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2017年 第37卷 第1期    刊出日期：2017-02-25

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论著

FGF21siRNA对STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏功能的影响

陈翠, 孟哲颖, 郑元义, 胡兵, 申锷

2017, 37(1):  1-5.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.001

摘要 ( 163 )   PDF (872KB) ( 228 )  

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目的 探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)siRNA对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(T1DM)小鼠心脏功能的影响机制。方法 16只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(n=6),FGF21siRNA对照组(n=10), 16只T1DM模型小鼠分为T1DM组(n=6),T1DM+FGF21siRNA组(n=10)。T1DM模型由单次腹腔注射STZ(150 mg/kg)建立。8周后行FGF21siRNA给药。实验到达终点时采用小动物高分辨超声仪测量小鼠心脏功能;光学显微镜下HE染色观察心肌细胞形态, Masson染色观察纤维化程度,利用实时 PCR技术检测心肌组织α-肌球蛋白重链(α-MHC),β-肌球蛋白重链(β-MHC), 心房钠尿肽(ANP)、I型胶原(Col I) 和III型胶原(Col III)及FGF 21 mRNA的表达含量。结果 与正常对照组小鼠相比,T1DM小鼠的心脏功能减低,心肌细胞肥大,胶原纤维增生,伴随小鼠心肌组织 ANP、α-MHC、β-MHC、Col I、Col III mRNA表达增加,T1DM小鼠经FGF 21siRNA处理后上述表现进一步加重。结论 FGF21siRNA能降低1型糖尿病小鼠的心脏功能,其机制可能与心肌肥大和心肌纤维化有关。



ND3在自发性糖尿病长爪沙鼠5种组织中的表达

李银银, 龚菁菁, 吴绍亮, 李小红, 王存龙, 霍学云, 路静, 吕建祎, 刘欣, 郭萌, 李长龙, 陈振文, 杜小燕

2017, 37(1):  6-10.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.002

摘要 ( 221 )   PDF (758KB) ( 266 )  

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目的 分析糖尿病长爪沙鼠5种组织中ND3基因在mRNA和蛋白水平的表达,以期探索长爪沙鼠糖尿病模型中ND3的作用及其靶器官。方法 选取血糖正常对照组沙鼠和糖尿病实验组沙鼠各6只,分别采集动物的肾脏、肝脏、骨骼肌、脑和心脏组织,采用实时定量PCR和Western blotting方法检测在各组织中ND3 mRNA和ND3蛋白水平表达状况。结果 与对照组动物相比,糖尿病长爪沙鼠ND3 mRNA表达水平在肾脏组织中极显著升高,肝脏和肌肉组织中则显著降低,脑组织中仅有降低趋势,而在心脏组织中仅有升高趋势。检测ND3蛋白水平表明,除心脏组织外,其他组织均与mRNA水平表达结果一致。结论 肾脏组织可能是糖尿病长爪沙鼠ND3基因作用的主要部位,同时在其他4种组织中该基因也发挥着一定作用。



Tamoxifen诱导敲除多囊肾小鼠Pkd1基因后的肾脏病理变化

周卫民, 朱科燕, 陈方明, 蔡月琴, 方明笋, 齐月寒, 陈民利

2017, 37(1):  11-14.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.003

摘要 ( 336 )   PDF (676KB) ( 309 )  

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目的 探讨Tamoxifen诱导下敲除Pkd1^f/f:Cre转基因小鼠多囊肾病1(Pkd1)基因前后的肾功能变化情况。方法 选用出生11 d的Pkd1^f/f:Cre转基因小鼠和Pkd1f/f野生型小鼠用Tamoxifen进行诱导, 分别于诱导后7 d、14 d、21 d检测血清肌酐与尿素氮含量, 检测21 d时体质量、肾脏重量及其脏器系数。结果 诱导敲除后7 d小鼠血清肌酐与尿素氮含量开始升高, 14 d、21 d小鼠血清肌酐与尿素氮含量明显升高(P<0.01)。21 d时诱导敲除小鼠肾脏系数明显高于未敲除小鼠。结论 Tamoxifen能使条件诱导敲除pkd1基因的小鼠肾功能产生明显改变, 肾组织出现大量囊泡症状。



侧脑室注射神经节苷脂钠对脑瘫模型大鼠学习记忆能力的影响

杨凤翔, 张小乔, 罗秀玲

2017, 37(1):  15-19.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.004

摘要 ( 192 )   PDF (451KB) ( 237 )  

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目的 探讨神经节苷脂钠(GM)侧脑室注射对脑瘫模型大鼠学习记忆能力的机制,为临床治疗脑瘫提供理论依据。方法 将36只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组和GM组。模型组和GM组大鼠通过切除大脑皮质及部分脑组织建模。成模后1 d、10 d、20 d、30 d用大鼠脑定位仪经大鼠侧脑室注射GM给药。在成模后和未次给药后用水迷宫仪进行空间探索实验、定位航行、悬吊、斜坡等实验,比较大鼠学习记忆能力及运动能力改变,并采用ELISA测定脑海马区乙酰胆碱 (Ach)及眶静脉血乙酰胆碱脂酶(AChE)活性; 脑组织液钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II(CaMKII) 及钙调蛋白(CaM)。结果 与模型组比较, GM组大鼠治疗后找到平台时间及斜坡实验时间显著缩短; 悬吊时间、第一象限和中环停留时间明显延长; 定位航行中潜伏期、游泳距离缩短, 脑海马区Ach含量降低、AChE活性增强; 脑组织液CaMK II及CaM 增高(P<0.05)。结论 GM可明显抑制脑瘫模型大鼠脑组织液CaMK II和CaM合成, 降低神经细胞钙蛋白水解和钙内流, 并通过阻断CaMK II这一信号传导通路, 提高AChE活性, 抑制Ach释放来降低大鼠因脑缺血缺氧对中枢神经造成的损伤, 使受损脑神经纤维修复和再生, 进而促进中枢神经纤维功能恢复来提高学习记忆能力。

非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠模型的建立及炎症因子的表达

杨华, 赵亚娟, 欧强

2017, 37(1):  20-24.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.005

摘要 ( 187 )   PDF (1378KB) ( 266 )  

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目的 建立非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠模型,观察其病变及炎症因子的表达情况。方法 20只雄性C57BL/6J小鼠随机分成对照组、非酒精性脂肪性肝纤维化模型组。对照组小鼠予以蛋氨酸-胆碱充足(MCS)饲料喂养,模型组小鼠予以蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饲料喂养造模。于造模8周末处死小鼠。观察肝脏组织病理学变化,检测小鼠血清草氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)肿瘤坏死因子-〈(TNF-〈)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 造模8周末,模型组小鼠体质量显著下降。肝组织病理学观察显示严重肝脂肪变,肝细胞水肿,可见点灶状坏死及淋巴细胞浸润,局灶见界面肝炎,汇管区扩大,纤维组织增生。模型组小鼠肝脏炎症活动度得分和纤维化得分均显著高于对照组(P<0.01)。模型组小鼠血清ALT、AST、TNF-〈、IL-6与对照组比较显著升高,而TG和TC水平显著下降(P<0.01)。结论 小鼠经MCD饲料喂养8周出现严重肝脂肪变、肝纤维化和炎症因子高表达,表明成功诱导小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型。该方法造模简单,成模快,存活率高,适合用于非酒精性脂肪性肝纤维化发病机制和药物干预等方面的研究。



上海地区常用近交系小鼠品系的单核苷酸多态性分型研究

韩琳, 谢建云, 杨斐, 胡樱, 田立立, 鲍世民

2017, 37(1):  25-31.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.006

摘要 ( 213 )   PDF (631KB) ( 255 )  

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目的 比较上海地区常用近交系小鼠单核苷酸多态性(SNP)位点分型情况。方法 采用多重PCR-LDR检测技术,选取上海地区2家单位的10个近交系小鼠,对21条染色体上的44个SNP位点进行分型检测,同时,随机选取上海地区2个近交系品系作为双盲样本,对分型方案进行验证,差异位点利用测序法进行验证。结果 同一来源的10个近交系小鼠,同品系间SNP分型结果完全一致;不同种群来源6个品系SNP分型结果提示, BALB/c,FVB, DBA/2和C3H/He在44个位点上分型结果均相同,CBA和C57BL/6分别在7个和2个位点存在差异; 差异位点经测序验证结果与SNP分型方案一致。结论 上海地区常用近交系小鼠中,同一来源的品系中SNP遗传质量具有良好稳定性和一致性,不同种群来源的相同品系间SNP分型存在差异。

大鼠细小病毒双重PCR检测方法的建立

饶丹, 朱余军, 伍妙梨, 袁文, 王静, 尹雪琴, 丛锋, 练月晓, 黄碧洪, 徐凤娇, 刘向楠, 刘助红, 黄韧, 张钰, 郭鹏举

2017, 37(1):  32-35.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.007

摘要 ( 232 )   PDF (851KB) ( 253 )  

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目的 建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法。方法 根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病毒(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、KRV、 RMV)的双重PCR方法。根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1、KRV和RMV的引物。结果 两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000 拷贝/μL。双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本。结论 本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法。



不同因素对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠模型效果的影响

宋莹, 郭雅娟, 黄铭倩, 梁金强, 黄芝瑛

2017, 37(1):  36-39.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.008

摘要 ( 231 )   PDF (332KB) ( 279 )  

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目的 探究环磷酰胺(CY)剂量和检测终点对BALB/c小鼠免疫抑制模型效果的影响。方法 将BALB/c小鼠按照体质量随机分为对照组、CY 40 mg/kg组、CY 60 mg/kg组,此三组均设末次给药后第5日为检测终点,并设CY 60 mg/kg-2组,末次给药后第3日为检测终点,检测终点时进行血液学检查,测定脾脏、胸腺的脏器重量,检测T、B淋巴细胞介导的免疫功能改变。结果 与对照组相比,各模型组上述检测指标均有不同程度的改变; 比较各模型组结果,当检测终点相同时,60 mg/kg剂量造模效果更好; 固定CY剂量,选择末次给药第3日为检测终点效果更优。结论 CY剂量和检测终点的不同会影响BALB/c小鼠免疫抑制模型效果,选择60 mg/kg CY剂量的造模效果优于40 mg/kg; 末次给药后第3日更适合作为免疫评价模型的检测终点。

小鼠剪尾出血模型的优化

田靖, 崔庆华, 郭平, 张志晓, 冯子良, 郑颖, 范泉水

2017, 37(1):  40-45.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.009

摘要 ( 542 )   PDF (699KB) ( 308 )  

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目的 探讨小鼠剪尾出血模型在凝血药物体内评价过程中应用的可行性。方法 对传统鼠尾出血模型实验过程进行考察和比较分析,对小鼠剪尾模型制备方法进行优化,建立了一种可快速准确检测鼠尾出血量和出血时间的方法。并利用商品化凝血酶药物苏灵验证了该方法在凝血药物药效学评价中的有效性,对鼠尾出血量(出血时间)与小鼠凝血时间指标的敏感性比较也显示了此模型的优越性。结果 优化后的鼠尾出血模型可对小鼠出血量进行低至微升级的精确检测,通过一定时间间隔的出血量来确定出血终点的方法,很大程度上消除了实验中的人为误差。该模型操作简便、易于使用,可以敏感且有效模拟体外创伤的动物模型,在评价凝血药物的药效中发挥作用。结论 小鼠剪尾出血模型可以敏感反应凝血药物的体内作用,可作为凝血药物初步筛选和评价的有效工具。



单笼与群居饲养对雌性食蟹猴情绪的影响

李伟, 金益, 邢正弘, 陈国强

2017, 37(1):  46-49.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.010

摘要 ( 218 )   PDF (408KB) ( 223 )  

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目的 了解单笼与群居饲养雌性食蟹猴的血清单胺类神经递质[去甲肾上腺素(NA)、5羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)]及与情绪相关的心电、血压的差异,探讨生活环境对食蟹猴情绪的影响。方法 选取9只4~6岁雌性食蟹猴,前5个月单笼饲养,后5个月群居饲养,分别测量其心电、血压、NA、5-HT、DA、日常表情行为等相关指标。结果 整个实验期间, 心电参数中的心室率、PR间期、QT间期及血清单胺类神经递质(NA、5-HT、DA)、血压中的舒张压值等指标组间比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。单笼阶段的愤怒、焦虑因子得分显著高于群居; 性行为、活动度、快乐因子得分显著低于群居(P<0.05)。结论 食蟹猴更适合群居饲养, 如果长期单笼饲养,将对其血清单胺类神经递质及心电、血压参数中某些指标产生较大影响, 并易于产生多种负面情绪。

三品种实验用小型猪繁殖性能测定

杨李厂, 周文兵, 丁隽, 周新初, 谢东, 杨伟敏

2017, 37(1):  50-54.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.011

摘要 ( 345 )   PDF (366KB) ( 255 )  

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目的 选取饲养于上海地区的巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪,分别测定三品种母猪和公猪的繁殖性能。方法 采用场内结合实验室测定的方法,分别测定初情年龄、初配年龄等母猪繁殖性能指标及性行为年龄、初配年龄等公猪繁殖性能指标。 结果用单因素方差分析比较。结果 对比巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的母猪繁殖性能10个指标,贵州小型猪和版纳小型猪的初生窝重和断奶成活率存在显著差异(P<0.05)。分析三品种的公猪繁殖性能,群体间性行为年龄存在显著差异(P<0.05); 三品种初配年龄比较接近; 比较初配年龄和初配体质量,表明三品种的小型猪在相同初配年龄时,巴马小型猪个体偏小,版纳小型猪的体质量最大。结论 系统测定了雌性和雄性巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的繁殖性能,为实验用小型猪提供了遗传育种工作的基础,也为小型猪实验动物化提供了背景数据。

新疆子午沙鼠尿液采集方法的建立及尿液部分生化指标的测定

徐艺玫, 史深, 罗芸, 燕顺生, 赵红琼, 廖力夫

2017, 37(1):  55-58.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.012

摘要 ( 255 )   PDF (474KB) ( 247 )  

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目的 建立子午沙鼠尿液采集方法,测定分析野生子午沙鼠尿液部分生化和电解质指标,并与SD大鼠尿液生化指标进行比较。方法 在实验室内适应性饲养野生子午沙鼠3个月,采用自制尿液收集装置采集40只子午沙鼠和40只SD大鼠24 h尿液,用于尿液部分生化与电解质指标测定。结果 自制装置可成功收集子午沙鼠和SD大鼠24 h尿液。子午沙鼠24 h的尿液量为3~3.5 mL, 1.5月龄SD大鼠为8~10 mL。肉眼观察, 子午沙鼠和SD大鼠的尿液多为黄色、透明、有氨味。子午沙鼠尿液pH为7.80±0.40; 尿比重为1.011±0.005; SD大鼠尿液相应数值为7.12±0.03和1.018±0.003。子午沙鼠和SD大鼠的生化指标大多为阴性, 但有个别动物样本有不同程度的阳性。子午沙鼠尿液电解质指标在捕获地区间和性别间均未见明显差异(P>0.05)。结论 本文建立的尿液采集方法和测定结果为子午沙鼠实验动物化和相关研究提供基础资料。



胡椒根提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用

王慧, 卓书洪, 高雨

2017, 37(1):  64-67.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.014

摘要 ( 177 )   PDF (685KB) ( 235 )  

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目的 对比研究胡椒根两种提取物对大鼠骨关节炎模型的治疗作用。方法 建立关节内注射木瓜蛋白酶诱发骨关节炎模型, 分别通过设立高、低剂量组、模型组及阳性对照组等多个组别, 研究造模4周中两种提取物各个剂量组对大鼠体质量、膝关节直径、关节腔表面状态、及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α), 白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。结果 所有造模动物在实验2周时体质量增长较空白对照组有较大程度减轻(P<0.05)。除醇提物低剂量组外, 膝关节直径变化量与模型组比较, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。在血清TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子测定中, 挥发油高剂量组、醇提物高剂量组与空白对照组比较, 差异不具有统计学意义(P>0.05), 但醇提物高剂量组数值多显示出边缘显著现象(P接近0.05)。结论 胡椒根两种提取物在本次试验中所用剂量对骨关节炎模型均有一定程度改善作用, 但挥发油提取物高剂量组效果较好。



经验交流

关于实验动物行业高端复合型管理人员培训体系建设的几点思考

杨文静, 崔淑芳

2017, 37(1):  68-70.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.015

摘要 ( 140 )   PDF (378KB) ( 228 )  

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实验动物学属于新兴跨学科专业,其发展与生物医药领域的进步息息相关。为了保证实验动物行业持续健康发展,作者期望探索一种适用于实验动物行业的培训体系,为实验动物行业打造一批具备系统专业知识,具有全球战略眼光,拥有较强管理创新能力、市场开拓力以及社会责任感的复合型高端管理人员队伍。

实验动物从业人员远程培训考核指标体系初探

余琛琳, 崔淑芳

2017, 37(1):  71-75.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.016

摘要 ( 144 )   PDF (394KB) ( 244 )  

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根据实验动物从业人员远程培训考核指标体系的构建原则,联合运用层次分析法和德尔菲法,构建了符合考核指标体系的各项指标内容及其权重系数,初步制定实验动物从业人员远程培训考核指标体系,为实验动物从业人员远程培训考核提供较为客观、系统的评价标准。

综述

PI3K/Akt和AMPK信号通路在运动诱导的啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达中的作用

张云丽, 王林, 刘铁民

2017, 37(1):  76-82.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.017

摘要 ( 265 )   PDF (329KB) ( 315 )  

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骨骼肌在葡萄糖稳态中扮演重要作用,葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,GLUT4)作为骨骼肌内最主要的葡萄糖转运蛋白,其转位和表达的变化与胰岛素抵抗的发生密切相关。本文综述了近年来关于啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达的运动激活以及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路介导运动改善骨骼肌葡萄糖摄取的研究进展,旨在为全面了解和明确运动影响啮齿动物骨骼肌内GLUT4转位和表达的机制。