当期目录

2019年 第39卷 第6期    刊出日期：2019-12-25

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论著

小鼠品系、性别和被毛对可视化假病毒感染模型的影响

雷山, 刘强, 黄维金, 王佑春

2019, 39(6):  423-428.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.001

摘要 ( 374 )   PDF (1208KB) ( 424 )  

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目的 探索小鼠品系、性别和被毛对利用活体成像技术所建立可视化假病毒感染模型的影响。方法 将携带Fluc报告基因的马尔堡假病毒(pMARV-Fluc)经腹腔分别感染C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠,利用活体成像技术分析脱毛前后活体化学发光水平的差异。同时,利用埃博拉假病毒(pEBOV-Fluc)经腹腔途径感染不同性别的C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠,并对峰值发光水平和动态变化过程进行比较分析。结果 BALB/c小鼠的白色被毛对发光水平的遮挡比例为32%, C57BL/6J小鼠的黑色被毛对发光水平的遮挡比例达到82%, 差异具有统计学意义(P<0.001)。相比雌性动物而言,雄性动物活体发光水平更强且一致性更好(P<0.05)。BALB/c小鼠发光峰值水平显著高于C57BL/6J(P<0.05),并表现出不同的动态变化过程,峰值时间点分别为4 d和6 d。结论 小鼠品系、性别和被毛均对假病毒感染模型有影响。



C57BL/6J、129/SvJ及其杂交一代小鼠的行为学比较研究

万颖寒, 沈如凌, 王珏, 龚慧, 李俊, 董茹, 费俭

2019, 39(6):  429-436.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.002

摘要 ( 1008 )   PDF (1081KB) ( 612 )  

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目的 比较C57BL/6J和129/SvJ两种不同遗传背景及其杂交一代(F1)在行为学表型上的差异。方法 将C57BL/6J小鼠和129/SvJ小鼠交配繁育,得到两种F1小鼠129B6F1和B6129F1, 连同C57BL/6J和129/SvJ按照不同性别分为8组,每组小鼠数量n≥12,进行旷场活动、悬尾、水迷宫、被动回避、热板实验等行为学研究,分别从焦虑、抑郁、学习记忆、热痛四个方面比较C57BL/6J和129/SvJ小鼠及F1小鼠的行为表现。结果 在旷场活动中,与129/SvJ比较,F1在外周、边缘的活动差异显著(P<0.01); 在悬尾活动中,F1的行为没有显著性差异; 在水迷宫和被动回避活动中,与C57BL/6J比较,F1寻找到平台的潜伏期和进入暗箱的潜伏期差异显著(P<0.05)。结论 F1的不同行为表型受到亲代的不同遗传背景影响。



脑心通胶囊对氯胺酮成瘾大鼠脑细胞损伤的保护作用

柳小波, 杨梅, 宋佳

2019, 39(6):  437-442.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.003

摘要 ( 447 )   PDF (935KB) ( 392 )  

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目的 探讨脑心通胶囊对氯胺酮成瘾大鼠脑细胞损伤的保护作用。方法 将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、脑心通胶囊高、中、低剂量组和阳性对照组各10只。模型组、脑心通胶囊组和阳性对照组经腹腔注射浓度为50 mg/mL的盐酸氯胺酮注射液(10 mg/kg),脑心通胶囊高、中、低剂量组灌胃脑心通胶囊(500 mg/kg、250 mg/kg和100 mg/kg),阳性对照组腹腔注射l-四氢巴马汀(20 mg/kg),1次/d,连续7 d。实验前后测试每只大鼠的条件位置偏爱(CPP),实验后,采用免疫组织化学检测脑组织即刻早期基因(c-fos)的表达,采用Western blotting测定脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)蛋白的表达,HE染色观察脑组织病灶的病理变化。结果 与对照组相比,模型组、脑心通胶囊高、中、低剂量组和阳性对照组大鼠CPP值明显升高(P<0.05),脑组织c-fos基因和Caspase-3、Bax蛋白表达量明显升高(P<0.05),Bcl-2表达量明显降低(P<0.05); 与模型组相比,脑心通胶囊高、中、剂量组和阳性对照组大鼠CPP值明显降低(P<0.05),脑组织c-fos基因和Caspase-3、Bax蛋白表达量明显下降(P<0.05),Bcl-2表达量明显升高(P<0.05),HE染色显示脑细胞病变程度减轻。结论 脑心通胶囊可能通过调节脑组织的细胞凋亡,保护氯胺酮成瘾大鼠的脑细胞损伤。



