实验用斑马鱼成鱼内脏组织病理学检查方法的优化

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2017.06.008

实验动物与比较医学 ›› 2017, Vol. 37 ›› Issue (6): 465-469.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.06.008

实验用斑马鱼成鱼内脏组织病理学检查方法的优化

田芳¹, 王玉柱¹, 夏敏杰¹, 孙冰¹, 丁训城¹, 李卫华¹, 许慧慧², 胡晶莹¹

1.上海市计划生育科学研究所, 国家计划生育药具重点实验室, 上海 200032;
2.上海市疾病预防控制中心, 上海 200336

收稿日期:2017-05-10 出版日期:2017-12-25 发布日期:2017-12-25
作者简介:田芳(1985-),女,硕士,助理研究员,生殖毒理学方向。E-mail:376616808@qq.com
基金资助:
上海市科委实验动物研究专项(15140901200);上海市第四轮公共卫生三年行动计划重点学科建设计划—环境卫生学与劳动卫生学(15GWZK0201);上海市青年科技英才扬帆计划(15YF1410000)

Optimization on Methodology of Histopathological Examination in Adult Zebrafish Visceral Tissues

TIAN Fang¹, WANG Yu-zhu¹, XIA Min-jie¹, SUN Bing¹, DING Xun-cheng¹, LI Wei-hua¹, XU Hui-hui², HU Jing-ying¹

1. State Key Labs of Family Planning Devices, Shanghai Institute of Planned Parenthood Research, Shanghai 200032, China;
2. Shanghai Municipal Center For Disease Control & Prevention, Shanghai 200336, China

Received:2017-05-10 Online:2017-12-25 Published:2017-12-25

摘要/Abstract

摘要： 目的探索并优化适合于斑马鱼成鱼内脏组织的病理学检查技术。方法将斑马鱼整条固定于Dietrich’s固定液后,分段切开,取包含内脏组织的胸腹段,剥除斑马鱼鱼皮,梯度乙醇脱水时间优选为30 min、二甲苯透明、石蜡包埋、沿斑马鱼体轴纵向连续切片、HE染色后用温水冲洗切片进行颜色反蓝,正置显微镜下观察效果。结果经过反复的条件摸索和优化,光学显微镜下观察心脏、肝脏、脾脏、胆囊、肾脏、胰腺、消化道、精巢和卵巢等组织切片和染色的效果,可见斑马鱼组织均切片完整,无折叠或断裂,各脏器的解剖学与组织细胞学结构清晰,易于辨认,细胞核与细胞质染色分明。结论优化后的斑马鱼成鱼内脏组织病理学方法效果较为理想,可获得高质量的内脏组织学标本。

关键词: 斑马鱼, 内脏组织, 连续切片, HE染色

Abstract: Objective To explore the optimized method of paraffin serial section and hematoxylin-eosin (HE) staining of the adult zebrafish visceral tissues. Methods After the zebrafish was fixed, the tissues were segmented, and the thoracic/abdominal segment which contains internal organs was stripped of skin and dehydrated by gradient ethanol (dehydration time was optimized to 30 min), transparented by xylene and embedded by paraffin. The tissue was sectioned serially along the body axis, rinsed with warm water after HE staining, and observed under microscope. Results The microscopic observation of heart, liver, spleen, gallbladder, kidney, pancreas, gastrointestinal tract, testis and ovary showed that effects of tissue sectioning and staining were favorable. The sections were intact without collapse or fracture, the anatomical and cytological structure of all organs were clear and complete, the nucleus were neatly blue-stained and the cytoplasm were neatly red-stained. Conclusion With the optimized histopathological method, we were able to obtain high quality histological specimens of the internal organs of adult zebrafish.

Key words: Zebrafish, Visceral tissue, Serial section, Hematoxylin-eosin (HE) staining

中图分类号:

R332Q95-33

田芳, 王玉柱, 夏敏杰, 孙冰, 丁训城, 李卫华, 许慧慧, 胡晶莹. 实验用斑马鱼成鱼内脏组织病理学检查方法的优化[J]. 实验动物与比较医学, 2017, 37(6): 465-469.

TIAN Fang, WANG Yu-zhu, XIA Min-jie, SUN Bing, DING Xun-cheng, LI Wei-hua, XU Hui-hui, HU Jing-ying. Optimization on Methodology of Histopathological Examination in Adult Zebrafish Visceral Tissues[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2017, 37(6): 465-469.

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Optimization on Methodology of Histopathological Examination in Adult Zebrafish Visceral Tissues

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