B病毒糖蛋白的原核表达及ELISA检测方法的建立

›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (3): 162-167.

B病毒糖蛋白的原核表达及ELISA检测方法的建立

中国药品生物制品检定所，北京，100050

收稿日期:2008-11-10 出版日期:2009-03-31 发布日期:2009-03-31

Establishment of ELISA Method for Detection of Monkey B Virus

National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Beijing 100050, China

Received:2008-11-10 Online:2009-03-31 Published:2009-03-31

摘要/Abstract

摘要： 目的表达B病毒糖蛋白，筛选出具有较好检测敏感性和特异性的抗原或抗原组合，用以检测猴血清中的抗体。方法原核表达B病毒糖蛋白C，D和G，经纯化、复性后用蛋白印记验证其抗原性，建立ELISA法，对方法进行评价。结果 3个表达抗原反应特异性较好；以BV-ELISA为标准，各抗原的检测敏感性分别是： BVgC-ELISA 84.6%，BVgD-ELISA 88.5%，BVgC+gD-ELISA 96.2%，检测特异性分别是： BVgC-ELISA 93%， BVgD-ELISA 85.7%， BVgC+gD-ELISA 64.3%。结论表达的3个BV重组抗原都具备作为替代抗原检测BV抗体的潜力。

关键词: B病毒, 酶联免疫吸附试验, 敏感性, 特异性, 原核表达

Abstract: Objective To express the glycoproteins of simian B virus, use them to detect the BV antibodies in serum,and search for the better antigens or their combination which have best sensitivity and specificity. Methods Express B virus glycoprotein C，D and G and check their antigenicity by Western Blot after purification and renaturation.The ELISA was established and evaluated. Results The three antigens react well with simian serum which BV antibody is positive. The sensitivity of the antigens is BVgC-ELISA 84.6%, BVgD-ELISA 88.5%，BVgC+gD-ELISA 96.2%, specificity is BVgC-ELISA 93%, BVgD-ELISA 85.7%, BVgC+gD-ELISA 64.3% according to the results of BV-ELISA. Conclusion The three antigens react well with simian serum and can be used as surrogate antigens of BV.

Key words: B vims, ELISA, Sensitivity, Specificity, Prokaryotic expression

李晓波，肖镜，付瑞，贺争鸣. B病毒糖蛋白的原核表达及ELISA检测方法的建立[J]. , 2009, 29(3): 162-167.

LI Xiao-bo，XIAO Jing，FU Rui，HE Zheng-ming. Establishment of ELISA Method for Detection of Monkey B Virus[J]. , 2009, 29(3): 162-167.

[1]	姚玎, 周晶, 严国锋, 王会阳, 汪雅荻, 马政文. 盐敏感性高血压小鼠模型的建立[J]. 实验动物与比较医学, 2020, 40(4): 314-.
[2]	李琰, 孔建军, 陈子奇, 祝聪聪. 短发夹RNA TRPV4基因对脊柱侧弯大鼠模型椎间盘退变的抑制作用[J]. 实验动物与比较医学, 2019, 39(5): 356-363.
[3]	马军, 罗居东, 景文江, 张淑莲, 王娟毅, 范志刚. VEGF基因沉默对人肺癌A549细胞放射增敏作用的体内研究[J]. 实验动物与比较医学, 2019, 39(4): 280-286.
[4]	纪莲, 马铁, 狄正鸿, 刘冬妍. 小鼠特应性皮炎建模方法的改进[J]. 实验动物与比较医学, 2018, 38(4): 267-271.
[5]	温福利. 兔斯氏艾美耳球虫环介导等温扩增技术检测方法的建立[J]. 实验动物与比较医学, 2018, 38(3): 176-181.
[6]	刘乾, 刘松, 徐卫国, 管思彬, 郭雪君. 泛素特异性蛋白酶19对烟熏诱导慢性阻塞性肺疾病大鼠模型骨骼肌萎缩的作用及机制[J]. 实验动物与比较医学, 2017, 37(3): 185-190.
[7]	周洁, 杨燕飞, 胡建华, 陶凌云, 高诚. 猴D型逆转录病毒p27基因的克隆表达及诊断价值评价[J]. 实验动物与比较医学, 2016, 36(4): 270-275.
[8]	李晓波, 付瑞, 巩薇, 王吉, 卫礼, 王淑菁, 岳秉飞, 贺争鸣. 豚鼠弓形虫抗体ELISA检测方法的建立及应用[J]. 实验动物与比较医学, 2013, 33(4): 275-278.
[9]	许琴, 赵彦斌, 任秀梅, 孙兆增, 叶华虎, 刘一, 李微, 白杰英, 曾林, 胡仲明. 比格犬雌激素受体β的原核表达、纯化及鉴定[J]. 实验动物与比较医学, 2013, 33(3): 174-179.
[10]	李赟, 裴丽娜, 都健, 罗红飞, 刘佳, 郭宁宁, 张克莹. 高脂喂养大鼠常用胰岛素敏感性测定方法的评估[J]. 实验动物与比较医学, 2011, 31(1): 48-51.
[11]	刘勇，王海燕，张甲，王雨舟，张冰. 小鼠IFN-γ基因的克隆及其分子佐剂作用的研究[J]. , 2008, 28(6): 367-371.
[12]	沈婕1，丰有吉1，沈霖霖2，乔伟伟3，李笑天1. 妊娠中期SD大鼠压力反射敏感性的变化[J]. , 2008, 28(6): 390-393.
[13]	王吉，卫礼，巩薇，付瑞，肖镜，马丽颖，邢瑞昌，贺争鸣. 2003-2007年我国实验小鼠病毒抗体检测结果与分析[J]. , 2008, 28(6): 394-396.
[14]	周密1，贾晓峰2，史庭燕2，王健2，袁瑶2，施惠娟2. 精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究[J]. , 2008, 28(3): 138-143.
[15]	朱雪萍，陈卫昌，许诤，吴旭东，朱树养，朱晓黎. 肠易激综合征幼鼠模型的建立及初步探讨[J]. , 2007, 27(3): 172-175.