目的 观察畲药十二时辰的三萜皂苷富集组分Fr.B4对苯酚诱导宫颈炎模型大鼠的体内抗炎作用，并初步探讨其作用途径。 方法 将30只6～8周龄的SPF级雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组及十二时辰治疗组，每组10只。模型组及十二时辰治疗组采用25%苯酚胶阴道注射法造模（每2 d 1次，共3次），观察大鼠外阴及宫颈以判断造模效果；造模成功后，十二时辰治疗组每日灌胃290 mg/kg的三萜皂苷富集组分Fr.B4（溶于生理盐水），模型组给予等体积生理盐水，均持续2周；对照组未经造模处理且给予生理盐水2周。各组大鼠末次干预后，采集新鲜粪便、尿液，给予40 mg/kg舒泰-50麻醉后安乐死，采集血清及宫颈组织，采用ELISA法检测血清及宫颈组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β和IL-6含量；HE染色观察宫颈组织病理变化；液相色谱-质谱联用法分析粪便及尿液中差异代谢物，并进行KEGG通路富集与核心代谢物分析；16S rDNA测序分析各组大鼠的肠道菌群结构及多样性；采用GraphPad Prism 9.0进行统计学分析。 结果 与对照组相比，模型组大鼠出现宫颈红肿、糜烂，血清及宫颈组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著升高（P<0.05或P<0.01），宫颈组织病理显示鳞状上皮增厚、炎症细胞浸润及水肿。与模型组相比，十二时辰Fr.B4治疗后，大鼠宫颈炎症状明显缓解，血清及宫颈组织中促炎因子水平显著降低（P<0.05或P<0.01），宫颈组织水肿减轻，炎症细胞减少，鳞状上皮增厚情况改善。代谢组学分析显示，模型组与对照组的粪便、尿液分别存在346、564个差异代谢物；十二时辰Fr.B4治疗后，粪便、尿液分别有236、451个代谢物水平显著回调，涉及环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）、谷胱甘肽代谢等通路，其中乳香酸、齐墩果酸等抗炎代谢物显著增加（P<0.01或P<0.001）。肠道菌群分析显示，模型组的菌群结构紊乱，厚壁菌门/拟杆菌门比值失衡；十二时辰Fr.B4可重塑菌群结构，α多样性向正常组逆转，且特定菌属与代谢物关联显著（P<0.05或P<0.01）。 结论 十二时辰三萜皂苷富集组分Fr.B4可能通过降低促炎因子水平、调节肠道菌群平衡及代谢重塑发挥抗宫颈炎作用。

目的 通过网络药理学和动物实验探究葛根芩连汤（Gegen Qinlian decoction）对高脂饮食联合链脲佐菌素诱导2型糖尿病小鼠心肌损伤的改善作用及其机制。 方法 结合网络药理学方法筛选葛根芩连汤干预糖尿病性心脏病（diabetic heart disease）的潜在信号通路。再取36只8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠，适应性饲喂1周后，将小鼠随机分为正常对照组（n=6）和造模组（n=30）。造模组小鼠以60%高脂饲料+5%葡萄糖水饲喂4周，禁食12 h后腹腔注射100 mg/kg链脲佐菌素诱导2型糖尿病动物模型；正常对照组小鼠给予普通饲料、饮水，同期禁食12 h后腹腔注射等体积柠檬酸盐缓冲液。糖尿病小鼠模型构建成功后，造模组小鼠按体重随机分为二甲双胍阳性对照组、模型对照组、葛根芩连汤低剂量组、葛根芩连汤中剂量组和葛根芩连汤高剂量组，每组6只，分别灌胃二甲双胍、ddH₂O和不同剂量葛根芩连汤连续6周。6组小鼠经2%异氟烷吸入麻醉后，摘眼球取血，随后以心脏放血安乐死小鼠并采集心脏组织。采用HE和麦胚凝集素（wheat germ agglutinin，WGA）染色观察心肌组织病理损伤并测量心肌细胞横截面积；采用ELISA测定血清中促炎性细胞因子的表达水平，采用免疫组织化学染色法检测心肌组织中晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE）、核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3（nucleotide-binding domain leucine-rich repeat and pyrin domain-containing receptor 3，NLRP3）及磷酸化核因子κB p65（phosphorylated nuclear factor-κB p65，p-p65）的表达水平。 结果 网络药理学分析显示，葛根芩连汤干预糖尿病性心脏病的靶点显著富集于晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体轴、肿瘤坏死因子、白细胞介素-17等炎症通路。WGA和HE染色结果显示，与正常对照组相比，模型对照组小鼠出现心肌纤维断裂和细胞肿胀，心肌细胞横截面积显著增大（P<0.05）；与模型对照组相比，葛根芩连汤干预能显著改善心肌纤维断裂与细胞肿胀，减轻心肌细胞肥大等病理变化。免疫组织化学染色和ELISA检测结果显示，与模型对照组相比，葛根芩连汤干预可显著下调心肌组织中RAGE、NLRP3和p-p65蛋白以及血清中促炎性细胞因子的表达水平（P<0.05）。 结论 葛根芩连汤可有效缓解饮食诱导2型糖尿病小鼠的心肌病理损伤，其机制可能与抑制RAGE/p-p65/NLRP3信号通路活化、减轻心肌炎症反应有关。

目的 探讨艾黄素（artemitin）对臭氧暴露诱发的小鼠肺部炎症是否具有保护作用及其潜在机制。 方法 将32只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、艾黄素对照组、模型组、艾黄素治疗组，每组8只。艾黄素治疗组每日先腹腔注射艾黄素（20 mg/kg），再持续吸入0.000 25%臭氧1 h；艾黄素对照组每日先腹腔注射艾黄素（20 mg/kg），再吸入洁净空气；模型组每日先腹腔注射等体积生理盐水，再吸入0.000 25%臭氧1 h；空白对照组每日先注射等体积生理盐水，再吸入洁净空气；以上各组均连续处理7 d。采用全身体积描记检测系统检测各组小鼠的肺功能指标；采用ELISA检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；采用HE染色观察肺组织病理学变化；并采用超高效液相色谱质谱联用对血浆中整体代谢通路的变化进行非靶向代谢组学分析。 结果 与模型组相比，艾黄素治疗能显著改善臭氧引起的肺功能损伤（P<0.05）、降低支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β的蛋白水平（P<0.05）、减轻肺组织炎症细胞浸润和结构破坏。代谢组学结果提示，艾黄素治疗可代偿性增强能量供给和氧化脂质信号，抑制嘌呤代谢与色氨酸衍生通路。 结论 艾黄素对臭氧暴露诱发的小鼠肺部炎症具有明显的保护作用，其通过协同调控色氨酸代谢、能量代谢和脂质炎症介质，从代谢层面改善代谢紊乱，进而抑制下游炎症反应与气道高反应性。本研究不仅揭示了艾黄素治疗气道炎症的多效性机制，还为其临床转化提供了潜在的代谢生物标志物和理论依据。

目的 为探明蓝光诱导小鼠视网膜损伤的时间依赖性，确立适宜的动物模型，并评价含叶黄素酯、DHA藻油、黑果枸杞等药食同源原料的复合配方对视网膜的保护作用。 方法 将56只SPF级雄性C57BL/6J小鼠中的32只随机分为对照组、模型组（1 h、3 h、6 h照射）（n=8），以确定蓝光最佳照射时间。首先采用467 nm发光二极管［（5 000±200） lx］蓝光分别照射小鼠1 h、3 h、6 h，然后分别用苏木精-伊红染色切片检测小鼠视网膜组织病理学改变及厚度，用试剂盒方法检测血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）和谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平，使用实时荧光定量反转录PCR检测视网膜炎症因子mRNA表达量。确定3 h为适宜模型后，其余24只小鼠用于护眼复合配方对蓝光视网膜损伤的干预实验，以复合配方（1 000 mg·kg⁻¹·d⁻¹）持续灌胃小鼠14 d，再行3 h蓝光照射，以同样的方法评估以上指标。 结果 随照射时间的延长，小鼠视网膜各层的厚度逐渐变薄（P＜0.05至P＜0.01），细胞排列紊乱；血清MDA含量逐步升高（P＜0.01），而GSH含量逐步降低（P＜0.01）；视网膜组织白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的mRNA表达水平随着照射时间延长逐渐上调，其中1 h照射组指标变化较小（P＞0.05），6 h照射组变化最显著（P<0.000 1），因此选择各项指标差异显著且适中的3 h（P<0.001）蓝光照射作为后续造模条件。护眼复合配方干预后，与模型组相比，小鼠血清MDA含量显著降低（P<0.01），而血清GSH含量显著升高（P<0.05）；视网膜中炎症因子IL-1β（P<0.000 1）、IL-6（P<0.001）和TNF-α（P<0.01）表达量显著下调；视网膜总厚度显著增加（P<0.01），且内丛状层（P<0.05）、内核层（P<0.05）、外丛状层（P<0.05）与外核层（P<0.01）厚度均显著增加；组织病理学显示，其视网膜及细胞排列的规律性与致密程度均明显优于模型组。 结论 3 h特定照度的蓝光照射可建立稳定的小鼠视网膜损伤模型；护眼复合配方通过抗氧化-抗炎途径缓解损伤，为相关功能食品的开发提供实验依据。

目的 通过28 d经口毒性试验，观察灵芝孢子油对大鼠的亚急性毒性反应，明确灵芝孢子油对大鼠生理指标的影响，并为该物质的安全性评价提供科学依据。 方法 80只4周龄SPF级SD大鼠（雌雄各半），随机分为对照组和低剂量组（0.83 g/kg体重）、中剂量组（1.67 g/kg体重）、高剂量组（3.33 g/kg体重），每组雌性、雄性大鼠各10只。实验组按对应剂量灌胃灵芝孢子油，对照组灌胃等体积食用玉米油，连续给药28 d，其间自由进食、饮水，观察大鼠状态，测量体重、摄食量和食物利用率；试验结束后，收集各组大鼠的尿液进行尿液常规检查。腹腔注射舒泰-50（5 mg/kg）和盐酸赛拉嗪注射液（10 mg/kg）联合麻醉大鼠后，经腹主动脉采血以进行全血细胞计数、凝血功能和血液生化指标检测；解剖各组大鼠进行大体观察，摘取并称量各脏器重量，计算主要脏器的脏器系数；对对照组和高剂量组主要脏器进行组织病理学检查。 结果 在整个实验期间，对照组与各剂量组大鼠生长发育良好、无死亡，未观察到异常行为与体征。与对照组相比，雌性高剂量组总蛋白含量显著升高（P＜0.05），但无剂量反应关系，且在本实验室历史数据正常值范围内，认为无生物学意义；其余各组大鼠的全血细胞计数、血液生化指标、凝血功能、尿液常规检查指标、脏器系数均无显著变化（均P>0.05），组织病理学检查未发现明显异常。 结论 在本试验剂量下，灵芝孢子油对SD大鼠无明显的亚急性毒性。

目的 建立一种符合中医痰湿证的慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）病证结合模型，并进行表型评价。 方法 将18只SPF级8周龄雄性SD大鼠，随机分为对照组（n=8）和模型组（n=10）。造模耗时19周，对照组无干预。造模方法：分别于第1、5、9、13、17周（滴注周）的起始日上午9：00，向大鼠行气管内滴注脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），共5次，每次给药剂量为40 μg/只，当日给药1次。除滴注周外，每日于自制高湿环境的烟熏箱内，让大鼠接受香烟烟雾暴露（第9周开始前15支香烟/次，自第9周起20支香烟/次，每日30 min/次）。每周测量一次大鼠体重，观察其一般体征及痰湿证表征。造模结束次日麻醉大鼠，以进行肺通气功能测定。采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和黏蛋白5AC（mucin 5AC，MUC5AC）的含量；对肺组织进行HE染色和阿尔辛蓝-过碘酸希夫染色（alcian blue and periodic acid-Schiff staining，AB-PAS），以观察肺组织形态结构、杯状细胞的增生情况；采用蛋白质印迹法检测肺组织中TNF-α、MUC5AC蛋白的表达量。 结果 体征与一般状态方面，与对照组比较，模型组大鼠体重自第3周起均显著减轻（P<0.01），并出现毛色发黄、活动迟缓、懒动、呼吸喘促及口鼻分泌物增多等现象。肺通气功能方面，与对照组比较，模型组大鼠肺潮气量、每分通气量均显著下降（P<0.01），动态顺应性显著降低（P<0.05），而肺弹性阻力显著增加（P<0.01）。炎症因子和黏液相关蛋白方面，与对照组比较，模型组大鼠的血清、BALF和肺组织中TNF-α、MUC5AC蛋白水平均显著增高（P<0.01）。病理形态学方面，HE染色结果显示，模型组大鼠肺泡明显扩张、破裂并部分融合成肺大疱，细支气管腔内有炎性细胞浸润；AB-PAS染色结果显示，模型组大鼠细支气管黏膜上皮杯状细胞增多，腔内形成黏液栓。 结论 本造模方法可复制出符合中医痰湿证症状且具有肺通气功能下降与肺气肿、炎症、慢性支气管炎样病理特征的COPD大鼠模型，可为后续中医药治疗痰湿证COPD研究提供可靠支撑。

