Ad libitum)、奥氮平给药+间歇禁食组(Olanzapine+IF),每组8只。其中间歇禁食组采用5∶2方案,即每周的周一、周四禁食,其余时间自由摄食,干预12周;以自由摄食作为间歇禁食的对照(Control),以生理盐水灌胃作为奥氮平给药的对照(Saline)。比较奥氮平处理组与对照组经过间歇禁食干预后小鼠体质量、肝脏质量和附睾旁脂肪组织质量的差异,并分别采用磁共振和HE染色法分析小鼠体脂、瘦素以及内脏脂肪浸润的变化;同时,分别采用葡萄糖氧化酶法和放射免疫法测定小鼠糖代谢过程中空腹血糖、胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的水平差异,分别采用ELISA和实时荧光定量PCR法测定H2O2含量和线粒体损伤相关标志物细胞色素C(Cytochrome C)mRNA水平。 结果 分组处理12周后,奥氮平诱导小鼠体质量、体脂、瘦素和内脏脂肪浸润明显增加(P<0.05),空腹血糖、胰岛素和胰岛素指数也明显增加(P<0.05);然而间歇禁食可以使上述指标明显降低(P<0.05)。进一步研究表明:间歇禁食处理后小鼠脂肪组织部位的H2O2释放和Cytochrome C mRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。 结论 间歇禁食可以减轻奥氮平引起的小鼠代谢紊乱,其机制可能与抑制氧化应激水平和维持线粒体功能有关。

    转录组测序筛选大鼠滑膜炎差异表达基因及秦皮素治疗靶点的体外验证
    杨凌, 庄迪, 金立伦
    2023, 43(1):  11-20.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.100
    摘要 ( 317 )   HTML ( 32)   PDF (2595KB) ( 310 )  
    图表数据 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

    目的 基于转录组测序分析碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)诱导的膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠相比于正常组大鼠滑膜组织中的表达差异基因,并初步筛选出秦皮素(fraxetin)治疗滑膜炎的靶点。 方法 将SD大鼠分为KOA模型组和对照组,采用MIA膝关节注射法制备大鼠右膝KOA模型。造模4周后,取各组大鼠右膝滑膜组织进行转录组测序,获得了KOA模型组与对照组大鼠滑膜组织中mRNA差异表达情况,然后进行差异基因表达分析、GO富集分析、KEGG功能富集分析和PPI蛋白网络互作分析。同时将巨噬细胞Raw264.7分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预组和LPS+60 μmol/L秦皮素联合干预组,并采用实时荧光定量PCR法对转录组测序后的差异基因分析结果进行验证。 结果 转录组测序后的差异基因表达分析显示,KOA模型组与对照组相比,共有1 730个上调基因和1 546个下调基因,其中显著上调的基因有mmp12、Acod1、Acan、Col2a1和Atp6v0d2等[|log2(FoldChange)|≥1,校正后P<0.01]。KEGG聚类分析和GO聚类分析显示,差异基因主要参与调节炎症及免疫代谢过程,例如三羧酸循环、线粒体功能。LPS干预后的Raw264.7细胞中Acod1与Atp6v0d2显著高表达(P<0.000 1),而且相较于LPS干预组,LPS+秦皮素联合干预后的Raw264.7细胞中Atp6v0d2表达水平显著降低(P<0.001)。 结论 MIA诱导KOA建模后,大鼠膝关节滑膜组织中介导炎症及免疫代谢的巨噬细胞相关基因mmp12、Acod1和Atp6v0D2等高表达,提示KOA的发生、发展过程中可能存在着由滑膜巨噬细胞介导的免疫代谢改变。LPS干预后巨噬细胞Raw264.7中Acod1和Atp6v0d2表达增高可初步证实这一结果。其中Atp6v0D2可能是秦皮素治疗滑膜炎的一个潜在靶点,这为KOA治疗提供了新的思路。

    贝伐珠单抗注射液对食蟹猴皮肤伤口愈合的影响
    杨平, 崔立, 俞诚, 温智越
    2023, 43(1):  21-29.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.128
    摘要 ( 425 )   HTML ( 25)   PDF (2018KB) ( 332 )  
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    目的 通过观察贝伐珠单抗注射液对食蟹猴背部皮肤伤口愈合速度及损伤皮肤组织中CD34表达的影响,验证贝伐珠单抗注射液对食蟹猴伤口愈合的延迟作用,为临床肿瘤手术患者使用贝伐珠单抗治疗时提供剂量和频次的用药参考。 方法 6只雄性食蟹猴采用背部全层皮肤切除术建立伤口愈合评估模型,随机选取3只食蟹猴作为生理盐水组,其余3只食蟹猴为贝伐珠单抗组。贝伐珠单抗组食蟹猴在手术后第0、4、8、11天静脉注射30 mg/kg 贝伐珠单抗注射液,生理盐水组静脉注射等量生理盐水;术后进行血常规检测,并观察各组食蟹猴的伤口愈合情况,Image J软件分析伤口愈合率,用评分法对伤口状态的严重程度进行评价。4周后对6只食蟹猴伤口愈合皮肤取材,通过免疫组织化学法检查皮肤组织中CD34的表达水平。 结果 成功构建食蟹猴伤口愈合评估模型。术后第3天的食蟹猴血液中白细胞、中性粒细胞数量明显升高(P<0.05),第7天后白细胞数量逐渐恢复正常,而红细胞、血红蛋白、红细胞压积没有明显变化,提示动物营养状态良好。与生理盐水组相比,贝伐珠单抗组的伤口愈合率在术后7 d、28 d明显降低(P<0.01,P<0.001),愈合皮肤组织中CD34表达水平明显降低(P<0.01)。 结论 贝伐珠单抗注射给药可能通过抑制食蟹猴伤口新生皮肤组织中的微血管生成,延缓伤口愈合。临床中患者手术后使用贝伐珠单抗注射液时应该权衡利弊,科学合理地选择干预时间点、剂量、频次。

    消瘀散新组方修复膝骨关节炎模型兔的软骨损伤及MMP-13表达
    崔若琳, 王庆, 杨玲, 冯文昌, 刘智伟, 滕蔚然, 马碧涛, 王乐杨, 秦丽萍, 金立伦
    2023, 43(1):  30-38.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.099
    摘要 ( 251 )   HTML ( 16)   PDF (1433KB) ( 186 )  
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    目的 研究消瘀散新组方对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)兔关节软骨的作用及机制。 方法 将42只6月龄普通级新西兰白兔随机分为正常组、模型组、消瘀散组、消瘀散新组方组,每组10只(另2只用于模型验证)。除正常组外,其他各组兔均按照改良Hulth法对右侧膝关节进行KOA造模。造模5周后,对消瘀散组、消瘀散新组方组动物分别给予相应的贴膏进行膝关节炎治疗,每天1次,每次持续10 h。连续给药治疗2周后,取4组兔膝关节软骨,行大体观察并采用Outerbridge分级法评价各组软骨损伤情况,采用HE染色法在光学显微镜下观察各组兔膝关节软骨、钙化层和软骨下骨病理改变,并采用Mankin's法评价软骨退变程度,采用免疫组织化学法在光学显微镜下观察各组兔膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase- 13,MMP-13)的表达情况。 结果 关节软骨大体观察后Outerbridge评级比较发现,消瘀散组较模型组的高分级动物数减少(P<0.05),消瘀散新组方组比消瘀散组的高分级动物数也减少(P<0.05)。HE染色发现4组兔关节软骨的Mankin's评分由高到低依次为模型组(10.82±1.76)、消瘀散组(6.19±1.23)、消瘀散新组方组(2.64±1.18)和对照组(0.28±0.17),各组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学检测发现各组兔关节软骨组织中MMP-13表达阳性率由高到低依次为模型组(67.90±13.94)%、消瘀散组(37.10±19.16)%、消瘀散新组方组(13.60±3.10)%和对照组(3.20±2.39)%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 消瘀散新组方可修复KOA兔关节软骨损伤,降低软骨组织中MMP-13的表达水平,这可能是其治疗骨关节炎的作用机制之一。

    牛磺酸对苯扎氯铵损伤大鼠眼角膜内皮细胞无保护作用
    葛健, 孙静芬, 吴永杰
    2023, 43(1):  39-43.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.034
    摘要 ( 271 )   HTML ( 14)   PDF (1046KB) ( 219 )  
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    目的 观察2%牛磺酸对苯扎氯铵损伤大鼠眼角膜内皮细胞的保护作用。 方法 取3只SPF级SD大鼠(共6只眼),每只眼制备6块角膜内皮层和后弹力层组织片,随机分为3组。用组织块培养法培养大鼠眼角膜内皮细胞1 d后,对照组仅加入2%牛磺酸溶液,实验组在加入2%牛磺酸溶液后再注入质量分数分别为0.01%和0.03%的苯扎氯铵溶液。继续培养1、2、4、5、6、8 d后倒置显微镜下观察各组大鼠眼角膜内皮细胞的生长情况,并用Wright染色后光学显微镜下观察内皮细胞形态。 结果 用0.01%苯扎氯铵和2%牛磺酸处理1 d的实验组大鼠眼角膜组织块边缘出现多角形的内皮细胞,胞体透明;2 d后多角形细胞增多,但没有出现细胞间的融合生长现象;3 d后多角形细胞减少,内皮细胞未见核分裂象;4 d后可见内皮细胞核着色加深,多角形细胞少见;5 d后内皮细胞数量减少,出现细胞体固缩死亡现象。用0.03%苯扎氯铵和2%牛磺酸处理1 d的实验组未观察到内皮细胞生长,胞体稀少散在。仅用2%牛磺酸处理的对照组1 d后组织块边缘出现多角形内皮细胞和少数类内皮多边形细胞;3 d后组织块边缘多角形细胞增多,而且有逐渐融合生长的现象;5 d后内皮细胞个数增多,而且细胞外形多呈六角形;8 d后内皮细胞形成大片状,胞体呈六角形或类圆形,出现细胞核分裂象。左右眼角膜内皮细胞生长均匀,在0.01%和0.03%苯扎氯铵处理的实验组以及对照组内左右眼内皮细胞形态均无明显差别。 结论 2%牛磺酸对被不同浓度的苯扎氯铵液损伤的大鼠眼角膜内皮细胞无保护作用。

    实验动物资源开发与利用
    SHJH hr 小鼠部分生物学特性及衰老表型的测定与分析
    唐慧青, 常书福, 于志锋, 张雷, 谈小倩, 瞿伟, 李亮, 钱珍, 顾坚忠, 徐平
    2023, 43(1):  44-52.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.069
    摘要 ( 408 )   HTML ( 25)   PDF (2106KB) ( 363 )  
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    目的 测定与分析SHJH hr 小鼠的部分生物学特性及衰老表型,为该小鼠模型用于衰老机制研究、抗衰老药物研发等提供基础数据。 方法 以对应同周龄段的ICR小鼠为对照,测定SHJH hr 小鼠3~16周龄体质量生长数据、1~4胎繁育能力以及生命周期;测定6周龄SHJH hr 小鼠的血常规(30项)和血清生化指标(25项);采集8周龄SHJH hr 小鼠静脉血进行流式细胞分析,测定免疫细胞含量;利用显微CT测量4、8、26周龄SHJH hr 小鼠松质骨衰老骨结构与骨密度;组织学观察8周龄小鼠骨和关节组织病理学变化。 结果 与ICR小鼠相比, SHJH hr 小鼠16周龄时雌雄体质量均明显偏低(P<0.05),母鼠繁育性能低下(P<0.01)或不具备正常的繁育性能。SHJH hr 小鼠的生存时间最短57周龄,最长为71周龄,较正常ICR小鼠短,表现出明显的快速衰老现象;同时,部分血液生理生化指标、骨与软骨组织病理变化均显示SHJH hr 小鼠生理机能加速衰老与异常。 结论 SHJH hr 小鼠符合快速衰老的部分特性,并伴有因衰老而导致的某些生理病理变化。

    SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群结构比较分析
    许琴, 倪艳, 是文辉, 李建瑛, 刘江伟, 赵红琼, 徐新明
    2023, 43(1):  53-60.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.103
    摘要 ( 268 )   HTML ( 8)   PDF (1853KB) ( 245 )  
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    目的 使用高通量测序技术分析SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群结构与丰度。 方法 收集30只SPF级雄性SD大鼠的回肠及结肠腔内容物,提取内容物中细菌总DNA并进行PCR扩增。使用Ilumina NovaSeq测序平台对样本中细菌16S rRNA的V3-V4区进行测序。然后基于有效数据在门、属水平上分析肠道菌群的物种结构和丰度,采用QIIME软件(扩增子)分析工具分析回肠和结肠菌群的多样性及差异,同时应用Tax4Fun程序预测回肠及结肠菌群的优势基因富集通路。 结果 在门水平上,雄性SD大鼠回肠内微生物优势菌群主要是厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),占比超过98%;结肠内微生物优势菌群主要是厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),占比超过95%。在属水平上,回肠以乳酸杆菌属(Lactobacillus)和另枝菌属(Alistipes)为主要优势菌群,结肠以乳酸杆菌属(Lactobacillus)及罗姆布茨菌属(Romboutsia)为优势菌群。在菌群多样性方面,结肠菌群的α多样性包括丰富度指数(Chao1指数)及多样性指数(香农指数Shannon index)都显著高于回肠(P<0.01),其菌群物种的组成结构差异性比回肠小;回肠菌群结构差异性显著的主要是厚壁菌门(Firmicutes)、罗姆布茨菌属(Romboutsia)和消化链球菌科(Peptostreptococcaceae),而结肠菌群结构差异性显著的是拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和拟杆菌目(Bacteroidales)。在菌群功能方面,回肠菌群优势基因显著富集于类脂物代谢、多酮代谢、膜运输、生物降解等通路,而结肠菌群优势基因显著富集于甘聚糖生物合成代谢、能量代谢、辅助因子和维生素及其他产物的生物合成等通路。 结论 SPF级雄性SD大鼠回肠与结肠菌群在结构与丰度上存在显著差异,结肠菌群的丰富度及多样性高于回肠。

    不同月龄长爪沙鼠的肾脏组织学特征
    卢领群, 郭红刚, 石巧娟, 戴方伟, 褚晓峰
    2023, 43(1):  61-66.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.130
    摘要 ( 359 )   HTML ( 11)   PDF (1354KB) ( 343 )  
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    目的 探究不同月龄长爪沙鼠肾脏的组织学特征。 方法 选取2、6、12月龄长爪沙鼠各10只,雌雄各半。动物安乐死后取肾脏,制作石蜡切片,HE、MASSON和PAS染色后,数字扫描观察不同月龄长爪沙鼠的肾脏组织各部分结构差异,通过图像分析软件测量肾脏组织相关数据。 结果 长爪沙鼠的肾皮质和外髓质肾小管断面中近曲小管数量较远曲小管多;随着月龄增加,肾小球密度减少,肾小球直径增加,肾小管基膜增厚,肾小管间纤维成分增多。 结论 长爪沙鼠肾脏的组织结构随着月龄增长出现差异性变化,这种变化可能与肾小球硬化、实质性细胞减少有关,具体机制有待进一步研究。

    实验用猫的驯化及繁殖方法初步研究
    何永平, 谢美贤, 庞智慧, 李庆秀, 何华红, 张讷敏, 李薇
    2023, 43(1):  67-72.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.118
    摘要 ( 336 )   HTML ( 18)   PDF (953KB) ( 296 )  
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    目的 开展家猫实验动物化的驯化饲养及繁殖,探索实验猫的饲养管理方法和繁殖技术。 方法 从广州市郊农村引进中华田园猫3窝计7只,建立繁育种子群,按实验动物饲养管理方法进行笼养驯化饲养和封闭繁殖、传代,统计种群繁殖情况、种猫年怀孕次数、产仔季节、仔猫出生和离乳体质量、离乳成活率等数据。 结果 幼年种猫能适应笼养饲养管理方式。在传代繁殖、扩大种群中,一年怀孕1胎、2胎、3胎的母猫只数占比分别为63.2%、26.3%和10.5%,1~4季度产仔胎数比例分别为20.7%、20.7%、27.6%和31.0%。19只母猫共计怀孕、产仔29胎次,产仔101只,每胎平均产仔(3.5±1.33)只。幼猫离乳成活67只,平均离乳成活率为60.86%。雌、雄猫的出生体质量分别为(89.31±13.69)g和(93.47±15.12)g,离乳体质量分别为(361.62±82.77)g和(376.0±91.71)g。 结论 家养中华田园猫能适应实验动物化饲养、繁殖方式,繁殖力较强,一年四季能正常怀孕、产仔;幼猫生长到5~6月龄时能够满足药品降压物质检查对猫的体质量要求,可被用作来源清楚的药品检验用实验猫。

    动物实验技术与方法
    虚拟现实在实验动物行为分析中的应用进展
    张超超, 田雪松
    2023, 43(1):  73-78.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.078
    摘要 ( 335 )   HTML ( 38)   PDF (737KB) ( 333 )  
    参考文献 | 相关文章 | 计量指标

    虚拟现实(virtual reality,VR)是一种通过计算机进行场景模拟的新兴技术,近年来已经成为动物行为分析的可靠工具。动物行为对动物生存至关重要。动物行为分析为遗传学、生态学、神经科学、经济学以及机器人科学等领域的科技进步提供了有用信息。动物行为分析可分为刺激独立于动物对刺激的反应的开环研究,以及刺激根据动物的实时运动进行调整的闭环研究。本文首先梳理了动物行为分析的起源、概念和应用领域,回顾了传统技术条件下以视觉刺激为代表的动物行为开环研究的不足;然后以视觉、嗅觉、触觉、听觉刺激为例,分析了虚拟现实技术条件下的动物行为分析系统能够将精确的实验控制与复杂的实验动物行为相结合的可行性,完成了真实物理世界的实验方法无法实现的闭环研究;最后对虚拟现实发展为高级模拟及虚拟动物的前景进行了展望。

    实验动物管理
    基于江苏省实验动物行政许可现状的安全管理对策
    漆重阳, 陈林, 艾曼, 徐航, 张厚森
    2023, 43(1):  79-85.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2022.083
    摘要 ( 193 )   HTML ( 21)   PDF (843KB) ( 278 )  
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    随着生命科学的快速发展,实验动物在生物医药等众多领域中扮演着重要角色。近年来,国家“放管服”改革不断深入,实验动物行政管理部门愈加重视事中事后监管工作,其中实验动物安全管理更是监管过程中的重点和难点。本文通过对近三年江苏省实验动物许可证情况、设施面积、生产和使用量、从业人员等信息进行分析,结合近年来依法行政管理实际,剖析实验动物生产和使用过程中管理制度、从业人员、设施运行、动物质量控制、意外伤害和人兽共患病、动物运输和废弃物处理等方面可能存在的安全风险隐患,并介绍当前实验动物安全管理制度建设、日常管理服务以及事中事后监管清单等内容,提出相关安全管理对策和建议,希望能为进一步提升实验动物安全管理水平提供支撑。

    比较医学研究与报告规范
    动物实验研究报告的国际指南ARRIVE 2.0介绍及期刊实施计划
    张俊彦, 刘晓宇, 李垚, 陈国元, 卢晓, 白玉, 卢选成, 庞万勇, 吴宝金
    2023, 43(1):  86-94.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2023.014
    摘要 ( 524 )   HTML ( 71)   PDF (1381KB) ( 636 )  
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    动物实验在生物医药科学研究过程中发挥着重要作用,是基础医学向临床医学转化的必要途径。动物实验研究及报告的规范性决定了研究结果的可靠性和可重复性,也是其研究成果能够向临床试验转化应用的关键。针对如何更加规范地设计、实施动物实验,撰写动物实验报告,以及发表相关学术论文,《实验动物与比较医学》期刊从2023年起推出“比较医学研究及报告规范”专栏,重点推介并解读实验动物与比较医学相关的国际通用规范,如ARRIVE 2.0等。本文对动物实验研究报告的国际指南ARRIVE 2.0的制定和使用、基本内容和优先级别,以及国际生物医学期刊实施ARRIVE 2.0指南的计划方案进行了重点介绍,并说明《实验动物与比较医学》期刊遵循ARRIVE 2.0指南的目前情况及未来计划。动物实验医学研究及报告遵循ARRIVE 2.0指南等国际规范是助推我国实验动物科学与生物医药学高质量发展的重要动力之一,也是落实3R原则和提高实验动物福利强有力的一种手段,广大科研工作者和期刊工作者均应该高度重视并积极践行。

    实验动物与比较医学科创团队推介
    中国科学院上海药物研究所实验动物中心
    李娜, 张周
    2023, 43(1):  95-96.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2023.013
    摘要 ( 190 )   HTML ( 21)   PDF (1072KB) ( 210 )  
    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    浙江中医药大学动物实验研究中心
    徐孝平, 周卫民, 王德军, 陈民利
    2023, 43(1):  97-98.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2023.008
    摘要 ( 155 )   HTML ( 15)   PDF (764KB) ( 384 )  
    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    江苏省医药动物实验基地
    周建丽, 秦珩, 张珂, 施爱民
    2023, 43(1):  99-100.  DOI: 10.12300/j.issn.1674-5817.2023.011
    摘要 ( 255 )   HTML ( 12)   PDF (967KB) ( 277 )  
    参考文献 | 相关文章 | 计量指标
    附录
    《实验动物与比较医学》稿约(2023年版)
    2023, 43(1):  101-102. 
    摘要 ( 114 )   HTML ( 11)   PDF (485KB) ( 149 )  
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