实验动物与比较医学 ›› 2020, Vol. 40 ›› Issue (6): 477-482.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.06.003
温福利
WEN Fuli
摘要: 目的 建立兔斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai,E.stiedai)感染模型和巢式PCR诊断方法。方法 利用剖检、显微镜观察、血液生化和病理组织学检查等方法对建立的兔E.stiedai模型进行鉴定。通过收集卵囊,提取E.stiedai的DNA,设计特异性引物,建立E.stiedai巢式PCR检测方法。结果 临床剖检:兔腹围明显增大,解剖见肝脏肿大,肝脏表面和实质布满白色及淡黄色结节,胆囊和胆管肿大,胆汁呈淡黄色。显微镜观察:虫卵大小为(31.72~38.43)?m×(18.10~22.69)?m。血液生化检查:球蛋白(GLOB)指标偏高,肌酐(CREA)和碱性磷酸酶(ALKP)指标偏低,其余检测指标均在参考值范围内。病理组织学检查:肝组织和胆管中见大量粉红色E.stiedai虫卵。巢式PCR检查:最低检测限为1个卵囊DNA样本和1.14×103拷贝数质粒,阴性对照和空白对照均未出现条带,重复性实验变异性系数<5%。结论 成功构建兔E.stiedai感染模型,建立的巢式PCR诊断方法可扩增出E. stiedai的特异片段,敏感性强,重复性好。
中图分类号: