当期目录

2018年 第38卷 第5期    刊出日期：2018-10-25

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专家论坛

西藏小型猪和五指山小型猪的生理特点及其动脉粥样硬化的发病特征比较研究

陈民利

2018, 38(5):  325-328.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.001

摘要 ( 209 )   PDF (646KB) ( 234 )  

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动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病和脑卒中发生的主要病因。人类AS的发病模式多种多样,在高血脂环境下,有肥胖导致胰岛素抵抗、共同促进AS形成,也有胰岛素抵抗导致高血压、加速AS形成,往往同时存在代谢综合征的一种或多种临床表象,其发生与发展是遗传因素和环境因素共同作用的结果。猪在循环系统、血小板凝聚系统、脂蛋白代谢及消化系统均与人类极为相似,其AS病变与人类AS病变的分布特点相一致,并具有人类成熟斑块的特点,是研究AS的一个重要模式动物。我国小型猪种质资源丰富,不同品种品系的小型猪具有不同种质特性和生物学功能。五指山小型猪、西藏小型猪尤如人类的两个不同类型的AS易感群体。本文就作者研究团队对五指山小型猪、西藏小型猪的AS形成和病症特点方面的研究作一回顾性的总结,为在心血管疾病研究中对小型猪品系的选择和应用提供一些参考。

论著

环孢素A对高糖状态下七氟醚后处理大鼠心肌细胞保护作用的影响

俞瑾, 詹海婷, 程虎, 李玉倩, 郑宏

2018, 38(5):  329-335.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.002

摘要 ( 140 )   PDF (3044KB) ( 274 )  

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目的 明确环孢素A(CsA)能否通过抑制线粒体通透性转换孔(mPTP)开放,并维持线粒体形态恢复七氟醚后处理(SPostC)对高糖培养心肌细胞的保护作用。方法 原代培养SD乳鼠心肌细胞,分别在低糖与高糖浓度下培养48 h后接受缺氧复氧损伤。缺氧前给予CsA或者再灌注前给予SPostC,或二者联合应用,观察心肌细胞复氧后的死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)水平、线粒体形态改变及线粒体膜电位变化。结果 SPostC与CsA均降低了缺氧/复氧损伤后的LDH水平与细胞死亡率,增加了缺氧/复氧损伤后的线粒体平均面积/周长比与线粒体膜电位水平(P<0.05),二者联合并未进一步增强保护作用。高糖(35 mmol/L)加剧了心肌细胞缺氧/复氧损伤,高糖浓度下,上述保护作用均消失。与高糖组相比,SPostC、CsA及二者联合均未能降低缺氧/复氧损伤后的LDH水平与细胞死亡率(P>0.05),线粒体平均面积/周长比与线粒体膜电位水平变化差异也无统计学意义。结论 CsA和SPostC均能够通过调节线粒体形态抵抗缺氧/复氧损伤,高糖时保护作用消失,联合CsA无法恢复其保护效应。



SD大鼠脊髓损伤后微环境中髓鞘相关抑制因子的表达

贾叙锋, 龙苗, 戢勇, 黄光平, 周玉, 冯大雄

2018, 38(5):  336-342.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.003

摘要 ( 198 )   PDF (5471KB) ( 301 )  

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目的 观察SD大鼠在不同致伤势能的Allen's模型和脊髓全切模型微环境中不同时间点的髓鞘相关抑制因子表达。方法 选择125只成年雌性SD大鼠随机分为5组,每组25只,A组(假手术组),B组[20 g×5 cm,即致伤势能100 gcf (gram-cm force)],C组(20 g×10 cm,致伤势能200 gcf),D组(20 g×15 cm,致伤势能300 gcf)和E组(脊髓全切组)。采用Western blotting印迹分析法,在制模成功后1 d、5 d、7 d、14 d、28 d观察大鼠脊髓损伤(SCI)组织中勿动蛋白-A(Nogo-A)、髓鞘相关糖蛋白（MAG）、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)等髓鞘相关抑制因子表达。结果 整个实验中大鼠死亡24只(16.67%);B、C、D、E组SCI后1 d可见Nogo-A、MAG、OMgp表达,Nogo-A与MAG表达于SCI后7 d达峰值,28 d恢复到假手术组水平;SCI后1 d可见髓鞘中OMgp表达,5 d达峰值,28 d恢复至假手术组水平。结论 Nogo-A、MAG、OMgp在SCI后普遍呈现高表达,并在SCI后5~7 d达到峰值。



鼠痘病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

周洁, 陶凌云, 赵丽娟, 胡建华, 高诚

2018, 38(5):  343-349.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.004

摘要 ( 214 )   PDF (3142KB) ( 309 )  

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目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立一种鼠痘病毒(ECTV)的可视化快速检测方法。方法 通过序列分析选择3段ECTV序列保守区域设计了9套LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物组合,优化反应条件,建立了对ECTV核酸进行特异性扩增的LAMP 检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果。对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估,并对人工感染样品进行了检测。结果 该方法在63 ℃恒温下作用60 min,ECTV DNA获得了高效特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;最低检出量为530 fg/µL,是常规PCR的10³倍,加入目测荧光染料判断结果与Real Time Turbidimeter LA-320 仪监测结果一致。结论 建立的ECTV LAMP 检测方法具有快速、特异、灵敏和操作简单的特点,或具有良好应用前景。



弓形虫生物检测靶标miR-191的鉴定

温福利, 郑和平, 党源, 薛来恩, 赵东岳

2018, 38(5):  350-355.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.005

摘要 ( 190 )   PDF (1567KB) ( 290 )  

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目的 建立弓形虫miRNA探针定量检测法。方法 采用高通量测序技术筛选出不同弓形虫虫株间表达量高且差异不明显潜在靶标,并对其不同时间点(0 d、1 d、3 d、5 d、7 d)外周血的表达及诊断效能进行研究。结果 高通量测序表明,miR-252、miR-3641、miR-509-5p、miR-1285、miR-140、miR128-1、miR-191、miR-3426具有作为血液中弓形虫生物检测靶标的潜在性。通过对感染弓形虫RH株和M49株小鼠的miR-191诊断效能分析后表明,敏感性分别为85%和95%,特异性均为100%。根据miR-191制备纳米金探针,对不同时间点感染弓形虫RH株和ME49株大鼠的血液靶标miR-191进行定量分析表明,感染后7 d内感染弓形虫miR-191表达情况相对稳定。制作弓形虫RH株、弓形虫ME49株、伯氏疟原虫、约氏疟原虫、隐孢子虫,鼠肝炎病毒和金黄色葡萄球菌感染的小鼠模型,与对照组比较分析表明,miR-191在感染弓形虫 RH株和ME49 株的小鼠模型中出现高表达,而在感染细菌、病毒和其它寄生虫的小鼠模型中均未出现表达。结论 弓形虫miR-191具有作为检测靶标的应用价值。



传统超声与超声二维斑点追踪技术对小鼠心肌梗死模型评价的比较

卢今, 严国锋, 周晶, 肖忠标, 朱寅秋, 朱莲, 汪静, 李垚, 左勇

2018, 38(5):  356-364.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.006

摘要 ( 175 )   PDF (10060KB) ( 124 )  

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目的 通过传统超声与超声二维斑点追踪(STI)技术用于小鼠心肌梗死(MI)模型评估的不同特点进行分析比较,确定更精确和准确的技术检测手段。方法 16周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和MI模型组。采用相同参数设置的超声采集对照组小鼠和MI小鼠的心功能情况。运用传统超声方法记录小鼠左心室射血分数(EF%)和缩短分数(FS%),同时利用STI技术分析左室各节段在长轴和短轴上的运动速度、运动位移、应变和应变率4种参数。分析对比传统超声与STI技术对小鼠心功能的评价效果。结果 传统超声EF%与FS%能够反映出小鼠发生MI情况,而STI技术不仅能反映小鼠MI情况,还具有模拟心肌各节段运动能力和力学属性的特点,比传统超声更为敏感,反映出的信息更多。结论 STI技术可作为传统超声方法的补充手段,可使小鼠MI模型获得更有效评估。



兔心内电生理检查及多种心律失常效应的微创方法初探

周志文, 赵莉芳, 曹佳齐, 郑宏超, 丁跃有, 朱福, 昌薇

2018, 38(5):  365-371.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.007

摘要 ( 313 )   PDF (12171KB) ( 133 )  

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目的 探索一种对小型动物行心内膜电生理检查及心律失常模型制作的简易微创技术。方法 兔全身麻醉后分离颈静脉,经颈静脉送入多极电极头端至右心房或右心室,也可通过分离出颈动脉并置入5F鞘管,沿鞘管送入多极电极的头端至左心室。将多极电极另一段连接心电图的胸前导联及心脏刺激系统。通过获得的心内膜电位及刺激起搏心电信号情况可确定电极的头端送入右心房、右心室,或左心室。在确定刺激阈值后,固定电极,行心内电生理检查,并诱发房颤等心律失常。结果 利用20只兔实施本研究。多极电极很容易送入心脏,并可获得高大清晰的心房和心室心内膜的心电图。在无需X线设备的情况下,根据心脏刺激与起搏的心电图信号情况进行电极调整,可使电极至所需的心房或心室的部位。通过心房刺激,可以检查窦房结恢复时间、心房不应期、房室结前向传导功能。如果配合静脉滴注乙酰胆碱等药物,心房刺激可成功诱导出房颤及房扑,成功率达95%以上。通过心室刺激,可以检测心室不应期、房室结逆向传功能,如果配合静脉滴注异丙肾上腺素等药物,也可以诱导出室性心动过速及心室颤动,成功率达90%。结论 本实验建立的简易微创技术,在无需X线的条件下可进行兔心内电生理检查及心律失常模型制作,有利药物等心脏电生理研究。



野生东方田鼠4种成纤维细胞培养上清对日本血吸虫童虫的体外杀伤效果

吴侠, 成钢, 黎欢, 李海霞, 汤志宏

2018, 38(5):  372-376.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.008

摘要 ( 265 )   PDF (3768KB) ( 295 )  

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目的 为了明确野生东方田鼠4种成纤维细胞培养上清对体外培养的日本血吸虫童虫的杀伤效果。方法 以对数生长期的野生东方田鼠胚胎、皮肤、肺脏及腹腔成纤维细胞培养上清液(实验组)与血吸虫童虫共培养,以DMEM 培养基为空白对照,以含体积分数20%的东方田鼠血清为阳性对照,96 h 内观察与4种细胞培养上清共培养的童虫状态,统计死亡率。结果 与野生东方田鼠腹腔与肺脏成纤维细胞培养上清共培养72 h后,童虫出现死亡特征,表现为表膜皱缩,缢痕明显;96 h后,虫体内容物模糊并溢出,与阳性对照组童虫死亡特征略有不同;野生东方田鼠皮肤、胚胎、腹腔和肺脏组织成纤维细胞培养上清共培养96 h的血吸虫童虫死亡率分别为8.30％±2.10％、9.30％±1.38％、17.20％±3.27％和15.10％±4.35％,与空白对照的童虫死亡率(7.70％±0.80％)相比表明,腹腔和肺脏成纤维细胞培养上清液对童虫具有明显杀伤效果(P<0.05)。结论 对数生长期的野生东方田鼠腹腔和肺脏成纤维细胞培养上清对日本血吸虫童虫的杀伤效果较明显。



荷丹片对慢性非酒精性脂肪性肝病模型大鼠的影响

徐丽瑛, 黎砚书, 郑国安, 吴金花, 丁琦, 肖小华

2018, 38(5):  382-386.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.010

摘要 ( 264 )   PDF (4549KB) ( 346 )  

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目的 观察荷丹片对慢性非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的影响。方法 采用灌胃给予高脂乳剂和高糖溶液制作NAFLD大鼠模型,取模型大鼠连续给药4周后,测其血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和肝脏组织还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、TCH、TG值及肝系数。结果 荷丹片3.53 g/kg、7.06 g/kg、14.12 g/kg均能显著降低NAFLD模型大鼠血清ALT、TCH和LDL-C,能显著增加其血清HDL-C;荷丹片7.06 g/kg、14.12 g/kg能显著降低其血清TG和肝组织MDA、TCH、TG,与模型组比较,差异有统计学意义。组织病理学检查,荷丹片7.06 g/kg、14.12 g/kg可减轻NAFLD模型大鼠肝细胞肿胀,脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。结论 荷丹片能显著改善NAFLD模型大鼠血清和肝组织相关指标,可减轻NAFLD模型大鼠肝细胞肿胀,脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。



栀子黄色素类单体对糖尿病小鼠降血糖作用

黎砚书, 徐丽瑛, 周艳艳, 吴金花, 丁琦, 李艳, 李玉云, 肖小华

2018, 38(5):  387-389.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.011

摘要 ( 317 )   PDF (480KB) ( 268 )  

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目的 探讨栀子黄色素类单体对糖尿病小鼠降血糖的作用。方法 采用四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,测定栀子黄色素类单体对淀粉负荷和蔗糖负荷糖尿病小鼠血糖的影响。结果 西红花苷Ⅰ100 mg/kg、西红花酸100 mg/kg和西红花苷Ⅲ50 mg/kg可显著降低淀粉负荷糖尿病小鼠血糖;西红花苷Ⅰ100 mg/kg、西红花酸50 mg/kg、100 mg/kg和西红花苷Ⅲ100 mg/kg可显著降低蔗糖负荷糖尿病小鼠血糖。结论 栀子黄色素类单体西红花苷Ⅰ、西红花酸和西红花苷Ⅲ对淀粉负荷和蔗糖负荷糖尿病小鼠均有降血糖作用。

利用SCID小鼠建立子宫内膜异位症模型的方法探讨

罗碧云, 李莉, 江玲

2018, 38(5):  390-393.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.012

摘要 ( 289 )   PDF (6276KB) ( 302 )  

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目的 将人子宫内膜碎片经腹腔注入SCID小鼠体内以建立SCID小鼠子宫内膜异位症(EMT)模型,并观察其成模情况。方法 取56~62日龄CB-17 SCID雌性小鼠18只,体质量17~25 g,腹部常规消毒后用16号针头于小鼠下腹正中行腹腔穿刺,注入含子宫内膜碎片的磷酸缓冲液(PBS) 0.2 mL,含内膜碎片8~10块。种植第2日给予30 mg/kg体质量的苯甲酸雌二醇于小鼠腿部肌肉注射,以利于子宫内膜生长种植。结果 造模4周后见小鼠形态消瘦,部分呈病态,行手术打开腹腔见散在不典型内异病灶,取病灶检测未见典型的子宫内膜异位症病理学变化。结论 腹腔注射法建立SCID小鼠EMT模型不理想,成模率低,可操作性较低,且其易形成炎性囊肿,影响盆腔微环境,异体移植组织较小,实验过程复杂,手术操作困难,或存在腹腔注射的组织失活,导致成模率低。



经验交流

微电解水用于SPF级实验动物饮用水初探

张薇, 唐彬, 黎福荣, 赵勇

2018, 38(5):  394-398.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.013

摘要 ( 306 )   PDF (588KB) ( 254 )  

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目的 对屏障繁育设施中应用微电解无菌水系统的输水管网、水进行细菌监测,并观察饮用微电解无菌水对SPF级SD大鼠血液生化的影响。方法 从2015年~2017年对微电解制水系统6个出水点进行跟踪采样检测。21日龄SD大鼠分为2组,每组雌雄各20只,分别饮用微电解水、高压灭菌水,饮用1~8个月后分别麻醉,腹主动脉取血,检测血液生化。结果 对微电解制水系统长达2年多的跟踪检测,微电解水、输水管网均未检测到细菌。21日龄SD大鼠分别饮用微电解水与饮用高压灭菌水1~8月后检测,血液生化指标差异无统计学意义。结论 在屏障繁育设施应用微电解无菌水系统,对水及管网有持续性消毒杀菌作用,水和管网长期保持无菌;21日龄SD大鼠饮用微电解水8个月对血液生化指标没有明显影响。

独立通气动物笼和开放笼饲养大鼠比较观察

李俊鹏, 秦美蓉, 冼静雯, 谢天柱, 金毅, 陈润桦, 黄泽愉, 陈宁, 王晓炜, 王平

2018, 38(5):  399-402.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.014

摘要 ( 254 )   PDF (6867KB) ( 120 )  

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目的 观察独立通气动物笼（IVC）和开放笼两种饲养方式对大鼠生长的影响。方法 屏障内用IVC和开放笼同时饲养大鼠,连续30 d,观察动物的体质量、摄食量、血液学指标、血清生化指标,并进行病理学检查。结果 IVC和开放笼所饲养大鼠均正常生长,但两种饲养方式大鼠的红细胞、血红蛋白、白细胞、尿素氮和总胆固醇有显著性差异(P<0.05)。结论 IVC和开放笼所饲养大鼠均正常生长,但部分血液学和血清生化指标有差异。



我国医学科研实验动物福利现状及对策

罗小泉, 李龙雪, 李姗姗, 李中炼, 徐彭

2018, 38(5):  403-406.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.015

摘要 ( 360 )   PDF (627KB) ( 310 )  

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医学科研结果通常要借助动物实验这一有效手段获得,并且多以实验动物本身受到伤害或遭受痛苦为代价。如何在保证动物实验结果科学可靠的前提下来提升实验动物的福利是每一个医学科研工作者要考虑的问题。本文从我国医学科研实验动物福利现状出发,指出了我国与欧美发达国家之间的差异,并分析了造成我国科研实验动物福利滞后的原因。提出了只有加快制定我国的实验动物福利技术标准及规则、加强实验动物福利思想的宣传教育、建立科学的实验动物福利伦理审查制度等措施,才能促进我国实验动物福利水平快速提升。