裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.015

实验动物与比较医学 ›› 2016, Vol. 36 ›› Issue (1): 72-75.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.015

所属专题：实验动物资源开发与利用

裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究

程继帅¹, 李莉², 肖邦¹, 赵善民¹, 林丽芳¹, 丛薇¹, 汤球¹, 孙伟¹, 余琛琳¹, 杨文静¹, 崔淑芳¹

1.第二军医大学实验动物中心, 上海200433;
2.第二军医大学教学保障处, 上海200433

收稿日期:2015-12-14 出版日期:2016-02-25 发布日期:2016-02-25
作者简介:程继帅(1991-), 女, 硕士生, 研究方向: 实验动物标准化及人类疾病动物模型研究。E-mail: handsome_91@163.com
基金资助:
国家科技支撑计划(2015BAI09B02); 上海市科委基金(14140900200)与上海市科委基金(15140900200)联合资助

Establishment of Method for Separation, Cultivation of Bone Marrow Macrophage in Naked Mole Rats and Preliminary Research on Function

CHENG Ji-shuai¹, LI Li², XIAO Bang¹, ZHAO Shan-min¹, LIN Li-fang¹, CONG Wei¹, TANG Qiu¹, SUN Wei¹, YU Chen-lin¹, YANG Wen-jing¹, XU Chen¹, CUI Shu-fang¹

1. Laboratory Animal Center;
2. Teaching Guarantee Department, Second Military University, Shanghai 200433, China

Received:2015-12-14 Online:2016-02-25 Published:2016-02-25

摘要/Abstract

摘要： 目的建立一种裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养的方法,并通过与小鼠骨髓巨噬细胞进行比较研究其吞噬功能。方法分离裸鼹鼠骨髓细胞,在含60 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)完全培养基的诱导下,体外贴壁培养6~7 d,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态。裸鼹鼠骨髓细胞诱导结束后,采用流式细胞术检测贴壁细胞表面抗原CD11b和F4/80的阳性率,鉴定骨髓巨噬细胞的纯度; 采用异硫氰酸荧光素(FITC)-dextran根据荧光强度比较裸鼹鼠和ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能。结果通过本方法获得的贴壁细胞具有典型的巨噬细胞的形态特征,且细胞表面抗原CD11b和F4/80的阳性率均高于80%; 裸鼹鼠与ICR小鼠骨髓巨噬细胞的吞噬率分别为99.87%±0.13%和88.79%±0.90%。结论本文建立的方法是一种简单实用的体外分离培养裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的方法,且能够获得高纯度、高活性的巨噬细胞。裸鼹鼠骨髓巨噬细胞的吞噬功能高于小鼠骨髓巨噬细胞。

关键词: 裸鼹鼠, 骨髓巨噬细胞, 分离培养, 功能

Abstract: Objective To establish the method for the primary culture of bone marrow macrophage in naked mole rats and study the phagocytosis compared with mice. Method The bone marrow cells from the hing leg of naked mole rats were detached. The cells were induced by 60 ng/mL Macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) and cultured for 6~7 days in vitro. During the culture, the cell was observed in microscope. After induced, the flow cytometry was conducted to detect the purity of macrophage and the phagocytosis of macrophage with mouse as control. Result Through this method, the adherent cells with typical morphological characteristics were obtained and the positive rate of the cell surface antigen F4/80 and CD11b were higher than 80%. The phagocytosis rate of naked mole rats bone marrow macrophage was 99.87%±0.13%, but the ICR mice was 88.79%±0.90%. Conclusion This method is simple and practical for separation and culture of highly purified and functional naked mole rats bone marrow macrophage in vitro. It indicates that phagocytosis of naked mole rats bone marrow macrophage is higher than that of mice.

Key words: Naked mole rat, Bone marrow macrophage, Separation and cultivation, Function

中图分类号:

Q95-33

程继帅, 李莉, 肖邦, 赵善民, 林丽芳, 丛薇, 汤球, 孙伟, 余琛琳, 杨文静, 崔淑芳. 裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究[J]. 实验动物与比较医学, 2016, 36(1): 72-75.

CHENG Ji-shuai, LI Li, XIAO Bang, ZHAO Shan-min, LIN Li-fang, CONG Wei, TANG Qiu, SUN Wei, YU Chen-lin, YANG Wen-jing, XU Chen, CUI Shu-fang. Establishment of Method for Separation, Cultivation of Bone Marrow Macrophage in Naked Mole Rats and Preliminary Research on Function[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2016, 36(1): 72-75.

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裸鼹鼠骨髓巨噬细胞分离培养方法的建立及其功能的初步研究

Establishment of Method for Separation, Cultivation of Bone Marrow Macrophage in Naked Mole Rats and Preliminary Research on Function

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