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2007年 第27卷 第1期    刊出日期：2007-01-31

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论文

工作日和非工作日雄性Wistar大鼠遥测血压有差异

2007, 27(1):  1-5. 

摘要 ( 568 )   PDF (50KB) ( 576 )  

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转hMCP/hCD₅₉双基因小鼠的构建、传代及功能测试

魏庆信1，2，陈实3，魏雁1，2，郑新民1，2，李莉1，2，乔宪风1，2，刘西梅1，2，周荆荣1，2，田永祥1，2

2007, 27(1):  1-5. 

摘要 ( 445 )   PDF (271KB) ( 520 )  

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目的 比较转染两个补体调节蛋白（CRP）基因与转染单一CRP基因对异种细胞的保护作用。方法 采用双基因混合注射的方法，将人MCP（膜辅因子蛋白）和CD₅₉（膜反应性溶解抑制物）两种基因导入521枚DM小鼠的受精卵原核。结果 行到原代转hCD₅₉基因小鼠14只，转hMCP基因小鼠12只，hCD₅₉/hMCP双基因共整合的小鼠7只，转基因效率5%。通过5只G₀代转双基因小志和非转基因小鼠的繁殖，行到F₁转hMCP小鼠14只，转hCD₅₉小鼠16只，转双基因小鼠10只，F₁双基因占33.3%。用10%新鲜人血浆体外灌注小鼠离体心脏，转双基因组心脏搏动时间（138±25min）明显长于单基因组（hCD₅₉组78±27min，hMCP组43±21min）和非转基因对照组（20±12min）。结论 转染两个CRP基因比转染单一CRP基因对异种细胞有更好的保护作用。

免股动脉粥样硬化症改良模型的建立及其评价

黄成磊1，李天奇1，乔伟伟2，罗心平1，李剑1，倪唤春1，沈伟1，李宏治3，金波1，施海明1

2007, 27(1):  6-10. 

摘要 ( 1035 )   PDF (442KB) ( 657 )  

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目的 建立新西兰兔股动脉粥样硬化改良模型,探讨其可行性并与传统造模方法进行比较。方法 西兰兔通过高脂饲料饲养后,在X线透视下经颈动脉行股动脉球囊损伤,建立改良动脉粥样硬化模型。与传统造模方法相比,评判造模前后的冠状动脉造影血流分级(Thrombolysis in Myocardial Infarction,TIMI)评分、管腔内径,血管内膜厚度和泡沫细胞阳性面积的变化,以及血凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)值的变化。结果 与对照组比较,改良模型组的股动脉管腔内径显著狭窄(P＜0.001),其狭窄程度与动脉内膜增厚程度存在相关性(r=-0.753)。同时,血管内膜泡沫细胞阳性面积率显著增多（P=0.018）。该变化与传统造模组相比，更为显著。结论 改良法建立粥样斑块模型不但具有可行性，而且可控程度高、易重复。这种造模方法可以通过微创技术TIMI评分与血液生化学进行评价；与传统模型相比，更有助于进一步阐明不稳定斑块的机制。

大鼠间断低氧-复氧模拟睡眠呼吸暂停综合征模型的建立

杜晓燕1，胡良冈2，范小芳2，蔡晓红3，周永海3，贾闪闪2，龚永生2

2007, 27(1):  11-14. 

摘要 ( 909 )   PDF (223KB) ( 655 )  

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目的 建立大鼠睡眠呼吸暂停综合征（SAS）动物模型.方法 SPF雄性SD大鼠5只随机分为正常对照组（NC）、空气模拟2周对照组（2C）、空气模拟4周对照组（4C）、间断低氧-复氧2周组（2H）和间断低氧-复氧4周组（4H）.后4组大鼠进自制低氧舱，2H、4H组每天间断低氧8h，舱内循环充入氮气和氧气，每次循环90 s，循环时间自动控制；舱内氧浓度最高21%±0.5%、最低9%±1.5%；2C和4C组充入空气；NC组不进舱.到规定时间后，颈外静脉和颈总动脉插管分别测定右心功能（RVEDP、RVESP、RV±dp/dt max）和肺、体循环压力（mCAP、mPAP）.并测定（LV+S）/WT和RW（LV+S）作为左、右心室肥大指标.结果 mPAP：2H组较2C组高18.71%，4H组较4C组高16.87%（P均＜0.05）；4H组RV+dp/dt、RV-dp/dt和RVESP较4C组分别高56.35%、55.43%和36.36%（P均＜0.01），较2H组高80.97%、88.85%、19.49%（P均＜0.01）；2C组、4C组与NC组上述指标各组间均无显著性差异（P均＞0.05）.（LV+S）/WT、RV/（LV+S）及mCAP各组间无显著性差异（P均＞0.05）.结论 本模型操作简便、控制精确、可重复性佳、符合SAS病理生理学特征，是较理想的SAS动物模型.

长春新碱脂质体的药代动力学及其抗肿瘤作用

王小晨1，王向伟1，秦燕1，徐智儒1，王光凤1，来庆勤1，杨正茂2，刘全海1

2007, 27(1):  15-19. 

摘要 ( 924 )   PDF (290KB) ( 813 )  

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目的 进行脂质体长春新碱（Liposome Vincristine，L-VCR）的动物体内药代学研究、体内抗肿瘤药效学研究以及毒理学研究，探讨L-VCR的作用特点及其可能的作用机制.方法 Wistar大鼠接种Walker256肿瘤，用高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV），测定其体内以及肿瘤内的血药浓度，用药动学计算软件拟合处理得药动学参数；小鼠接种B16黑色素瘤，静脉给予L-VCR，计算其肿瘤抑制率以及去瘤体重测定L-VCR小鼠的LD50.结果 与游离长春新碱（Free Vincristine，F-VCR）相比，L-VCR血浆以及肿瘤内浓度增高，维持时间明显延长，AUC_0-t增加约121倍；L-VCR能明显减轻小鼠B16黑色素瘤模型的瘤体重量，并呈现一定的量效关系；L-VCR小鼠的LD50明显高于游离药物.结论 L-VCR可显著延长VCR半衰期，增大药时曲线下面积，药效明显高于F-VCR，且毒性明显降低.其作用可能是通过脂质体包裹，增加肿瘤中的药物量，延长VCR的作用时间，药物释放缓慢，从而减轻VCR的毒性而达到的。

成年大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养、鉴定及体外增殖

李映川，丁强，方祖军

2007, 27(1):  20-24. 

摘要 ( 940 )   PDF (1108KB) ( 775 )  

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目的 探讨成年大鼠原代骨骼肌卫星细胞体外培养方法，观察细胞的增殖、成肌分化特性.方法 采用改进的两步酶消化法结合差速贴壁技术，获得较高纯度的骨骼肌卫星细胞.免疫组化鉴定所获取细胞的肌源性标志desmin.MTT法观察骨骼肌卫星细胞的体外增殖特性并绘制生长曲线图.同时观察不同培养条件下骨骼肌卫星细胞的成肌分化特性.结果 所分离的原代骨骼肌卫星细胞纯度在90%以上.细胞体外培养时在第3天进入对数生长期，5～6 d进入增殖平台期.细胞体外培养时无须特殊诱导可以自发出现成肌定向分化，相互融合形成具有自发收缩特性的肌管细胞.结论 体外培养获取的骨骼肌卫星细胞数量可以满足组织工程研究的需要

外周α1和α2受体参与应激性高血压对大鼠颈动脉窦反射的抑制

王国卿，沈新娥，王琳辉，邹容，周希平

2007, 27(1):  25-28. 

摘要 ( 899 )   PDF (217KB) ( 754 )  

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目的 探讨外周α1和α2受体是否参与应激性高血压对颈动脉窦反射(CSR)的重调定.方法 应激一周的雄性SD大鼠,麻醉后孤离双侧颈动脉窦区,将不同窦内压(ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic五参数曲线方程拟合,求得ISP-MAP关系曲线及特征参数,观察外周静脉注射(iv.)选择性α1或α2受体拮抗剂酚苄明(PBZ)或育亨宾(YOH)对应激性CSR的影响.结果 iv.PBZ(2.5 μmol/L,0.15μl/g)导致应激大鼠ISP-MAP关系曲线显著下移(P＜0.05),反射参数中阈压、饱和压和最大增益时的窦内压值减小(P＜0.05),而最大增益加大(P＜0.05);iv.YOH(5μmol/L,0.15μl/g)对应激性高血压所致ISP-MAP关系曲线及其反射参数效应的影响,与iv.PBZ后的相类似,但YOH的作用不如PBZ的明显(P＜0.05);iv.相应剂量的PBZ或YOH对非应激大鼠的CSR无明显影响(P＞0.05);iv.PBZ或YOH均不能使应激的CSR水平恢复到相应的非应激给药后水平.结论 外周α1、α2受体参与应激性高血压对CSR的抑制性重调定;外周α1受体在这种重调定的机制中可能发挥更为重要的作用;此外,应激性高血压对CSR的作用中尚有其他因素的参与.

rhBMP-2在诱导C3H10T1/2干细胞成骨中对MMP-13、Collagen-2 mRNA表达的影响

徐岚，范雁，周迎会，吴士良

2007, 27(1):  29-31. 

摘要 ( 852 )   PDF (358KB) ( 681 )  

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目的 研究基质金属蛋白酶13（MMP13）、Ⅱ型胶原（co1lagen2）在C3H10T1/2细胞中的相互关系，探讨rhBMP-2在诱导C3H10T1/2成骨的同时对MMP13以及Collagen2 mRNA表达水平的影响.方法 取C3H10T1/2细胞加入rhBMP-2诱导成骨细胞的产生，Von Kossa染色观察细胞形态，同时在不同时间段抽取总RNA，利用Real-time PCR检测MMP13、Collagen2的表达情况.结果 未加rhBMP-2的细胞中MMP13、Collagen2前10d表达呈负相关；而rhBMP-2处理后的细胞中MMP-13表达水平受抑制，且MMP13和collagen2前14d表达呈明显负相关.结论 MMP-13和Collagen-2 mRNA表达水平具明显相关性，rhBMP-2在诱导成骨的同时，具有抑制MMP-13表达的作用.

大鼠膀胱癌模型建立的实验研究

丁鸿1，钱立新2

2007, 27(1):  32-36. 

摘要 ( 824 )   PDF (346KB) ( 850 )  

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目的 动态观察诱癌剂N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）诱发Wistar大鼠膀胱肿瘤发生发展的过程，探讨建立膀胱癌动物模型的合适方法.方法 60只Wistar大鼠随机分成3组，用MNU（2 mg/2周）定期作膀胱内灌注，实验周期为14周，按计划处死大鼠，观察不同阶段动物膀胱癌的发生情况.结果 60只大鼠中58只完成了实验，2只中途死亡，诱癌组（MNU组）存活39只大鼠中，病理证实为膀胱癌者37只，占92.5%，2只为不典型增生，占5%.在病理确诊的39只大鼠中，有33只联合使用尿HE染色+AO染色诊断为膀胱肿瘤，阳性率89.2%.结论 MNU经膀胱灌注诱发膀胱肿瘤动物模型方法简单、药物用量少、诱瘤时间短、致癌率高，其诱发的膀胱肿瘤在组织学和病理学特征上和人的膀胱肿瘤十分相似，是较理想的动物模型.在动物实验中用尿HE染色+AO染色诊断膀胱肿瘤有一定应用价值.

一种新的大鼠原位肾移植模型的建立

赵彦宗1，杜维成1，郭喜桃1，岳中瑾2

2007, 27(1):  37-40. 

摘要 ( 805 )   PDF (450KB) ( 596 )  

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目的 建立一种新的大鼠原位肾移植模型.方法 分别以SD大鼠和Wistar大鼠作为供、受者；左侧原位移植，肠系膜上动脉-肾动脉经改良sleeve技术吻合，下腔静脉-肾静脉通过临时内支架端-端吻合，输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合.结果 61次手术，成功率95.1%，总手术时间161±11 min，动脉吻合时间11±2 min，受体存活4～17 d，并发症有吻合口出血、动脉血栓形成、尿瘘和急性排斥反应.结论 该技术简单实用，对成功建立肾移植模型及进行相关实验研究有应用价值.

食管癌SCID小鼠异位移植模型建立的初步探讨

谢仰民1，2，谢良喜3，李德锐3，李芳2，陈炯玉3，洪超群3，曾德年1

2007, 27(1):  41-44. 

摘要 ( 920 )   PDF (590KB) ( 578 )  

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目的 建立人食管癌SCID异位移植模型并对其转移性淋巴来源细胞进行筛选.方法 将食管癌细胞系Eca-109细胞悬液注射至SCID小鼠胃壁.三个月后或动物频死时处死解剖，观察肿瘤在小鼠体内的生长转移情况，对肉眼可见的转移病灶先建立皮下移植模型后建立转移性细胞亚系.结果 胃壁移植15只SCID小鼠，获得9只胃壁移植瘤动物，其中一只出现纵隔淋巴结转移和肺转移.取淋巴结转移灶部分移植至SCID动物皮下，在动物皮下传代两个月（共4代）后，进行常规组织块培养，初步建立细胞亚系，命名为LnF1/Eca-109.结论 肿瘤胃壁移植是建立食管癌免疫缺陷动物自发性移植模型和筛选转移性细胞亚系的可行方法.

CTLA4-Ig腺病毒基因局部转染诱导大鼠肾移植免疫耐受

平季根，严春寅，吕金星

2007, 27(1):  45-47. 

摘要 ( 929 )   PDF (303KB) ( 770 )  

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目的 通过CTLA4-Ig腺病毒基因治疗诱导异基因大鼠之间的肾脏移植免疫耐受，并探讨相关机制.方法 以CTLA4-Ig基因重组腺病毒为载体，将CTLA4-Ig基因局部转染入SD大鼠肾脏.将SD对Wistar大鼠原位肾移植模型分为三组：组Ⅰ为空白对照组；组Ⅱ为EGFP空载体对照组；组Ⅲ为CTLA4-Ig基因转染组.观察大鼠存活时间及肾功能变化.结果 组Ⅰ移植肾存活时间8.17±1.17 d；组Ⅱ移植肾存活时间8.00±1.55 d；组Ⅲ存活时间31.33±6.77 d.组Ⅲ存活时间明显延长.转染组术后血清肌酐较同期对照组为低.结论 CTLA4-Ig基因局部转染供肾的基因治疗，可诱导异基因大鼠间的肾脏移植免疫耐受，延长肾脏移植物存活时间.

妊娠肝内胆汁淤积症对胎鼠应激反应能力的影响及其意义的初步探讨

王春芳1，陈晓军1，周光兴2，李笑天1

2007, 27(1):  48-52. 

摘要 ( 903 )   PDF (302KB) ( 592 )  

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目的 了解妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）是否给胎鼠的应激反应能力带来影响，以及这种影响在ICP导致围产期并发症的病理生理学变化中所起的作用.方法 通过给孕15 d大鼠连续5 d皮下注射乙炔雌二醇（2.5 mg/kg·d）的方法建立ICP模型，测定催产素作用下孕鼠和胎鼠促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮和硫酸脱氢表雄酮（DHEAS）的浓度变化.结果 催产素对母鼠和胎鼠的ACTH水平没有影响.在催产素作用下，ICP组母鼠和胎鼠皮质酮水平均显著低于对照组（489.16 μg/L±103.70 μg/L与1132.21±208.48 μg/L，P＜0.01；191.92±18.86 μg/L与334.59±27.62 μg/L，P0.01），而母鼠和胎鼠DHEAS水平均显著高于对照组（7.30±2.74 μg/L与1.63±0.30 μg/L，P＜0.05；1.21±0.37 μg/L与0.23±0.06 μg/L，P＜0.01）.病理检查发现，ICP组母鼠的肾上腺组织内皮质细胞弥漫性增生，增生多累及束状带和网状带，增生区内大片出血.胎鼠肾上腺皮质细胞也可见轻度增生.结论 在ICP大鼠动物模型中，发现胎鼠肾上腺功能受损，应激反应能力与正常胎鼠相比有下降.

实验用猕猴生物学指标的测定

徐龙建，唐贤丽，久田，陈夫英

2007, 27(1):  53-56. 

摘要 ( 947 )   PDF (48KB) ( 565 )  

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目的 提供实验用猕猴的正常生理学、血液学指标.方法 选取24只3～5岁猕猴，雌雄各半，分别测量其生理学指标（心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、骨髓象、体重、脏器重量、脏器系数、肠道长度）、血液学（血常规、凝血酶原时间）和血生化指标.结果 雌雄相比血常规：RBC、Hb、HCT有显著性差异（P＜0.05）；血生化：GLU有显著性差异（P＜0.05）；心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、骨髓象、肠道长度：雌雄之间无显著性差异（P＞0.05）；雌雄之间肺的脏器系数有显著性差异（P＜0.05），胸腺重量及脏器系数有极显著性差异（P＜0.01）.结论 不同性别猕猴的某些生理生化等指标有显著差异，进行各种生物医学实验时应注意.

湖南省2004～2006年实验动物病毒学质量监测结果分析

戴德芳，张红，刘运芝，李芳彩，黄凰

2007, 27(1):  57-59. 

摘要 ( 935 )   PDF (151KB) ( 639 )  

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目的 了解湖南省实验动物病毒学质量.方法 按GB14922.2-2001和GB14926-2001进行，在相关单位生产繁殖群以单纯随机抽样原则采样检测.结果 实验小鼠MHV和Sendai病毒出现抗体阳性并出现疫情；普通级兔出血症项目不合格；实验大鼠未检出相关病毒.结论 实验动物病毒学质量存在较大问题，应加强监测.

实验动物科学的教学改革与效果

汤球，孙伟，崔淑芳，袁卫

2007, 27(1):  60-62. 

摘要 ( 721 )   PDF (204KB) ( 898 )  

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本文以作者所在教研室实验动物科学教学改革实践经验为据，从改革的总体思路、教学内容、教学手段与方式、课程考核方式、实验教学等方面全面阐述了我室实验动物科学的教学改革的具体内容与措施，其效果是提高了实验动物科学的教学质量.

慢病毒载体法制备转基因动物研究进展

黄黎珍1，刘光泽2，顾为望1

2007, 27(1):  63-66. 

摘要 ( 1124 )   PDF (275KB) ( 575 )  

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慢病毒为逆转录病毒的一种，除了具有逆转录病毒的基本特性外，还具有感染静止细胞的特性.最近研究发现，应用慢病毒载体进行转基因动物制备，转基因的效率得到显著提高，使转基因动物研究领域产生突破性进展.本文介绍了慢病毒载体构建的基本原理、慢病毒载体制备转基因动物的常见方法及国内外研究的最新进展.

非人灵长类动物人工繁殖种群的遗传学控制

孙晓梅，叶尤松，仝品芬，代解杰

2007, 27(1):  67-70. 

摘要 ( 943 )   PDF (261KB) ( 899 )  

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遗传学控制在非人灵长类动物人工繁殖种群诸多管理环节具有至关重要的作用.本文紧密围绕遗传学控制的目标，从非人灵长类动物家系建立、家系确认，数量遗传性状及遗传多态性检测等方面综述了遗传学控制的实施要素.对非人灵长类动物种群实行遗传学控制，对于维持种群的遗传多样性，提高动物长期的生存力和繁殖率，满足医学生物学实验需要具有现实意义.