目的 评价性别因素对环磷酰胺（cyclophosphamide，CYP）和紫杉醇（paclitaxel，PTX）诱导性脱发（chemotherapy-induced alopecia，CIA）小鼠模型表型稳定性的影响，并推测雌性小鼠表型异质性的可能机制。 方法 选取28只6～8周龄野生型SPF级C57BL/6J小鼠（雌雄各半），进行背部同步脱毛；脱毛后第9天，将小鼠随机分为野生型雌性CYP组、野生型雄性CYP组、雌性阴性对照组和雄性阴性对照组；其中，CYP组单次腹腔注射120 mg/kg CYP，阴性对照组腹腔注射等体积生理盐水，随后连续观察并拍照记录CYP所致CIA模型的表型变化。选取11只6周龄SPF级雌性C57BL/6J小鼠进行双侧卵巢切除（OVX组），与5只四核心基因型种鼠繁育所得XY（Sry⁻）小鼠按相同方法构建CIA模型。对OVX组、野生型雌性和雄性CYP组的小鼠于给药后第7天采集血清进行甾体激素质谱检测，以评价性腺源雌激素和性染色体背景改变对CYP诱导雌性脱发表型稳定性的影响。取20只6～8周龄SPF级C57BL/6J小鼠（雌雄各半），随机分为PTX低剂量组和PTX高剂量组，分别在同步脱毛后第9天，单次腹腔注射80 mg/kg或120 mg/kg的PTX，进行连续观察拍照，以比较雌性、雄性小鼠表型的组内一致性；再选取6只6～8周龄SPF级C57BL/6J小鼠（雌雄各半）重复PTX低剂量组的构建方法，分别于给药后当日和给药后第4、7、14、21天进行毛囊组织学检测，以观察PTX对毛囊再生的损伤。 结果 CYP诱导的雄性CIA模型小鼠的表型稳定性和可重复性较高；而CYP诱导的雌性CIA模型小鼠在脱发表型上存在明显个体差异，处于动情周期的相关雌激素的组间差异可能是引发该现象的主要原因。OVX+CYP组和XY（Sry⁻）+CYP组小鼠的组间差异消失，提示卵巢来源激素及XY（Sry⁻）性染色体背景可能共同参与了雌性小鼠CYP诱导脱发表型异质性的形成。高剂量PTX组和低剂量PTX组小鼠表现出较为一致的脱发-再生过程，未见明显性别差异。 结论 CYP诱导CIA模型受性别因素影响明显，卵巢切除和性染色体背景改变可提高CYP诱导雌性小鼠模型脱发表型的一致性。PTX诱导的CIA模型在雌性、雄性小鼠中均具有较好的表型一致性和性别适用性。综上，在CIA动物模型的构建、机制研究及防脱发药物评价中，应结合化疗药物类型、研究目的和表型稳定性要求合理选择实验动物性别，并将性别作为模型标准化和结果解释的重要变量。

目的 比较Rho相关蛋白激酶（Rho-associated protein kinase，ROCK）抑制剂Fasudil与Y27632促进体内外血管新生及小鼠皮瓣存活的作用效果。 方法 选用36只SPF级成年雄性ICR小鼠，随机分为Y27632组、Fasudil组和对照组，各12只，术前3 d开始每日分别腹腔注射Y27632溶液、Fasudil溶液和等体积生理盐水，然后通过小鼠背部手术建立以髂腰血管为蒂的半岛状皮瓣模型。分别在术后即刻（第0天）及第5天通过激光散斑衬比成像系统评估各组小鼠皮瓣血流灌注情况，测量蒂部动脉管径并计算近远端血流量；术后第5天计算皮瓣坏死率，并采用免疫荧光法检测CD31阳性标志的远端微血管密度。另外，通过EdU细胞增殖实验、平板划痕、Transwell和基质胶成管实验观察比较Fasudil和Y27632在体外对人脐静脉内皮细胞系（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）增殖、迁移、侵袭及小管形成能力的影响，以DMSO处理作为对照。 结果 术后第5天Fasudil组小鼠的皮瓣坏死率为（2.0±1.5）%，显著低于Y27632组（P<0.001）和对照组（P<0.001），Y27632组也显著低于对照组（P<0.001）。Fasudil组小鼠术后第0天和第5天的蒂部髂腰动脉管径分别为（143.8±4.2）μm和（177.6±7.6）μm，均显著大于对照组和Y27632组（均P<0.001）。术后第5天Fasudil组小鼠的近、远端血流量分别为（453.0±12.5）和（79.2±4.8）个灌注单位，皮瓣远端存活组织中微血管密度为（71.6±3.5）条/区域，均显著高于对照组（P<0.001）和Y27632组（P<0.05）。Y27632组术后第0天的蒂部髂腰动脉管径小于对照组（P<0.05），术后第5天两组相比无明显差异（P＞0.05）；术后第5天的近、远端血流量亦显著高于对照组（P<0.001），微血管密度亦显著高于对照组（P<0.05），但远端血流量与对照组无明显差异（P＞0.05）。体外细胞实验结果显示，Fasudil组和Y27632组的HUVECs增殖率、迁移率和侵袭细胞数均比对照组显著升高（P<0.001），但两药物组之间差异无统计学意义（P>0.05）；Fasudil组的小管形成能力显著优于Y27632组（P<0.05）。 结论 Fasudil和Y27632均能有效促进血管新生并提高皮瓣存活率，但Fasudil的作用效果更显著，可能与其对血流动力学及血管稳定性的持续调节有关。

目的 通过观察脓毒症状态下SD大鼠肝素结合蛋白（heparin-binding protein，HBP）、凝血功能指标及血管内皮损伤标志物的动态变化，分析各指标间的关联特征，阐明HBP在脓毒症相关性凝血紊乱中的调控作用。 方法 取18只8～12周龄SPF级雄性SD大鼠，采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型，于建模前（0 h）及建模后3 h、6 h、9 h进行心脏采血，利用血栓弹力图（thromboelastography，TEG）技术（含肝素酶杯）检测普通杯和肝素酶杯凝血反应时间（R值）之差（ΔR），以评估凝血功能及内源性肝素效应。采用ELISA法测定血浆中HBP、硫酸乙酰肝素（heparan sulfate，HS）、多配体蛋白聚糖-1（syndecan-1，SDC-1）及血栓调节蛋白（thrombomodulin，TM）水平。将ΔR≥2 min的标本归为ΔR≥2 min组，将ΔR<2 min的标本归为ΔR<2 min组。运用相关性和接受者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析、评估HBP浓度与各指标间的关系及其对ΔR值的预测效能。 结果 与0 h相比，ΔR、HS、SDC-1和HBP水平在建模后显著升高（P<0.01）。ΔR≥2 min组大鼠的HBP、SDC-1和HS水平显著高于ΔR<2 min组（P<0.05或P<0.01）。HBP与ΔR、HS呈显著正相关（P<0.05）；ΔR与HS呈显著正相关（r=0.799，P<0.01），与SDC-1呈弱正相关（r=0.289，P<0.05）。HS、HBP和SDC-1对ΔR≥2 min具有显著预测价值（P<0.01）。 结论 脓毒症早期，糖萼降解释放HS类抗凝物质可引起凝血紊乱，而HBP可反映该病理进程，在脓毒症相关凝血紊乱的发生发展中发挥重要调控作用。

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S. aureus）是一种临床高发的革兰氏阳性致病菌，可导致皮肤软组织感染、肺炎、败血症及感染性心内膜炎等疾病。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的出现与流行给临床治疗带来了巨大挑战。动物模型是深入解析其致病机制、耐药机制以及评估新型抗感染策略的重要工具。皮肤软组织感染模型、骨髓炎与内置物相关感染模型、肺炎模型以及感染性心内膜炎模型是金黄色葡萄球菌感染研究中4类常见的成熟模型。本文系统阐述了这4类模型的实验动物选择依据、主流建模方法、应用场景以及各自的优势与局限性。这4类模型常用的实验动物包括小鼠、大鼠、兔、猪等。皮肤软组织感染模型造模快、成本低，但难以模拟复杂的慢性病灶；骨髓炎与内置物相关感染模型多用于模拟细菌生物膜形成及慢性感染的过程；肺炎模型多用于研究急性肺损伤与药效评价；感染性心内膜炎模型多用于研究赘生物的形成机制和评估药物对深部感染的疗效。由于实验动物与人类免疫系统存在固有差异，这些现有模型普遍存在缺陷，如多数动物模型采用了较高的细菌接种剂量，且实验周期较短，难以完全复现临床慢性感染过程等。未来可通过发展人源化动物模型及器官芯片等体外系统有效克服物种差异，并整合共病因素以提升临床相关性，以及采用多模态动态评估体系，建立非动物替代方案。本文旨在为合理选择、优化和应用金黄色葡萄球菌感染动物模型提供系统的理论参考，以期推动抗感染研究领域的发展。

目的 评估近红外二区（near-infrared-Ⅱ，NIR-Ⅱ）稀土下转换纳米颗粒（down-conversion nanoparticles，DCNPs）作为新型造影剂用于标记脂肪来源间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells，ADSCs）的可行性，并探讨其在亚急性肝损伤小鼠模型中进行活体示踪的潜在应用价值。 方法 采用高温热分解法合成核壳结构下转换纳米颗粒NaYF₄：Yb³⁺，Er³⁺@NaYF₄，经二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）表面修饰后制备水溶性DCNPs，并进一步偶联异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）以观察ADSCs对DCNPs的摄取情况。采用CCK-8实验检测DCNPs和ADSCs共孵育24 h、48 h的细胞活力；用激光共聚焦显微镜评估不同探针浓度和培养时间下DCNPs对ADSCs的标记效率；采用NIR-Ⅱ荧光成像检测DCNPs标记的ADSCs在体外连续培养过程中荧光信号随培养时间的动态变化；通过流式细胞术及分化实验分别评估DCNPs标记对ADSCs表面抗原表型及多向分化功能的影响。将DCNPs标记的ADSCs通过尾静脉一次性移植进SPF级雄性SD大鼠体内，1个月后采用血常规、血清生化分析以及多器官病理学检查评估其长期毒性反应。采用四氯化碳（CCl₄）诱导法构建SPF级雄性BALB/c小鼠亚急性肝损伤模型，通过尾静脉回输DCNPs标记的ADSCs后，使用NIR-Ⅱ荧光成像系统示踪ADSCs在动物体内的归巢情况，并采用肝功能指标生化分析和HE染色法检测DCNPs示踪对ADSCs治疗的影响。 结果 本研究合成的NaYF₄：Yb³⁺/Er³⁺纳米颗粒为球形晶体结构，粒径约20～30 nm，具有较好的水分散稳定性。选用0～500 μg/mL DCNPs标记24 h和48 h均对ADSCs不产生细胞毒性。DCNPs的细胞标记效率随着剂量增加而提高，16 h内细胞摄取量基本稳定。DCNPs的NIR-Ⅱ荧光信号在ADSCs体外培养早期可维持稳定，培养第3天时荧光强度出现下降（P=0.003），但第8天时细胞内仍可检测到明显的荧光信号。DCNPs标记对ADSCs的干细胞表型及多向分化功能无明显影响。标记有DCNPs的ADSCs移植至正常SD大鼠体内1个月后，血常规、血清生化分析和多器官组织病理学检查结果均显示无明显的体内毒性反应。将DCNPs标记的ADSCs通过尾静脉回输给亚急性肝损伤模型小鼠后，血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）水平明显降低（均P<0.05），肝组织中炎症细胞浸润明显减少；而且活体示踪结果显示其1 h内可归巢、迁移至肝脏，并且随着时间推移，荧光信号逐渐减弱，24 h后富集在肝脏的荧光信号明显减弱。 结论 DCNPs具有良好的生物相容性，可用于ADSCs标记，且不影响干细胞治疗，有望实现亚急性肝损伤治疗过程中干细胞归巢与迁移的实时、高信噪比活体示踪。

目的 设计一种兼具肉眼染色与磁共振（magnetic resonance，MR）T₁/T₂双模态显像功能的纳米碳-二氧化锰（carbon nanoparticle–manganese dioxide，CN-MnO₂）注射液，并系统评价其理化性质、关键质量属性、生物相容性及胃肠道标记定位效能。 方法 采用温和液相原位氧化还原沉积原理制备CN-MnO₂，并进行透射电子显微镜、动态光散射（dynamic light scattering，DLS）、zeta电位（zeta potential）、X射线光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy，XPS）和X射线衍射表征检测；采用pH计直接检测CN-MnO₂的pH，采用冰点下降法测定CN-MnO₂的渗透压，采用不依赖吸光度读数的凝胶法鲎试验检测细菌内毒素；观察4 ℃避光密封保存0、5、10 d CN-MnO₂注射液的外观，并检测其水合粒径、多分散指数、zeta电位及pH；以钆喷酸葡胺（gadopentetate dimeglumine，Gd-DTPA）作为阳性对照，设置不同浓度梯度，测定弛豫时间T₁、T₂，从而构建体外浓度-MR显像效能（r₁、r₂）曲线，比较弛豫效能并确定后续体内实验工作浓度；采用噻唑蓝比色法（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）、活/死细胞（live/dead）染色法评价细胞相容性。选取16只6周龄雄性SD大鼠，随机分为实验组和对照组，每组8只，皮下注射总Mn浓度为0.80 mmol/L的CN-MnO₂注射液或等体积生理盐水，通过定期监测体重、对主要脏器进行组织学HE染色观察、血常规与血清生化检测、炎症因子检测及电感耦合等离子体发射光谱法检测，以评价CN-MnO₂的短期体内安全性。选取8只5～6月龄的雄性巴马小型猪，随机分成CN-MnO₂注射液组（n=6）及纳米碳混悬注射液（carbon nanoparticle suspension injection，CNSI）组（n=2），分别在胃、小肠和结肠浆膜下注射CN-MnO₂注射液或CNSI，于注射完成后5 min内测量并记录各注射点晕染的最大直径，并于注射后第3、7天行MR T1WI/T2WI扫描，评价注射部位MR显像效果，末次观察后取注射部位（胃、小肠、结肠）及主要脏器，通过HE染色进行组织病理学评价。 结果 CN-MnO₂注射液呈现黑色悬液状态，于室温（20～25 ℃）下静置15 d后未见明显团聚沉降，其平均水合粒径为（228.7±15.3）nm，多分散指数为0.184±0.021，zeta电位为（-24.6±2.8）mV；XPS显示CN-MnO₂主要由C、O和Mn元素组成，其中O元素含量占68.82%，Mn 2p在642.4 eV、653.1 eV呈现双特征峰；X射线衍射显示δ-MnO₂以低结晶度分散于碳基质中；其pH值为6.82±0.06，渗透压为（298.4±6.7）mOsm/kg，细菌内毒素水平低于检测限；体外MR显示，CN-MnO₂具有明显浓度依赖性，r₁及r₂分别为9.6 L·mmol⁻¹·s⁻¹和17.2 L·mmol⁻¹·s⁻¹，具备较好的T₁/T₂对比效能，且均优于Gd-DTPA；在0.80 mmol/L浓度下，CN-MnO₂的体外细胞实验未见明显细胞毒性。CN-MnO₂在SD大鼠体内的短期安全性评价均未见明显炎症反应、肝肾功能损伤或主要脏器Mn异常蓄积。巴马小型猪体内实验显示，CN-MnO₂组胃、小肠和结肠晕染平均直径分别为（0.65±0.12）cm、（0.61±0.11）cm和（0.58±0.10）cm，不同注射部位晕染直径差异无统计学意义（P>0.05），但CN-MnO₂组平均晕染直径明显小于CNSI组（P<0.05）；MR检查显示，CN-MnO₂组在第3天和第7天均可辨认注射部位，且第3天信号更明显；末次观察时，CN-MnO₂组的注射部位及主要脏器未见明显的异常病理改变。 结论 本研究成功制备出粒径均一且理化性质稳定的CN-MnO₂注射液，可实现胃肠道术前染色标记与MR T₁/T₂双模态显像的统一，为胃肠道术前标记定位和术中精准切除提供了新策略。

目的 本研究尝试建立半胱氨酸的细菌内毒素检查法以作为半胱氨酸热原检测的一种体外替代方法，从而减少家兔在热原检测中的使用，保障实验动物福利。 方法 参考《中国药典》（2025年版）四部通则1142和1143、指导原则9251和9301章节，对3批半胱氨酸原料药进行热原及细菌内毒素检测的方法学研究。采用家兔热原检查法、单核细胞活化反应测定法检测半胱氨酸样品中潜在的致热原，并对其中1个批次样品单核细胞活化反应测定法的细胞活力进行测定。采用凝胶限度法、光度检测技术（微量动态显色法、动态显色法、动态浊度法）检测半胱氨酸样品的潜在细菌内毒素。 结果 采用两种热原检查法检测半胱氨酸时均存在假阴性；家兔热原检查结果中，样品+内毒素组均未出现阳性反应。单核细胞活化反应测定结果显示，半胱氨酸孵育后人外周血单个核细胞中白细胞介素-6的分泌受到抑制，回收率小于50%。采用凝胶限度法检测细菌内毒素时，在不超过最大有效稀释倍数的条件下，3批半胱氨酸样品均存在干扰。微量动态显色法的干扰试验结果显示，半胱氨酸样品浓度为1.05 mg/mL时，3批样品的回收率均在50%～200%范围内，能够排除样品对内毒素的干扰，方法可行。采用微量动态显色法、动态显色法、动态浊度法检测浓度为1.05 mg/mL半胱氨酸样品的细菌内毒素，回收率均在50%～200%范围内，3批半胱氨酸样品的细菌内毒素含量均符合限值规定。 结论 本研究建立了半胱氨酸的细菌内毒素检查法，且初步证明内毒素光度检测技术可替代热原检查法用于半胱氨酸细菌内毒素检查。