黄芪多糖提高脑卒中后抑郁模型大鼠学习能力的实验观察

王元元, 邓卫平, 李晓强, 彭吉霞

2019, 39(6):  443-448.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.004

摘要 ( 357 )   PDF (486KB) ( 463 )  

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目的 观察黄芪多糖对脑卒中后抑郁 (PSD) 模型大鼠学习记忆能力及抑郁样行为的影响并分析机制。方法 Wistar大鼠48只,随机均分为假手术组、抑郁模型组、黄芪多糖低剂量组(200 mg/kg)和高剂量组(400 mg/kg)(n=12)。除假手术组外均构建PSD模型。低剂量组和高剂量组大鼠灌胃给予相应剂量的黄芪多糖,抑郁模型组和假手术组给予相同体积的生理盐水对照,实验时间4 周。采用糖水摄取实验及Zero水迷宫分析系统评价大鼠抑郁行为; 膜片钳技术记录海马CA1区自发性动作电位 (AP) 和群峰电位(PS)以评价黄芪多糖对PSD模型大鼠学习能力及行为学的影响; 采用双抗体夹心ELISA法检测血清细胞因子白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)含量; Western blotting 检测海马CA1区组织中核转录因子-κB (NF-κB)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ) 蛋白表达,实时定量-PCR检测NF-κB和PPAR-γ基因表达。结果 黄芪多糖低剂量组和高剂量组大鼠糖水摄取量明显增多、逃避潜伏期缩短,越台次数增多; 大鼠CA1区AP和PS膜电压及血清IL-1β和IL-6均明显降低,CA1区NF-κB蛋白和NF-κB mRNA低表达,而PPAR-γ蛋白和PPAR-γ mRNA明显高表达,与抑郁模型组比差异有统计学意义(P<0.05),且两组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 黄芪多糖可减轻PSD模型大鼠抑郁样行为,提高学习记忆能力,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路的激活而降低受其调控的细胞因子IL-1β和IL-6释放、减轻大脑中动脉闭塞(MCAO)后创伤性应激及炎症反应并提高CA1区膜稳定性有关。

不同日龄新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎模型建立

潘兆军, 田兆方, 武荣

2019, 39(6):  449-453.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.005

摘要 ( 391 )   PDF (1363KB) ( 460 )  

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目的 建立并比较二种不同日龄新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型。方法 出生2 h内及出生48 h SD大鼠各24只,随机分为人工喂养组(A、B组)、人工喂养+脂多糖（LPS）组(C、D组）和对照组(E、F组）,即出生2 h的A、C、E组及48 h的B、D、F组。A、B、C、D组均予以缺氧+冷刺激每日2次; C、D组每日LPS灌胃1次; 对照组仅母鼠喂养。实验84 h后空腹处死,取出回盲部近端肠管1 cm,HE染色后观察肠组织形态学,进行病理评分。结果 实验组大鼠相继出现不同程度排黄绿色黏液稀便、腹胀、胃潴留、呕吐、嗜睡,活动度下降,并逐渐加重,体质量增长缓慢;对照组新生大鼠纳乳好,生长发育良好。A、B、C、D组组织学病理积分和NEC发生率均明显高于对照组。结论 新生SD大鼠出生2 h内及出生48 h在人工灌胃喂养、低体温和缺氧条件下可诱导出符合NEC临床表现和组织学特征的大鼠模型,LPS灌胃可加重临床表现和组织学病理改变。



不同浓度含铬垫料对小鼠血液学及脏器的毒性观察

贾欢欢, 曾业文, 罗挺, 龚宝勇, 麦冬梅, 潘迎春, 赵维波

2019, 39(6):  454-461.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.006

摘要 ( 413 )   PDF (2134KB) ( 568 )  

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目的 评价不同浓度含铬垫料对BALB/c裸小鼠及KM小鼠血液学及脏器的毒性影响。方法 制备稳定的不同浓度含铬垫料,48只BALB/c裸小鼠及48只KM小鼠分别被随机分为4组,每组12只,雌雄各半。对照组垫料铬含量为(2.30±1.12) mg/kg、低、中和高剂量组垫料铬含量分别为(15.50±0.71) mg/kg、(71.50±3.54) mg/kg和(347.00±35.36) mg/kg。小鼠分别于不同垫料中饲养15周,每周更换1次垫料,每日对动物进行一般观察,于饲养15周采血解剖,检测血常规、血生化、脏器系数及脏器病理等。结果 BALB/c裸小鼠及KM小鼠饲养于不同铬含量垫料中15周,大体观察未见异常,动物均未见死亡,大体解剖均未见异常;与对照组比较,血常规指标及脏器系数均未见明显差异;血液生化检查发现BALB/c裸小鼠低、中、高剂量组血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)及 尿素氮(BUN)水平均显著升高,中、高剂量组碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(Crea)水平显著升高,而低、高剂量组甘油三脂(TG)水平显著下降,KM小鼠血液生化指标均未见明显差异;病理检查发现,2种小鼠各剂量组均出现不同程度的肝脏局灶性炎细胞浸润、肝细胞水肿、肾脏炎性细胞浸润、睾丸曲细精管萎缩及卵巢黄体数量减少等改变。结论 本实验垫料中六价铬含量达到(15.50±0.71) mg/kg及以上时可导致BALB/c裸小鼠及KM小鼠出现不同程度的肝、肾、睾丸及卵巢毒性。



斑马鱼甲状腺肿大病例分析

李英娘, 戴玮, 盛健

2019, 39(6):  462-466.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.007

摘要 ( 749 )   PDF (1108KB) ( 492 )  

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目的 研究斑马鱼甲状腺肿大疾病的原因,进一步探究疾病的发生是否由于缺碘引起。方法 取斑马鱼下颚部肿大组织,对病变组织进行HE染色和透射电子显微镜观察。同时设立了有碘饲养和无碘饲养组,在不同时期检测甲状腺相关的5个基因表达情况。结果 根据HE染色,诊断该疾病为甲状腺肿大;通过透射电子显微镜观察,发现病变组织存在线粒体肿大和溶酶体增多的现象。受精后7 d (7dpf) 胚胎的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)基因表达,有碘组显著高于无碘组(P<0.05)。结论 缺碘会引起斑马鱼甲状腺肿大及CRF基因表达量降低。



裸鼹鼠研究专题

裸鼹鼠海马神经元纯化模型建立及其低氧耐受特性机制的初步研究

杨文静, 李煜, 冯延, 李壘辰, 许月榕, 刘攀, 林丽芳, 孙伟, 崔淑芳

2019, 39(6):  467-472.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.008

摘要 ( 319 )   PDF (920KB) ( 404 )  

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目的 建立一种裸鼹鼠海马神经元的纯化培养方法,并初步探讨其低氧耐受特性。方法 收集妊娠60~65 d裸鼹鼠胚胎海马组织内的细胞,利用含有Neurobasal+2%B27+10 μmol/L 5-氟尿嘧啶的培养基进行神经元纯化,海马神经元维持培养基为含有体积分数2%B27的Neurobasal培养基。体外贴壁培养6~7 d,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态,利用神经元特异核蛋白(NeuN) 抗体进行鉴定。利用CCK8试剂盒进行海马神经元低氧耐受功能的研究(低氧浓度为8%)。利用QPCR检测海马神经元中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在低氧情况下的表达水平。结果 通过本方法获得的海马神经元具有典型的神经元形态特征,免疫细胞化学染色显示纯化所得的细胞均呈NeuN阳性,低氧条件下细胞存活率、轴突长度显著大于常氧情况下的数值,低氧情况下裸鼹鼠海马神经元中HIF1α显著高于常氧情况,上述结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 建立了一种简单实用的体外分离培养裸鼹鼠海马神经元的方法,初步揭示了裸鼹鼠海马神经元低氧耐受特性,并且该特性与裸鼹鼠海马神经元于低氧情况下高表达HIF1α有关。



Poly I:C刺激对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞PKR/eIF2α信号通路影响的比较研究

林丽芳, 张成财, 李煜, 张倩倩, 陈超, 李壘辰, 杨文静, 李莉, 崔淑芳

2019, 39(6):  473-478.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.009

摘要 ( 377 )   PDF (1141KB) ( 484 )  

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目的 比较研究聚肌胞苷酸(Poly I:C)对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞双链RNA依赖性蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译起始因子2α(EIF2α)信号通路的影响。方法 分别提取裸鼹鼠和C57BL/6J小鼠巨噬细胞,随机分成对照组、Poly I:C给药组、2-氨基嘌呤(2-AP)给药组、Poly I:C+2-AP给药组。给药后,蛋白印迹检测细胞中磷酸化PKR(Pho-PKR)、PKR、磷酸化EIF2α(Pho-EIF2α)、EIF2α、Caspase-8蛋白的表达情况。结果 Poly I:C给药后,小鼠巨噬细胞的PKR和eIF2α磷酸化水平显著降低(P<0.01), 而裸鼹鼠相反则显著升高(P<0.01), 表明Poly I:C能抑制小鼠的PKR活性,而裸鼹鼠的PKR活性被显著激活;Poly I:C干预的基础上通过2-AP抑制PKR活性,结果 显示,2-AP给药后下调了小鼠和裸鼹鼠PKR和磷酸化PKR的表达(P<0.01),尤其是裸鼹鼠的PKR,2-AP给药后显著地抑制裸鼹鼠PKR的表达;单独2-AP给药后小鼠巨噬细胞的活性PKR和活性eIF2α比例显著下降(P<0.01),裸鼹鼠巨噬细胞的活性PKR比例也显著下降(P<0.01); 通过2-AP抑制PKR活性后,裸鼹鼠细胞的Caspase-8蛋白表达水平显著下降,但小鼠细胞的表达却无显著差异。结论 与小鼠比较,裸鼹鼠细胞对Poly I:C刺激具有较高的抗性;细胞的PKR对2-AP的敏感性更强;PKR活性对Caspase-8表达有促进作用。



裸鼹鼠与小鼠抗辐射能力比较研究

陈超, 丛薇, 杨文静, 崔淑芳

2019, 39(6):  479-483.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.010

摘要 ( 562 )   PDF (936KB) ( 545 )  

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目的 通过不同剂量和不同频率的γ射线照射裸鼹鼠和小鼠及两者的皮肤成纤维细胞,比较两者的抗辐射能力。方法 选择成年小鼠(8周龄)、成年裸鼹鼠(52周龄),分别使用⁶⁰Coγ射线分多次小剂量或一次性高剂量全身照射,分析两者的基本生命体征、外周血淋巴细胞变化及主要脏器组织病理变化。选择裸鼹鼠和小鼠的皮肤成纤维细胞,进行不同剂量一次性照射,检测两者的氧损伤。结果 小鼠在6 Gy一次性照射下,30 d存活率为30%;外周血辅助性T淋巴细胞和杀伤性淋巴细胞比值(CD4+/CD8+)、树突状细胞(DC)百分比无显著变化;而裸鼹鼠30 d存活率为100%,辐照后4 d外周血CD4+/CD8+显著升高、DC百分比呈显著先升高后回落趋势。小剂量多次辐照后,小鼠骨髓、胸腺、肝脾等主要组织器官均出现不同程度病变,裸鼹鼠相应器官则无明显异常。裸鼹鼠和小鼠的皮肤成纤维细胞在6 Gy剂量辐照后细胞活性氧含量无显著变化。而在50 Gy剂量照射下,裸鼹鼠皮肤成纤维细胞的氧损伤显著低于小鼠皮肤成纤维细胞。结论 裸鼹鼠对于电离辐射具有天然的抗性,其生命体征、组织器官的形态与功能都没有因外部辐射因素刺激而发生明显的改变,机体免疫水平呈激活状态。裸鼹鼠的皮肤成纤维细胞同样具有抗电离辐射特性。



裸鼹鼠抗化学诱癌因素特性的研究

陈超, 丛薇, 杨文静, 崔淑芳

2019, 39(6):  484-488.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.011

摘要 ( 306 )   PDF (1102KB) ( 420 )  

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目的 利用化学致癌物对裸鼹鼠和小鼠分别进行诱导,探讨裸鼹鼠抗化学诱癌因素的特性。方法 成年裸鼹鼠(52周龄)与成年小鼠(8周龄)分别使用乌拉坦、亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱导3个月。观察乌拉坦诱导后肿瘤发生情况,体质量和白细胞计数变化;观察OAAT诱导后主要脏器组织病理变化。结果 小鼠在乌拉坦诱导3个月后开始发生肺肿瘤,诱导结束后2个月肿瘤发生率大于50%,平均体质量及白细胞含量显著下降;而裸鼹鼠在诱导结束后2个月仍然保持健康的生理状态,平均体质量及白细胞指标无显著变化。OAAT诱导3个月后,小鼠的胸腺、脾脏、肝脏、小肠及骨髓均可见明显的病理改变,而裸鼹鼠相应器官与组织未见异常。结论 裸鼹鼠对于化学致癌因子具有天然的抗性,其生活状态、生化指标、组织器官的形态与功能在化学诱癌药物刺激下均未发生明显的改变。



经验交流

实验动物屏障设施常用的6种消毒剂

潘明明, 陈枉枉, 王艳, 王婧, 周正宇

2019, 39(6):  489-495.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.012

摘要 ( 688 )   PDF (516KB) ( 573 )  

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控制实验动物屏障设施病原微生物不仅关乎实验动物质量和实验结果的可信度,更关系到人员健康和环境安全。在实验动物屏障设施的运行过程中,人员和物品的进出等可能带入病原微生物,因此屏障设施的日常卫生消毒至关重要。本文选取实验动物屏障设施中常用的6种消毒剂,对其性质、作用机理、毒性、职业健康安全和应用效果等方面进行综述,为实验动物屏障设施选取合理有效的消毒剂提供参考。

医学院校实验动物学课程改革的几点建议

肖春兰, 盛雅洁, 王禹斌, 周慧英, 周正宇

2019, 39(6):  496-498.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.013

摘要 ( 526 )   PDF (348KB) ( 455 )  

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生命科学的研究离不开实验动物和动物实验。本文基于医学院校实验动物学课程教学的现状,提出了对医学院校实验动物学课程改革的几点建议。在课程设计方面,提出了应确立理论与实践并重的指导思想,加强实验课的占比,提高学生动手能力;应提高对动物福利的认知;应加强关于基因编辑、免疫缺陷模型等前沿内容的传授。在教学方面,提出了应加强因材施教、因人施教,合理安排教学内容,丰富教学手段,提高教学效果。在学科建设方面,提出了应建立实验动物学教师的学习、培训、进修制度,建立一支专业化的实验动物学教学队伍,同时应编写高水平实验动物科学教材,统一课程标准,提高教学质量。

综述

人源性异种移植模型在胰腺癌个体化治疗研究中的应用

胡斌权, 储海盟, 师长宏

2019, 39(6):  499-504.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.014

摘要 ( 376 )   PDF (435KB) ( 443 )  

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本文介绍了胰腺癌人源性异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型的基本特征、建模方法及模型应用中存在的问题,阐述了PDX模型在胰腺癌个体化药物筛选和耐药机制研究中的可行性。常规的胰腺癌标准化疗方案及联合用药疗效低下,因此,需要关注靶向重塑胰腺癌微环境抗肿瘤研究的重要性以期为研究者们提供新的思路,合理地使用该模型开展胰腺癌的研究,为胰腺癌患者提供更加高效的个体化治疗方案。