当期目录

2018年 第38卷 第6期    刊出日期：2018-12-25

上一期    下一期

　 　

专家论坛

异种器官移植的进展及展望

张麒, 王建飞

2018, 38(6):  407-411.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.001

摘要 ( 331 )   PDF (415KB) ( 256 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

在全球范围内,因终末期器官衰竭而需要器官移植的患者人数不断增加,但从已故或活体捐赠者获得的器官数量非常有限。因此,利用猪器官/组织进行异种移植是解决器官供给短缺的最终办法之一。尽管异种器官移植的研究取得了很大进展,然而,要真正走向临床仍然存在许多障碍,特别是免疫排斥问题。随着该领域研究的不断深入,特别是各种基因编辑技术的发展,实现对猪产生超急性排斥的基因敲除及猪的多种基因进行人源化改造,再在非人类灵长类动物移植模型中进行安全性及功能性评估,移植器官的存活率显著提高。利用CRISPR/Cas9技术将猪内源性逆转录病毒 (PERV)从猪基因组中去除,避免了异种器官移植后内源性病原体感染宿主的潜在风险,具有里程碑意义。本文对异种移植研究需要跨越的障碍、进展、安全、监管和现状等进行了综述。

论著

大鼠脑实质注射血清所致病理改变及其相关机制的研究

赵志靖, 第五飞虎, 邓毅恒, 杨利孙

2018, 38(6):  412-416.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.002

摘要 ( 212 )   PDF (991KB) ( 240 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 探讨大鼠脑实质注射血清所致病理改变及其相关机制。方法 在大鼠脑实质注射胎牛血(FBS)建立大鼠脑实质血清注射模型,对照组注射等体积生理盐水。术后48 h对比两组大鼠生存率、行为学改变。取材测量脑组织含水量变化,观察脑实质组织学及超微结构的改变,逆转录PCR检测脑组织水通道蛋白-4(AQP-4) mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测AQP-4蛋白的表达。含血清/无血清培养大鼠星形胶质细胞,逆转录PCR检测细胞AQP-4 mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测AQP-4蛋白的表达。结果 电子显微镜下显示实验组注射部位周围脑组织水肿;实验组注射侧脑组织表达AQP-4蛋白与mRNA均较对照组明显减少(P<0.01),实验组注射部位对侧脑组织表达AQP-4蛋白与mRNA与对照组未见明显差异(P>0.05);相对于无血清培养组,含血清培养组大鼠星形胶质细胞表达AQP-4蛋白及mRNA均明显下降(P<0.05)。结论 体外与体内实验共同表明,血清导致脑组织、尤其是星形胶质细胞AQP-4表达下降可能是脑出血(ICH)后继发性脑水肿的重要分子机制,为未来治疗脑出血后脑水肿治疗提供新的治疗靶点。



肥胖大鼠的胰岛素抵抗指数与血脂的相关性观测

盛译萱, 曾国威, 姚亮亮, 李冰涛, 姜丽, 张启云, 徐国良

2018, 38(6):  417-421.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.003

摘要 ( 343 )   PDF (384KB) ( 345 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 通过高脂饮食诱导建立肥胖大鼠模型,观测肥胖大鼠血脂等生化指标与胰岛素抵抗的相关性。方法 采用36%脂肪供能的高脂饲料持续喂养雄性SD大鼠12周,检测摄食量,观测大鼠体质量,计算Lee's 指数,多时间段收集血清测定血清胰岛素(Fins)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,求算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。聚类分析筛选产生胰岛素抵抗的大鼠,分析其生化指标与正常组的差异。结果 高脂饲料诱导大鼠4周后产生肥胖,体质量、Lee's指数显著升高(P<0.01,P<0.05)。以肥胖大鼠12周末HOMA-IR为筛选条件,通过聚类分析选出产生胰岛素抵抗的大鼠16只,经统计学处理,与正常组相比,16只大鼠8周后即产生胰岛素抵抗(P<0.05),TC和HDL-C显著下降(P<0.05,P<0.01),但FBG、TG、LDL-C水平无显著改变。结论 采用36%脂肪供能高脂饲料诱导的肥胖大鼠在8周末出现50%大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗大鼠的脂代谢发生明显紊乱。