目的 优化小鼠胚胎移植的技术参数（包括输卵管开口方式、假孕受体体重、单只受体移植胚胎数量、单侧/双侧输卵管移植4项技术参数），提高胚胎移植效率（以胚胎移植后受体母鼠妊娠率作为评判指标），提高优质胚胎种质资源利用率（以胚胎移植后小鼠出生率作为评判指标）。 方法 以560只SPF级ICR小鼠和440只C57BL/6J小鼠为实验对象，通过体外受精获得2细胞胚胎，采用单因素控制变量法，系统探究输卵管开口方式、假孕受体体重、单只受体移植胚胎数量、单侧/双侧输卵管移植4种因素对小鼠胚胎移植妊娠率和出生率的影响。 结果 采用26G注射器针头打孔的输卵管开口方式，受体的妊娠率可达90%，显著高于维纳斯剪剪切开口组的43%（P<0.05）。体重29～35 g的假孕受体移植效果最优（受体妊娠率为90%、幼鼠出生率为44%，且无幼崽被母鼠压死的现象）。单只受体移植胚胎数量在16～25枚组的出生率达42%，为各组最高；26～35枚组的妊娠率达90%，且胚胎利用率达到最大；而胚胎数超过35枚后移植效率显著下降。单只受体的胚胎移植数量在24～26枚，可兼顾较高的妊娠率和出生率。小鼠胚胎经输卵管双侧移植的妊娠率和出生率较单侧移植略高，但差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 选择体重29～35 g的假孕受体母鼠，采用26G注射器针头打孔的输卵管开口方式，单只受体移植胚胎的数量控制在24～26枚，能够有效提高胚胎移植成功率，实现优质胚胎种质资源的高效利用。

基因工程小鼠是解析基因功能、阐明疾病机制及推动药物研发的重要工具。随着生命医学研究对复杂遗传修饰、快速模型构建及高通量功能解析需求的不断增加，基因工程小鼠构建技术也在持续发展。本文系统梳理了基因工程小鼠构建技术的演进与应用，重点介绍以早期转基因和胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESC）同源重组基因打靶为代表的经典构建技术，以及N-乙基-N-亚硝基脲（N-ethyl-N-nitrosourea，ENU）诱变、转座子插入等随机诱变技术在正向遗传学筛选中的应用；进一步阐述以锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶及CRISPR/Cas系统为代表的可编程核酸酶在基因工程小鼠构建中的原理、特点及应用。随着基因组编辑技术的发展，Cas9衍生系统、碱基编辑、引导编辑及RNA编辑等技术进一步提高了编辑精度，拓展了遗传修饰与精准调控方式，并丰富了基因工程小鼠构建的技术选择。本文还比较了不同构建技术的优势、局限性及适用场景，并针对脱靶效应、嵌合性、遗传背景及遗传稳定性等影响模型可靠性的实践问题，归纳了相应的质量控制策略。最后，本文展望了基因工程小鼠构建技术的发展趋势，以期为相关模型的构建与应用提供参考。

目的 总结“三分”模式在实验动物从业人员培训中的应用经验，科学评估其培训成效。 方法 采用回顾性分析方法，选取2010年1月至2025年12月在福建省实验动物培训基地参加岗前培训的8 009名从业人员作为研究对象，其中2010年1月至2017年12月接受传统模式培训的1 250名人员纳入对照组，2018年1月至2025年12月接受以“岗位需求分开、考试内容分设、考试方式分类”为核心内涵的“三分”模式培训的6 759名人员作为评估组。同时采用问卷调查法评估培训效果，共回收有效问卷 1 624份，其中对照组585份，评估组1 039份。“三分”模式同步优化收费标准普惠性，对比分析两组培训后的综合能力表现及培训满意度，采用独立样本t检验、χ²检验和Wilcoxon秩和检验进行统计分析。 结果 评估组对培训效果的整体满意度为92.49%（961/1 039），显著高于对照组的77.78%（455/585）（χ²=72.50，P<0.001）；评估组在课程针对性、时间灵活性、考核合理性及收费合理性等维度的好评率、一般率、差评率均呈现更优分布特征，好评率显著高于对照组（P<0.001）。评估组综合合格率（95.53%）显著高于对照组（86.24%）（P<0.001）。 结论 科学运用“三分”模式，可精准匹配不同岗位的能力需求，优化培训与考核体系。通过收费普惠化降低参与门槛，有效提升实验动物从业人员的综合素质及培训满意度，进而实现更佳的教学效果，为实验动物及其他行业培训体系的规范化升级提供可复制、可推广的实践参考。