当期目录

2016年 第36卷 第1期    刊出日期：2016-02-25

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论著

小鼠感染大肠杆菌O127:H6肠炎模型的建立及受激活调节正常T细胞表达和分泌活性因子的表达

范君文, 隋丽华, 许琴, 刘一, 刘慧芳, 孙兆增, 闫亮

2016, 36(1):  1-5.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.001

摘要 ( 215 )   PDF (1399KB) ( 201 )  

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目的 探讨大肠杆菌O127:H6 (Escherichia coli O127:H6)感染BALB/c小鼠建立肠炎模型及其受激活调节正常T细胞表达和分泌活性因子(RANTES)与炎症反应的相关性。方法 通过不同剂量大肠杆菌O127:H6灌胃的方式,建立肠炎小鼠模型(实验组),灌胃生理盐水为对照组。取小鼠空肠标本,石蜡包埋,HE染色,观察病理变化; 采用荧光定量PCR的方法,测定不同剂量组感染小鼠空肠组织的RANTES表达情况。结果 成功建立了肠炎性小鼠模型,实验组与对照组比较,空肠有明显的炎性病理变化; 荧光定量PCR结果表明实验组RANTES表达量明显高于对照组。结论 通过灌胃大肠杆菌 O127:H6的方式可以建立肠炎小鼠模型,其空肠部位具有明显的病理变化; RANTES 表达量的变化可以作为评价小鼠肠炎的指标之一。



醋酸甲羟孕酮暴露致食蚊鱼的雄激素效应

金子越, 方展强

2016, 36(1):  6-7.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.002

摘要 ( 223 )   PDF (531KB) ( 198 )  

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目的 探讨人工合成孕激素(醋酸甲羟孕酮,MPA)暴露对雌性食蚊鱼(Gambusia affinis)的雄激素效应。方法 将成年雌性食蚊鱼随机分为4组, 包括对照组和40 ng/L(低密度组)、200 ng/L (中密度组)和1 000 ng/L(高密度组)等3个MPA实验暴露组,并设置平行组。持续暴露28 d后观察与测定食蚊鱼的体长(BL)、体质量(BW)、身体健康指数(CF)、臀鳍第3鳍条分节数(FJ)、第4、5、6鳍条长度(FL)变化和第14、15、16椎体脉棘的形态变化等5项指标,并在7 d、14 d、21 d、28 d测定了卵黄蛋白原基因(VTG〈)、雄激素受体基因(AR〈)和细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19〈) mRNA表达水平的变化。结果 食蚊鱼经MPA暴露28 d后,与对照组相比, 200 ng/L和1 000 ng/L实验组食蚊鱼的BL、BW和CF均无明显变化(分别P>0.05)。臀鳍第3鳍条分节数和第6鳍条长度变化不明显(P>0.05),但第4、5鳍条的长度显著增加(P<0.01)。暴露在200 ng/L和1 000 ng/L MPA中、高浓度组食蚊鱼的第14椎体脉棘的总长(L)、尾部尖端到脊的高度(D)值, 第15椎体脉棘的投影长(P)、P:D值和第16椎体脉棘的P、L:D、P:D值分别呈现显著性变化(P<0.05或P<0.01),椎体脉棘伸长,且与脊椎骨接近垂直,显示形态雄性化效应。与对照组相比,低浓度组(40 ng/L MPA) VTG〈, CYP19〈基因的表达量上升(P<0.01),而AR〈表达被抑制(P<0.05); 中浓度组VTG〈, CYP19〈, AR〈基因的表达量都显著上升(P<0.01); 高浓度组CYP19〈, AR〈基因的表达量显著上升(P<0.01),而VTG〈的表达量则被抑制(P<0.01)。结论 MPA暴露致雌性食蚊鱼骨骼出现形态雄性化,目标基因表达水平的变化结果证明MPA对食蚊鱼具雄激素效应,表明MPA是一种具有雄激素效应的孕激素。



驯养繁殖树鼩主要消化腺的组织学观察

匡德宣, 王文广, 孙晓梅, 黄晓云, 陆彩霞, 罕园园, 仝品芬, 代解杰

2016, 36(1):  13-18.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.003

摘要 ( 273 )   PDF (1596KB) ( 283 )  

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目的 了解树鼩主要消化腺的组织学结构特征,建立树鼩正常的消化腺组织学图谱。方法 采用常规组织处理、制片、HE 染色及显微镜技术对人工驯养繁殖仔一代树鼩腮腺、颌下腺、舌下腺、胰腺和肝脏进行了组织学观察。结果 (1)腮腺为纯浆液性腺泡,闰管明显,管壁由单层低立方形上皮细胞组成,官腔充满分泌物。(2)颌下腺为混合性腺体,以浆液性腺泡为主, 分泌管较长。(3)舌下腺是以黏液性腺泡为主的混合腺,含有少量闰管。(4)肝脏表面为一薄层致密结缔组织被膜,肝实质为多个分界不明显的肝小叶,肝小叶中央为中央静脉。肝细胞呈多边形,核大而圆,位于细胞中央,多数为单核,少数为双核,细胞质呈红色,胞质内有空泡和小腔隙。汇管区小叶间动脉、小叶间静脉及小叶间胆管结构较为明显。(5)胰腺表面为一层疏松结缔组织被膜,胰腺实质由外分泌部和内分泌部组成。外分泌部包含腺泡和导管,腺泡由浆液性腺细胞组成,导管由闰管、小叶内导管、小叶间导管、叶间导管和胰管组成。内分泌部又称为胰岛,是一些大小不等的细胞团和细胞索,不规则地散布于外分泌部的腺泡之间,胞质染色较外分泌部浅。结论 树鼩消化腺在组织形态学上接近于灵长类动物,可以为研究树鼩消化腺的功能和病变,以及建立人类相关疾病的动物模型提供组织学依据。



前肢畸形WHBE兔血清钙、磷、碱性磷酸酶含量检测及骨密度分析

陈方明, 徐剑钦, 朱科燕, 杨钦钦, 陈民利

2016, 36(1):  19-23.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.004

摘要 ( 209 )   PDF (5122KB) ( 238 )  

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目的 观察前肢畸形WHBE (FMWHBE) 兔前肢生理、病理特点和血清钙(Ca)、磷(P)含量等生化特性,探讨前肢畸形的可能成因及作为骨质疏松等骨生物力学研究模型的可能性。方法 分别选取1、2、3、4月龄FMWHBE兔、WHBE兔和日本大耳白(JPW)兔,每个月龄阶段各6只。检测所有实验兔血清钙(Ca)、磷(P)和碱性磷酸酶(ALP)含量; 用小动物成像系统X射线成像后测量前肢肱骨、桡骨、尺骨骨密度(BMD),并经HE染色后,进行病理学检查。结果 与JPW兔比较,1、2、4月龄FMWHBE兔血清Ca含量显著降低(P<0.05或P<0.01),4月龄FMWHBE兔血清P含量显著升高(P<0.05)。FMWHBE兔血清ALP水平显著低于WHBE兔和JPW兔组(P<0.05或P<0.01); 与同期正常WHBE兔比较,1~4月龄FMWHBE兔肱骨和2、3、4月龄桡骨及1、2月龄FMWHBE兔尺骨BMD均显著降低(P<0.05或P<0.01),与同期正常JPW兔比较,1、3月龄肱骨、桡骨和1、2月龄尺骨BMD均显著降低(P<0.05或P<0.01); 病理学检查结果显示,与WHBE兔JPW兔比较,FMWHBE兔前肢肱骨、桡骨、尺骨骨皮质较薄,局部骨组织表面成骨细胞较少,未见整齐排列成一层,骨小管数量较少,新生骨组织较少。结论 FMWHBE兔前肢畸形可能与较低的血Ca和ALP水平导致BMD的降低以及成骨细胞减少、新生骨较少有关。



单核苷酸多态性(SNP)在近交系小鼠遗传检测中的应用

赵丽亚, 张蓉, 赵莹, 邢正弘, 陈国强

2016, 36(1):  24-31.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.005

摘要 ( 235 )   PDF (592KB) ( 347 )  

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目的 利用单核苷酸多态性(SNP)位点构建多重聚合酶链反应和链接酶反应(PCR-LDR)方案,为近交系小鼠的遗传检测提供一种快速、简便的方法。方法 在SNP公共数据库中挑选51个SNP位点,该51个位点分布于每条常染色体和性染色体,共分为5组,进行多重PCR-LDR方案构建,并将该方案作为遗传质量检测方法对采集的7个近交系样本进行检测。结果 在送检的7个近交系小鼠样本中,纯合度都为100%,相同来源相同品系小鼠的遗传背景一致,但在不同单位的近交系小鼠中,某些SNP位点有差异,CBA/Ca/BKl和CBA/JSlac在a9、a10、b5、b9、c1、c12、e1、e2位点的遗传检测结果不同,C57BL/6/BKl和C57BL/6JSlac在c7、c10位点的遗传检测结果不同。另外,两家公司各有5个位点在所有品系中基因型相同,因此有效位点数各为46个。结论 构建的多重PCR-LDR方案能有效对两家动物生产单位的近交系小鼠进行检测,可用于常见近交系小鼠快速、高通量的基因分型,有利于大规模遗传质量检测和品系鉴定。



新西兰兔脏器参数、血液指标、心率、心室压的性别间比较

张晓玉, 张修彦, 詹纯列

2016, 36(1):  32-36.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.006

摘要 ( 379 )   PDF (417KB) ( 208 )  

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目的 测定并比较普通级新西兰兔脏器参数、血液指标、心率及心室压。方法 取70~80日龄普通级新西兰兔60只,雌雄各半,饲养一周后,精确称量体质量后,采集动脉血用于测定血液生理生化及血气指标; 呼吸支持情况下开胸进行心室压测定; 解剖取各脏器并称量。结果 性别间比较: 胸腺、肺的脏器系数差异显著(P<0.05或P<0.01); 血液指标中,嗜酸性细胞百分率、中性粒细胞百分率、单核细胞百分率、淋巴细胞百分率、中性粒细胞、单核细胞、红细胞平均体积、平均血红蛋白量、血清白/球蛋白、血糖、补体C3、谷氨酰转肽酶、pH值、pH温度校正、血氧饱和度差异均显著(P<0.05或P<0.01); 左心室舒张压、右心室舒张压差异有显著性意义(P<0.05)。结论 普通级新西兰兔部分脏器系数,血液生理生化、血气以及心室压指标性别间存在差异,用于相关实验研究时应注意。

不同日龄新西兰白兔血液学特性研究

恽时锋, 董敏, 赵志刚, 陈莉, 刘彪, 田小芸

2016, 36(1):  37-40.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.007

摘要 ( 185 )   PDF (306KB) ( 214 )  

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目的 探讨不同日龄封闭群新西兰白兔的血液学特性。方法 采集不同年龄、不同性别新西兰白兔的血液样品,应用全自动血细胞仪测定160只新西兰白兔的血液学指标。结果 各年龄段新西兰白兔血液学指标性别间无显著差异(P>0.05),不同年龄段之间除单核细胞总数差异不显著(P>0.05),其它指标有显著差异(P<0.05)。结论 本院培育自繁的实验型封闭群新西兰白兔生物学特性较稳定,个体间差异较小,初步建立了不同日龄新西兰白兔血液生理指标正常值,为新西兰白兔的广泛使用提供基础数据。

环境丰富对SD大鼠生长和血液学指标的影响

刘帅, 李军延, 陈巍, 张奇, 吕赛

2016, 36(1):  41-47.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.008

摘要 ( 242 )   PDF (570KB) ( 239 )  

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目的 探讨环境丰富长期作用对于SD大鼠生长、摄食、血常规及血生化指标的影响。方法 48只3周龄SPF级SD大鼠,随机分为2组,环境丰富组用磨牙棒和木丝筑巢材料进行环境丰富。试验期间测量体质量和摄食量,32周龄时解剖采腹主动脉血进行血常规和血生化检测,并测量主要脏器重量。结果 与对照组相比,环境丰富组雄性大鼠10~19周龄的摄食量显著增加,体质量增加但不显著,血清总蛋白、白蛋白和胆固醇显著升高。雌性大鼠在上述指标无显著差异。主要脏器方面,环境丰富组雌性心脏和肝脏重量显著高于对照组,雄性附睾重量显著高于对照组,其他脏器无显著差异。环境丰富组雌性大鼠红细胞、血红蛋白、血小板指标显著升高,而雄性大鼠在上述指标间则无显著差异。结论 环境丰富对SD大鼠生长和部分血液学指标有一点程度影响,实验设计时应慎重考虑环境丰富条件的选择。