人参皂甙Rg1慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织上皮间充质转化的影响

刘乾, 管思彬, 韩锋锋, 郭雪君

2018, 38(6):  422-427.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.004

摘要 ( 255 )   PDF (1406KB) ( 297 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 通过烟熏法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,用人参皂甙Rg1灌胃,研究人参皂甙Rg1对小气道上皮细胞上皮间充质转化(EMT)的影响。方法 烟熏诱导大鼠COPD模型,观察肺功能变化,肺组织HE染色检测大鼠肺气肿和小气道破坏情况。免疫组织化学、实时PCR检测肺组织E-cad和α-SMA的表达,观察人参皂甙Rg1对肺内EMT的影响。结果 人参皂甙Rg1可以减轻烟熏对大鼠肺结构破坏,改善肺功能,降低肺内EMT。结论 人参皂甙Rg1可能通过抑制EMT来改善COPD大鼠小气道纤维化。



淫羊藿素对BALB/c-nu 裸小鼠人源性前列腺癌模型的影响

宋登鹏, 饶红, 韩安艳, 武福云, 陈德森

2018, 38(6):  428-433.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.005

摘要 ( 316 )   PDF (564KB) ( 432 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 探讨淫羊藿素抑制人源性前列腺癌LNCaP细胞珠BALB/c-nu 裸小鼠荷瘤组织磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt) 信号通路及其相关蛋白磷酸化的可能机制。方法 将40只雄性BALB/c-nu裸小鼠按随机对照原则均分为4组[对照组、前列腺癌(PCa)组、阳性药组和实验组]并采用前列腺内注射LNCaP细胞株构建PCa动物模型。实验组每日按0.1 mL/10 g尾静脉注射0.8%淫羊藿素,阳性药组按0.1 mL/10 g尾静脉注射P13K/ Akt抑制剂LY294002,对照组和PCa组注射等体积生理盐水。注射4周后比较裸小鼠体质量、前列腺瘤体湿重、体积及P13K/Akt 信号通路相关蛋白表达。结果 与PCa组比较,实验组前列腺瘤体湿重、体积、P13K、 p-Akt、磷酸化雄激素受体(p-AR)、雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)和降钙素(Calcitonin)均较模型组降低(P<0.05),而钙黏蛋白E(E-cadherin) 升高(P<0.05)。结论 淫羊藿素通过调节PI3K/Akt信号通路抑制PCa的进展,且这一作用与Akt及AR磷酸化有关。



灵芝多糖对脂多糖诱导的巨噬细胞TLR4/NF-κB通路调控及下游炎症因子的影响

杨燕燕, 谢金东, 周建华, 林玮, 王训立

2018, 38(6):  434-439.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.006

摘要 ( 322 )   PDF (730KB) ( 334 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 探讨灵芝多糖(GLPs)对脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)核因子-κB(NF-κB)信号通路及炎症因子的影响机制。方法 体外实验分为5组,分别为对照组,LPS组及GLPs药物低、中、高剂量组。除对照组外,其余均用l µg/mL LPS刺激16 h,药物组分别同时给予GLPs 40 µg/mL、80 µg/mL、160 µg/mL干预2 h,收集细胞。采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法测定TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的mRNA和蛋白表达情况。结果 与对照组相比,LPS组小鼠RAW264.7细胞TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6 mRNA表达明显升高(P<0.05)。采用GLPs干预后显著抑制TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6的表达,与LPS组相比,GLPs中、高剂量组TLR4、MyD88、TRAF-6 mRNA及GLPs低、中、高剂量组NF-κB mRNA均具有显著性差异(P<0.05)。各组的TLR4、MyD88、NF-κB及TRAF-6蛋白表达趋势与mRNA基本一致。与对照组相比,LPS组小鼠RAW264.7细胞TNF-α、LOX-1 mRNA水平显著升高(P<0.01),采用GLPs干预后TNF-α、LOX-1 mRNA均显著低于LPS组(P<0.05)。各组的TNF-α、LOX-1蛋白表达趋势与mRNA基本一致。结论 GLPs可阻断TLR4高表达及下游MyD88依赖性途径,还可明显抑制TNF-α、LOX-1等炎症因子的表达。



姜黄素预处理对沙漠干热中暑大鼠回肠、结肠内容物菌群表达量的影响

许琴, 董翔, 李建瑛, 张东辉, 李佳佳, 杨亚萍, 杨秋月, 是文辉, 马娜, 宋来阳, 刘江伟

2018, 38(6):  440-445.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.007

摘要 ( 262 )   PDF (533KB) ( 250 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 分析姜黄素预处理对沙漠干热中暑大鼠回肠、结肠菌群表达量的影响。方法 雄性 SD 大鼠50只,随机分为5组:常温常湿空白组、轻度中暑组、中度中暑组、重度中暑组、重度中暑姜黄素干预组,每组10只。姜黄素干预组200 mg/kg,1 mL/100 g体质量灌胃姜黄素混悬液,其余各组灌胃等体积生理盐水,连续7 d。利用西北特殊环境人工实验舱复制不同程度中暑模型,麻醉动物,无菌留取回肠、结肠内容物,PCR法分析各组大鼠回肠、结肠大肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌表达量的变化。结果 沙漠干热中暑大鼠回肠、结肠大肠杆菌、肠球菌表达量均显著增加(P<0.05),乳酸杆菌表达量未发生明显变化、双歧杆菌表达量显著降低(P<0.01)。姜黄素干预处理降低了回肠、结肠条件致病菌大肠杆菌、肠球菌表达量,增加了回肠、结肠有益菌双歧杆菌表达量,但对乳酸杆菌作用不明显。结论 姜黄素可能通过提高中暑大鼠回肠、结肠内双歧杆菌的表达量,抑制回肠、结肠内大肠杆菌和肠球菌的增殖,维持肠道菌群稳态,降低肠源性感染的程度,增强大鼠对中暑的耐受力。

小鼠指甲再生模型建立方法的探索

张新艳, 关玉婷, 李大力

2018, 38(6):  446-449.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.008

摘要 ( 224 )   PDF (1029KB) ( 231 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 为研究潜在功能基因在小鼠指甲生长过程中的作用,在国外研究基础上建立并优化指甲干细胞的小鼠指甲再生模型。方法 以8周龄C57BL/6小鼠为实验对象,通过麻醉后在显微镜下精准位置截肢处理进行动物造模、通过实时观察记录、取样测量、切片染色等一系列研究方法的探索与实践,对研究步骤进行适当优化。结果 形成了系统的小鼠指甲再生模型研究手段。结论 该模型能够在动物整体水平、组织水平对小鼠指甲生长情况进行评估,可以成为研究指甲干细胞及相关功能基因的有效手段。



英国短毛实验猫部分血液生理生化特性分析

胡樱, 杨斐, 陈鸿婷

2018, 38(6):  450-454.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.009

摘要 ( 346 )   PDF (363KB) ( 259 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 测定分析英国短毛实验猫血液生理生化特性的性别差异和年龄差异,为血液生理生化相关研究提供依据。方法 测定5月龄、11月龄英国短毛实验猫的血液学指标和血液生化指标,比较同月龄不同性别和同性别不同月龄间的差异。结果 血液生理特性方面,雌猫的2项指标[血红蛋白(HGB)、红细胞比容(HCT)]和雄猫的5项指标[HCT、平均红细胞体积(MCV)、红细胞数(RBC)、HGB、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)]均存在年龄差异,5月龄实验猫的2项指标[白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYMPH)]和11月龄实验猫的3项指标[RBC、HGB、淋巴细胞百分比(LYMPH%)]存在性别差异。血液生化方面,雌猫的4项指标[碱性磷酸酶(ALKP)、磷(PHOS),胆固醇(CHOL)、肌酐(CREA)]和雄猫的3项指标[ALKP、PHOS、CREA]存在年龄差异,5月龄实验猫的CHOL以及11月龄实验猫的3项指标[白蛋白(ALB)、CREA,丙氨酸转移酶(ALT)]有性别差异。结论 英国短毛实验猫在5月龄和11月龄时部分血液生理生化指标存在性别差异和年龄差异,在确定血液生理生化参考值时应注意增龄性变化和性别的差别。

经验交流

小鼠滴鼻剂量与麻醉方法国内近年文献分析

鹿双双, 荣蓉, 师晓萌, 刘晓宇, 卢选成

2018, 38(6):  455-458.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.010

摘要 ( 1232 )   PDF (347KB) ( 355 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 了解近年国内小鼠滴鼻操作的情况。方法 万方数据库中检索2011~2017年正文中含有检索词“小鼠”和“滴鼻”的文献,对符合条件的文章进行统计分析。结果 检索到770篇文献,其中513篇文献明确描述了小鼠滴鼻的剂量,其中,滴鼻剂量大于30 µL小于等于50 µL的有272篇文献,占53.3%。未注明滴鼻过程中是否使用麻醉剂的文献高达49.2%,滴鼻过程中注明使用麻醉剂的249篇文献中,使用比例最高的3种麻醉剂依次是乙醚(51%)、巴比妥类(24%)、水合氯醛(12%)。结论 小鼠滴鼻时应轻度麻醉,滴鼻剂量控制在50 µL以内为佳,特殊实验除外。滴鼻麻醉使用比例最高的麻醉剂为乙醚,但是鉴于乙醚具有易燃、易爆等特性,建议采用异氟烷等吸入性麻醉剂替代。

医学院校研究生开设转基因动物技术课程的意义和教学体会

杜小燕, 陈柏安, 仵毅, 郭萌

2018, 38(6):  459-462.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.011

摘要 ( 258 )   PDF (548KB) ( 281 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

转基因动物技术在医学和生物学领域的研究中发挥着重要作用,多种重大疾病的研究突破都有赖于转基因动物,在医学院校针对研究生开设转基因动物技术课程有重要意义。作者从改课程的教材编写、课程大纲介绍、考核方法等几个方面阐述了教学体会,为更多的同行们提供参考和借鉴。



综述

膀胱出口部分梗阻动物模型的研究进展

陈林, 杨亚飞, 杨进, 何平林, 王凯, 王云汉, 汪自力

2018, 38(6):  463-467.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.012

摘要 ( 223 )   PDF (374KB) ( 274 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

构建理想的膀胱出口部分梗阻(pBOO)动物模型是研究膀胱梗阻性疾病发病机制和开展药物治疗研究的关键。本文就pBOO动物模型的诱导方式选择(包括经耻骨上膀胱颈结扎法、尿道外口缝扎法、尿道外口皮下注射透明质酸等),及诱导pBOO动物模型的特点及局限性进行综述。

氧化还原酶DHTKD1基因突变致病机制及小鼠模型研究进展

沈艳, 徐汪洋, 朱后保

2018, 38(6):  468-472.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.06.013

摘要 ( 307 )   PDF (338KB) ( 279 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

氧化还原酶,脱氢酶E1和转酮酶结构域1(DHTKD1)通过催化2-酮己二酸氧化脱氢生成戊二酰辅酶A,终产物乙酰辅酶A进入三羧酸循环,产生三磷酸腺苷(ATP)为细胞机体提供能量。迄今为止,研究显示,DHTKD1基因多个位点的突变与线粒体功能障碍有关,最终导致人类遗传疾病的发生。本文重点阐述了DHTKD1基因突变与人类遗传病的相关性及其相应的机制,并对已有的2种基因敲除小鼠模型进行了比较探讨。