长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2013.03.008

实验动物与比较医学 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (3): 204-209.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2013.03.008

长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

卫礼, 王吉, 付瑞, 李晓波, 王淑菁, 岳秉飞, 贺争鸣

中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所、国家实验动物微生物、遗传检测中心,北京100050

收稿日期:2012-11-29 出版日期:2013-06-25 发布日期:2013-06-25
作者简介:卫礼(1960-), 女, 主管技师, 研究方向: 微生物学和免疫学, E-mail: wj_nd_jds@sina.com
基金资助:
实验动物新品种的种群建立与质量标准化研究(国家科技支撑计划项目: 2011BAI15B01)

Establishment and Preliminary Application of ELISA for Detecting Antibody to Mouse Hepatitis Virus in Mongolian Gerbil

WEI Li, WANG Ji, FU Rui, LI Xiao-bo, WANG Shu-jing, YUE Bing-fei, HE Zheng-ming

National Institutes for Food and Drug Control, National Center for Quality of Laboratory Animal, Beijing 100050, China

Received:2012-11-29 Online:2013-06-25 Published:2013-06-25

摘要/Abstract

摘要： 目的建立长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA检测方法。方法培养DBT细胞,接种MHV-V1、MHV- V3、MHV-JHM病毒,制备DBT正常抗原和MHV-V1、MHV- V3、MHV-JHM 三价特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验。结果正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.4 µg/ml、5 µg/ml和1∶5000; 正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为7.9%和6.8%, 批间平均变异系数分别为12.7%和11.2%; 检测灵敏度为1∶1280; 与小鼠仙台病毒(SV)、小鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。可用于沙鼠MHV抗体的检测。

关键词: 小鼠肝炎病毒, ELISA(MHV), 长爪沙鼠

Abstract: Objective To develop a ELISA method for determination of Mouse Hepatitis Virus antibody in Mongolian gerbils. Methods The cultured DBT cell were vaccinated with MHV-V1、MHV- V3、MHV-JHM virus for preparation the normal DBT antigen and special MHV antigen, the best working density of enzyme union and the normal or special antigen were titrated and the experiments of accuracy, sensitivity, stability and specificity were done. Result The best working density of normal, special antigen and the enzyme union is 0.4 µg/ml, 5ěg/ml and 1∶5000 respectively; The inter-assay coefficient of variation of normal antigen and special antigen is 7.9% and 6.8% respectively, the intra-assay average coefficient of variation is 12.7% and 9.7% respectively; The detection sensitivity is 1:1280; There is no cross-reactivity with Sendai virus (SV) and Lymphocytic Choriomeningitis virus (LCMV). The stability test shows the relative deviation is below 25%. Conclusion The ELISA method is good in duplication, stability, specificity, and sensitivity, as a result of which ELISA may be used in detecting the antibody to MHV in Mongolian gerbil .

Key words: Mouse hepatistis virus(MHV), ELISA, Mongolian gerbil

中图分类号:

Q95-33

卫礼, 王吉, 付瑞, 李晓波, 王淑菁, 岳秉飞, 贺争鸣. 长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与初步应用[J]. 实验动物与比较医学, 2013, 33(3): 204-209.

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