经验交流

辐照与高压蒸汽灭菌饲料对SD大鼠妊娠及胎仔发育的影响

赵康涛, 陈冠敏, 林蔚, 陈润, 黄宗锈, 林健

2016, 36(1):  48-50.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.009

摘要 ( 181 )   PDF (356KB) ( 204 )  

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目的 了解不同灭菌处理饲料对SD大鼠妊娠及胎仔发育的影响。方法 离乳SD大鼠随机分为辐照和高压蒸汽灭菌饲料组,饲养2个月后按1:1比例雌雄同笼交配,分别于0 d、7 d、12 d、16 d、20 d称妊娠鼠体质量,并于20 d时采血后处死妊娠鼠,解剖,取完整子宫称重后取出胎仔, 对胎仔称重, 量身长、尾长,观察胎仔外观、内脏及骨骼发育; 雄性大鼠于试验结束时称体质量,取睾丸及附睾称重,计算脏器系数,测血清睾丸酮含量。结果 两种饲料对妊娠鼠各阶段体质量无明显影响(P>0.05),仔鼠活胎率, 身长、尾长无差异(P>0.05), 骨骼及内脏发育亦无明显差异(P>0.05); 辐照饲料组交配成功率高于高压饲料组(P<0.05), 但两组雄鼠睾酮含量无明显差别(P>0.05), 雄性大鼠睾丸及附睾系数亦无差异(P>0.05)。结论 两种不同灭菌处理饲料对妊娠大鼠及其胎仔发育影响无明显差异,均无明显致畸作用,但对亲代大鼠早期性兴奋影响可能有区别。

RFID技术在实验动物行业中的应用的探讨

陈懿斐, 魏晓锋, 高诚, 史光华

2016, 36(1):  51-53.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.010

摘要 ( 141 )   PDF (313KB) ( 236 )  

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简述了射频识别(RFID)的基本概念及其应用的发展过程,同时根据实验动物的生物学特性、数据采集的需求特性,从RFID技术在实验动物领域的应用概况、应用的意义及优势、应用发展的方向等方面综述了RFID在实验动物领域的应用前景,表明随着RFID技术的不断发展,必将提高实验动物的管理水平和福利水平。

大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇直接测定与计算结果的比较

李红, 施嘉琛, 高文晖

2016, 36(1):  54-56.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.011

摘要 ( 179 )   PDF (360KB) ( 215 )  

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目的 比较直接测定与公式计算大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)结果是否存在差异。方法 用直接一步法检测大鼠血清中LDL-C; 根据Friedewald公式,通过总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量计算LDL-C,并将两组数据进行比较。结果 直接测定大鼠血清和公式计算LDL-C结果差别无统计学意义(P>0.05), 两种结果相关性良好(相关系数为0.976 0)。结论 在进行相关动物实验时,因血样采集或实验室检测条件有限时,可使用Friedewald公式计算LDL-C。

把握改革机遇,建立严谨的实验动物技术标准体系

贺争鸣, 李根平, 赵德明, 孙德明, 刘文菊, 巩薇

2016, 36(1):  57-60.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.012

摘要 ( 130 )   PDF (412KB) ( 197 )  

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在深刻领会《深化标准化工作改革方案》提出的构建新型标准化管理体制和新型标准体系、推进团体标准试点工作等总体要求的基础上,阐述和分析我国实验动物技术标准体系的建设及存在的主要问题,对建立实验动物标准评价工作机制,以及明确行业协会和标委会的定位和作用、提高标准的适用性、推进地方团体标准的制定、逐步推动地方标准走向国家层面仍至国际舞台等进行了论述。

浅谈实验动物饲养管理和使用机构如何避免“自我管理负担”

陆嘉琦, 李宁, 葛立军, 刘吉宏, 朱凤仙, 王建飞

2016, 36(1):  61-65.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.013

摘要 ( 242 )   PDF (663KB) ( 245 )  

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任何饲养管理和使用实验动物的机构都会尽可能地加强管理和要求以符合不同国家、省市或当地的相关法律法规及行业标准。欧美等地机构在建立和实施“实验动物饲养管理和使用计划(简称计划)”时往往试图将不合规的风险降至最低,从一方面来看,这加速了国际实验动物科学行业的发展和标准化;但是,从另一方面上说,往往会导致整个“计划”的冗余和表面化,增加机构的运行成本和预算,造成“自我管理负担”。本文就这些机构的“自我管理负担”的主要来源,如何评估机构存在“自我管理负担”以及如何避免“自我管理负担” 等内容分别进行浅述,以期国内相关机构能以此为鉴,了解、评估、平衡自身机构的管理目标和管理能力,尽量避免“自我管理负担”。



裸鼹鼠研究专题

氯化钴诱导低氧对裸鼹鼠肝星形细胞增殖及凋亡的影响

肖邦, 李莉, 余琛琳, 赵善民, 林丽芳, 杨文静, 丛薇, 崔淑芳

2016, 36(1):  66-71.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.014

摘要 ( 149 )   PDF (1155KB) ( 212 )  

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目的 比较研究氯化钴(CoCl₂)对裸鼹鼠及C57BL/6J小鼠肝星形细胞增殖和凋亡的影响。方法 采用活细胞计数试剂盒(CCK8)法和流式细胞术分别检测不同浓度CoCl₂对裸鼹鼠和小鼠肝星形细胞增殖活力以及和凋亡水平的影响。采用蛋白印迹测定CoCl₂处理后裸鼹鼠肝星形细胞低氧诱导因子1〈(HIF-1〈)和凋亡相关蛋白(BCL₂、BAX)的表达水平。结果 低浓度(50 μmol/L)CoCl₂对C57BL/6j小鼠肝星形细胞增殖活性具有明显的抑制作用,并能显著提高其凋亡率,然而同样剂量的CoCl₂能够显著提高裸鼹鼠肝星形细胞的增值活性,对细胞凋亡率亦无明显影响。高剂量CoCl₂ (>200 μmol/L)虽能导致裸鼹鼠肝星形细胞增殖活力的降低,及凋亡率的升高,但裸鼹鼠肝星形细胞的变化幅度明显小于小鼠。同时CoCl₂处理后,裸鼹鼠肝星形细胞HIF-1〈的表达或累积显著升高(P<0.05),BCL₂/BAX比率显著上调(P<0.05)。结论 与C57BL/6J小鼠相比,裸鼹鼠肝星形细胞具有更强的抵抗CoCl₂引起的化学性低氧损伤的能力。同时HIF-1〈可能参与调控裸鼹鼠抵抗化学性低氧环境造成的损伤。



裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究

程继帅, 李莉, 肖邦, 赵善民, 林丽芳, 丛薇, 汤球, 孙伟, 余琛琳, 杨文静, 崔淑芳

2016, 36(1):  72-75.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.015

摘要 ( 300 )   PDF (789KB) ( 207 )  

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目的 建立一种裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养的方法,并通过与小鼠骨髓巨噬细胞进行比较研究其吞噬功能。方法 分离裸鼹鼠骨髓细胞,在含60 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)完全培养基的诱导下,体外贴壁培养6~7 d,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态。裸鼹鼠骨髓细胞诱导结束后,采用流式细胞术检测贴壁细胞表面抗原CD11b和F4/80的阳性率,鉴定骨髓巨噬细胞的纯度; 采用异硫氰酸荧光素(FITC)-dextran根据荧光强度比较裸鼹鼠和ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能。结果 通过本方法获得的贴壁细胞具有典型的巨噬细胞的形态特征,且细胞表面抗原CD11b和F4/80的阳性率均高于80%; 裸鼹鼠与ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬率分别为99.87%±0.13%和88.79%±0.90%。结论 本文建立的方法是一种简单实用的体外分离培养裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的方法,且能够获得高纯度、高活性的巨噬细胞。裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能高于小鼠骨髓巨噬细胞。



应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立

林丽芳, 李莉, 肖邦, 程继帅, 杨文静, 丛薇, 赵善民, 汤球, 崔淑芳

2016, 36(1):  76-80.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.016

摘要 ( 169 )   PDF (753KB) ( 191 )  

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目的 建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法。方法 在特异性引物F链的5’端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,同时以传统的荧光引物PCR为对照。结果 琼脂糖电泳结果显示,通用荧光引物PCR产生的目的片段清晰,引物特异性强,目的片段多态性与传统PCR产生的多态性一致,且片段大小均比传统PCR产生的目的片段大15 bp左右,与预期一致。毛细管电泳结果也显示,通用引物PCR结果检测的等位基因数与传统荧光引物PCR方法产生的数量完全一致,无杂带,扩增效率高,具有较强的可操作性。结论 使用通用荧光引物分步PCR法结果可应用于裸鼹鼠基因组大量微卫星位点的筛选。