实验动物与比较医学 ›› 2018, Vol. 38 ›› Issue (1): 36-39.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.01.006
艾东旭1, 孙菲2, 李钰2, 法云智2, 孙兆增2, 李莲瑞3
AI Dong-xu1, SUN Fei2, Li Yu2, SUN Zhao-Zeng2, LI Lian-rui3
摘要： 目的 建立小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法,为小鼠的日常生产提供一种快速的监测手段。方法 提取小鼠结肠组织的总RNA,通过反转录反应合成第一链cDNA,以其为模板,利用MHV的4对特异性引物,进行PCR扩增。对PCR反应条件(包括引物、引物浓度、退火温度、模版浓度等)进行优化。对PCR扩增出的基因片段进行克隆测序,进一步确定扩增结果的特异性。结果 其中2对MHV引物具有良好的扩增性和特异性,利用这两对引物进行的PCR检测结果与ELISA检测结果相符。结论 MHV的RT-PCR检测方法具有良好的特异性,并且操作相对简单,可以作为小鼠生产过程中肝炎病毒发生的一种快速的监控(测)方法。
中图分类号:
