实验动物与比较医学 ›› 2017, Vol. 37 ›› Issue (1): 32-35.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.007
饶丹, 朱余军, 伍妙梨, 袁文, 王静, 尹雪琴, 丛锋, 练月晓, 黄碧洪, 徐凤娇, 刘向楠, 刘助红, 黄韧, 张钰, 郭鹏举
RAO Dan, ZHU Yu-jun, WU Miao-li, YUAN Wen, WANG Jing, YIN Xue-qin, CONG Feng, LIAN Yue-xiao, HUANG Bi-hong, XU Feng-jiao, LIU Xiang-nan, LIU Zhu-hong, HUANG Ren, ZHANG Yu, GUO Peng-ju
摘要: 目的 建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法。方法 根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病毒(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、KRV、 RMV)的双重PCR方法。根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1、KRV和RMV的引物。结果 两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000 拷贝/μL。双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本。结论 本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法。
中图分类号: