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2009年 第29卷 第6期    刊出日期：2009-06-30

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论文

单侧输尿管结扎制作免肾间质纤维化动物模型

马丹1，潘兴华2，余月明2，洪愉2，杨仁华2，马丽花2，丁亚楠2，朱向情2，陈强2

2009, 29(6):  357-360. 

摘要 ( 1205 )   PDF (506KB) ( 649 )  

相关文章 | 计量指标

目的 建立兔肾间质纤维化动物模型。方法 单侧输尿管结扎制作兔肾间质纤维化动物模型，动态观察4周，于造模前及造模后的第1、2、3周检测血肌酐、尿素氮含量及第3周采用单光子发射电子计算机断层成像仪（SPECT）扫描监测肾功能变化；第4周采用HE染色、PAS染色，观察肾组织病理变化。结果 模型组兔血肌酐、尿素氮均有明显上升，与对照组比较有统计学意义（P＜0.05）；SPECT显示左侧梗阻肾明显增大，肾实质变薄，肾显影变淡，肾小球滤过率明显低于对照组；病理学结果显示模型组兔肾间质纤维增生，呈纤维化改变，炎症细胞浸润，肾小管上皮部分脱落，浊肿，部分肾小管萎缩，肾小球有出血，余未见明显改变。结论 单侧输尿管结扎制作该模型具有明显的肾间质纤维化特征，为临床实验研究提供了实验模型。

第十一届华东地区实验动物科学学术交流会暨实验动物规范化、标准化研讨会第二轮通知

2009, 29(6):  357-357. 

摘要 ( 380 )   PDF (62KB) ( 527 )  

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HGF,EGF对体外培养大鼠肝脏干细胞增殖的实验研究

杨丽萍1，马俊勋2，袁菊芳1，张广州1，邵军石1，曾林1

2009, 29(6):  361-365. 

摘要 ( 848 )   PDF (355KB) ( 645 )  

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目的 研究肝细胞生长因子（HGF）和表皮生长因子（EGF）对体外培养的SD大鼠肝脏干细胞增殖的时间和剂量效应，为肝脏疾病的基础和临床研究奠定基础。方法 肝干细胞用无血清培养基培养，观察不同浓度和不同时间HGF、EGF及HGF和EGF联合对大鼠肝脏干细胞增殖的影响。结果 从成体大鼠肝脏分离的肝干细胞体积小、外形及胞核为圆形或椭圆形.EGF组5～160ng/ml各浓度组、HGF组10～160 ng/ml各浓度组增殖效应均明显大于对照组（P＜0.05），且当HGF浓度为20 ng/ml时，增殖效应明显大于与其它各组（P＜0.01）；HGF组加10 ng/ml EGF组中，除1、5 ng/ml外，其余各组增殖效应均明显大于对照组（P＜0.01）。20 ng/ml HGF的时间效应实验结果表明，随着作用时间的延长，对干细胞有明显的增殖效应，于第5天达到高峰，第7天较第5天略有降低.10 ng/ml EGF的时间增殖效应结果显示，随着时间的延长，于第7天达到高峰，但第7天与第5天相比没有显著差异.20 ng/ml HGF和10 ng/ml EGF联合对细胞的增殖效应结果显示，第1天作用不明显，于第3天达到高峰。结论 EGF和HGF具有明显改善SD大鼠肝脏干细胞体外无血清培养条件的作用，对离体培养的大鼠肝脏干细胞增殖具有协同促进作用。

融合条件对小鼠体细胞核移植融合率的影响

王怡1，鞠辉明2，薛整风1，杨玲1，冯亚杰2，郭磊2，袁玉国2，成勇2

2009, 29(6):  366-371. 

摘要 ( 1020 )   PDF (358KB) ( 742 )  

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目的 提高小鼠体细胞核移植过程中融合效率。方法 使用CRY-3型和CE-450型细胞融合仪对B6D2F1小鼠去核卵母细胞与该品系小鼠胎儿成纤维细胞构成的重构胚进行融合，通过PEG/DMSO对供核细胞的预处理，比较了不同融合液，不同电极形状融合槽和供核细胞代次对融合率的影响。结果 （1）以PEG/DMSO对供核细胞预处理5 min的融合率显著高于同条件下未处理组（51.11%vs 25.64%）（P＜0.05）；（2）融合液中含0.1 g/L聚乙烯醇（PVA）组的融合率高于无PVA组；重构胚在甘露醇浓度为0.32 mol/L融合液中的融合率（48.21%）高于其他甘露醇浓度组（27.78%，41.67%和30.11%）；（3）使用针状电极融合槽时的融合率（42.31%，43.13%）高于同条件下平行丝状电极融合槽组（30.43%，33.33%），其中又以在2 000 V/cm，20μs，2个脉冲时，交流电预处理30 s组最高（43.13%）；（4）供核细胞传代一次后融合率随着传代次数的增加而下降。结论 通过PEG/DMSO对供核细胞进行预处理，并在融合液中添加PVA时，结合优化的融合条件可以提高小鼠体细胞核移植过程中融合率。

《常用实验动物解剖病理取材图谱》

2009, 29(6):  371-371. 

摘要 ( 625 )   PDF (53KB) ( 494 )  

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川西亚种猕猴Mamu-A*01等位基因的筛查

孙兆增，李爱学，胡仲明，时彦胜，白杰英，曾林

2009, 29(6):  372-374. 

摘要 ( 884 )   PDF (364KB) ( 792 )  

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目的 对川西亚种猕猴Mamu-A*01等位基因的存在情况进行初步筛查。方法 随机筛选2007年出生的猕猴101只，股静脉采取抗凝血200 μl，提取基因组。根据Mamu-A*01等位基因的特异性序列设计引物，利用序列特异性引物PCR（PCR-SSP）筛查101只猕猴Mamu-A*01等位基因的存在情况。结果 从101只猕猴中筛选到6只携带Mamu-A*01等位基因的猕猴，但扩增所得到的序列与印度猕猴对应序列的同源性只有96%。结论 在川西亚种猕猴群内存在Mamu-A*01类似等位基因，但与印度猕猴有一定的差异，其作用和功能需要进一步的研究。

灰仓鼠血液生理生化指标及脏器系数性别间比较

王洪1，廖力夫2，徐艺玫2，刘双环1，马丽颖1，岳秉飞1，邢瑞昌1，贺争鸣1

2009, 29(6):  375-378. 

摘要 ( 1132 )   PDF (212KB) ( 712 )  

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目的 测定灰仓鼠的血液生理生化正常值，测定灰仓鼠的体重和内脏器官（心、肝、脾、肺、肾、肾上腺和胸腺）的重量，统计各内脏器官的相对重量，并对两性的正常值进行比较。方法 将41只8周龄灰仓鼠，采血后，测定血液生理指标和血清生化指标。用天平称量灰仓鼠的体重，解剖后称量各内脏器官的重量。结果 8周龄灰仓鼠血液生理指标中白细胞计数（WBC），红细胞计数（RBC）、血红蛋白浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）性别差异有显著性（P＜0.01），红细胞分布宽度（RDW）的性别之间有差异（P＜0.05）；8周灰仓鼠血清生化指标中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）和葡萄糖（GLU）性别之间有差异（P＜0.05）；8周龄灰仓鼠的脏器系数中，脾、右肾和右肾上腺的脏器系数性别差异极显著（P＜0.001），肺的脏器系数性别差异显著（P＜0.01），心的脏器系数性别之间有差异（P＜0.05）；脾的绝对重量性别之间有差异（P＜0.05）。结论 灰仓鼠的脏器系数、血液生理指标和血清生化指标受多种因素影响，部分指标两性间测定值有差异。

2%痢菌净透皮剂在猪体内的药物动力学及残留研究

李欣，王春梅，陈翠兰，李晶，齐元花，易维学，马冬梅，操继跃

2009, 29(6):  379-384. 

摘要 ( 1065 )   PDF (312KB) ( 747 )  

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目的 对2%痢菌净透皮剂在猪体内的药物动力学及残留研究，探讨动物经皮给药后的吸收、分布、代谢和排泄特征。方法 选用C18色谱柱，紫外检测器，检测波长381 nm；以乙腈/水/（20/80，v/v）为流动相；流速0.8 ml/min；柱温30℃；进样量60μl.对2%痢菌净透皮剂经过单次给药以后在猪体内的药物动力学进行了研究，所选猪体重为20±2 kg，给药剂量为5 mg/kg体重。结果 药时曲线符合吸收一室模型，主要药物动力学参数为：吸收速率常数K 0.356±0.028 h-1；消除半衰期t1/2ke3.18±0.62h；药时曲线下面积AUC 6.69±1.27 μg·ml-1·h；表观分布容积Vd/F 3.34±0.63 L·kg-1；清除率CLb 0.74±0.18 L·h-1kg-1；达峰时间Tp3.52±0.43 h；达峰浓度0.7±0.31 μg·ml-1.以5 mg/kg剂量连续3次给药后，于最后一次给药后的第0.5、1，2、3、5、8、14天采集各组织样品，通过测定其中痢茵净的含量研究该药物在猪体内的药物消除规律。最后一次给药3d后只能在肾脏中检测到药物，结论 痢菌净经透皮在猪体内消除迅速，且消除半衰期较短。

盐酸多西环素可溶性粉在猪体内药物动力学及残留研究

翟克影，王春梅，李晶，陈翠兰，齐元花，易维学，马冬梅，操继跃

2009, 29(6):  385-388. 

摘要 ( 1119 )   PDF (251KB) ( 801 )  

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目的 对盐酸多西环素（DOX）进行了药物动力学及残留研究，为临床合理用药提供理论依据。并阐明盐酸多西环素在猪的组织中消除规律，为休药期的制定提供参考。方法 建立DOX在猪血浆及组织中的提取方法及反向高效液相色谱（RP-HPLC）检测法。猪单次口灌5 mg/kg体重剂量给药后，于不同时间采血样和组织样，用反相高效液相色谱法测定血浆及组织中DOX的浓度：用3P97药物动力学软件处理血浆药物浓度-时间数据。结果 所建立的标准曲线相关性好，相关系数均达0.9990以上，血浆、肌肉、皮脂、肝脏和肾脏中最低检测限分别为0.075 μg/ml、0.010 μg/g、0.010 μg/g、0.020 μg/g、0.0120 μg/g；血浆及各组织中的平均回收率均在69%以上；日内变异系数小于10%，日间变异系数小于15%。房室模型分析表明，其药物时间曲线符合有吸收二室模型，动力学方程为：C=5.37e-0.15t+6.02e-0.115t-11.39e-0.25t.主要药物动力学参数为：吸收速率常数Ka0.25±0.02/h；消除半衰期t1/2β6.02±0.83 h；药时曲线下面积AUC 17.07±2.80 μg·ml-1·h-1；表观分布容积Vd/F 2.26±0.48L/kg；清除率CLb0.29±0.05 L·h-1·kg-1；达峰时间Tp5.42±0.25h；峰浓度Cmax1.09±0.26 μg/ml.通过药物动力学试验得知，以5 mg/kg体重的剂量单次口灌给药后，药物在体内吸收速度快，分布广，可以达到明显的抑菌效果；通过药物残留试验得知，药物在组织中消除速度较快。

大鼠在体脑组织灌流方法的比较

季正剑，张冬霞，张立波，邢华

2009, 29(6):  390-392. 

摘要 ( 1173 )   PDF (343KB) ( 1490 )  

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目的 获得更好的大鼠固定脑组织从而进行脑组织切片的观察，对麻醉状态下的大鼠采用几种不同方法筛选脑组织灌流合适的操作方法。方法 三组大鼠先进行麻醉，按不同方式依次从心脏灌注生理盐水和灌注4%多聚甲醛固定脑组织。切取其脑组织，对实验中所需的生理盐水的量、时间以及操作中的难易程度等进行比较。结果 三组灌流所需的生理盐水的量和时间分别为127±4.3 ml，13 min；148±5.8 ml，15 min；195±12.7 ml，20 min.结论 通过从大鼠心尖进针通过左心室向主动脉插管，同时结扎大鼠腹主动脉的灌流方式所需的生理盐水的量和时间均最少，且操作过程较容易，效果明显好于其他组别，是大鼠通过在体心脏灌流以固定脑组织的良好方法。

不同月龄p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠几种血液生化指标测定

王冬平1，孙岩松1，隋丽华1，尚书江1，吴娜1，尚世臣1，杨晓2，李慕1，孔德强1，李桂军1，凡秀1，张爱兰1

2009, 29(6):  393-396. 

摘要 ( 1278 )   PDF (179KB) ( 842 )  

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目的 测定p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠及野生型小鼠的血清生化指标，探讨几种血清生化指标在两种转基因小鼠及野生型小鼠的变化规律。方法 对p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠不同月龄11种血清生化指标进行测定并分析比较。结果 p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX转基因小鼠不同月龄、不同的指标雌雄之间t检验差异显著，并且随着月龄的变化，雌雄之间的变化规律不同。结论 p21HBsAg/HBsAg和p21HBX/HBX基因的转入对小鼠的血清生化指标具有一定的影响。

频谱水泡浴加饮用对小鼠免疫功能的影响

张嘉宁1，张建明1，黄琼2，黄俊明2，顾为望1

2009, 29(6):  397-398. 

摘要 ( 1016 )   PDF (186KB) ( 687 )  

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目的 研究频谱水泡浴加饮用对小鼠免疫功能的影响。方法 SPF级雌性KM小鼠分3组，A组为小鼠频谱水泡浴45 min/d加饮频谱水：B组为小鼠频谱水泡浴45 min/d：对照组为小鼠自来水泡浴45 min/d.实验30 d后进行小鼠脾淋巴细胞转化试验、迟发型变态反应实验、血清溶血素测定、碳廓清试验、NK细胞活性测定、抗体生成细胞检测。结果 小鼠脾淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定，A组与对照组、B组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；小鼠碳廓清试验，A组与B组、A组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；其余实验各组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。表明频谱水泡浴加饮用、频谱水泡浴均能提高淋巴细胞的转化能力，具有提高小鼠NK细胞活性的作用；频谱水泡浴加饮用能增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能。结论 频谱水泡浴、频谱水泡浴加饮用均对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有一定的促进作用，且频谱水泡浴加饮用比单纯的频谱水泡浴对小鼠免疫功能的增强效果更好。但对体液免疫作用不明显。

猕猴外伤及其感染的治疗与护理

花秀春，时彦胜，耿志贤，孙兆增，孔德强，曾林

2009, 29(6):  399-401. 

摘要 ( 1047 )   PDF (186KB) ( 879 )  

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目的 对38只病猴的治疗及其方法进行探讨和总结，以达到提高临床治愈率，寻求较为科学、有效的治疗方法。方法 针对创伤及其感染程度采用新鲜创伤和感染创伤方法进行治疗。结果 31只新鲜创伤病猴，经过认真治疗，2周内全部痊愈，治愈率为100%。7只感染创伤病猴，采用清创、抗菌消炎及合并治疗，加上精心护理，7只感染创伤痛猴中除1只感染严重未能治愈外，其它6只全部治愈。结论 外伤多发生在夏、秋季，做好季节性的防范工作很有必要。对于感染的猕猴，认真清洗创面是预防感染的最有效手段。

关于实验动物设施中环境氨气浓度测定方法的探讨

姚健，屈霞琴，王富生，张建光，秦洁，金于兰

2009, 29(6):  402-402. 

摘要 ( 967 )   PDF (113KB) ( 627 )  

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美国研究机构的动物饲养管理和使用计划简介

周艳，王建飞

2009, 29(6):  403-406. 

摘要 ( 1006 )   PDF (262KB) ( 896 )  

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随着实验动物在生物医学各领域中的广泛应用，实验动物饲养管理和使用，尤其是动物福利越来越受人们的关注。各单位应建立一套动物饲养管理和使用计划以确保在饲养和使用实验动物过程中科学地、技术地、人道地对待动物。本文旨在介绍美国实验动物饲养管理和使用计划中的几个重要组成部分，以便于全面而直观的阐述该计划的理念。

三个品种兔血液生化特性的比较

应华忠，朱科燕，陈民利，寿旗扬，吕建敏，潘永明

2009, 29(6):  407-410. 

摘要 ( 1105 )   PDF (224KB) ( 782 )  

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目的 测定和比较分析WHBE兔，日本大耳白兔、新西兰白兔血液学生化指标，揭示WHBE兔血液生化学特性。方法 选择WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔各40只，雌雄各半，耳中央动脉采血，应用日立7020全自动生化仪测定27项血液生化指标。结果 ①性别因素对WHBE兔的Ca、P、CHOL、HDL-C、LDL-C，FMN六项指标存在着显著差异（P＜0.05，P＜0.01）；②与日本大耳白兔和新西兰白兔比较，WHBE兔的部分血液生化指标与日本大耳白兔和新西兰兔存在显著差异，可能与WHBE兔的特性有关；③与人类血液生化参数比较，WHBE兔除CHOL、HDL-C、LDL-C、UA、CK、CK-MB与人类有显著差异外，其它指标均于人类接近。结论 WHBE兔可能适合于作为研究人的部分血液生化值变化扣代谢模型的实验动物。

WHBE兔网织红细胞计数与分群测定

周卫民，潘永明，陈民利，王辉，林琳，王德军

2009, 29(6):  411-414. 

摘要 ( 1114 )   PDF (229KB) ( 576 )  

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目的 测定和比较分析WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔的网织红细胞计数与分群的变化。方法 选择WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔各40只，雌雄各半，耳动脉采血，应用Bayer ADVIA 120五分类血球分析仪测定实验兔网织红细胞参数。结果 ①性别因素对WHBE兔RDwr，HDWr、CHDWr、RDWm、CHDWm、RDWg、CHDWg等有显著差异（P＜0.05，P＜0.01）；②WHBE兔的网织红细胞参数与日本大耳白兔和新西兰白兔存在着显著差异，如WHBE兔的网织红细胞参数均明显低于日本大耳白兔、新西兰白兔（P＜0.01）；③与人的血液学生理指标比较，发现WHBE兔的网织红细胞生成指数与人类接近。结论 WHBE兔网织红细胞计数与分群有其自身的特性，有可能作为人类贫血疾病等研究的模型动物。

WHBE兔血液流变学及凝血功能测定及分析

寿旗扬，陈民利，朱科燕，潘永明，彭定国，王辉，林琳，吕建敏

2009, 29(6):  415-418. 

摘要 ( 998 )   PDF (253KB) ( 874 )  

相关文章 | 计量指标

目的 检测和比较分析WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔的血液流变学及凝血功能指标，揭示WHBE兔血液流变学和凝血系统在实验兔中特性。方法 选择WHBE兔，日本大耳白兔，新西兰兔各40只，雌雄各半，兔耳中央动脉采血抗凝血，测定全血粘度、血浆粘度等16项血液流变学及凝血功能指标。结果 （1）性别因素对WHBE兔的红细胞压积、血沉、血沉方程K值、红细胞计数5项血液流变学指标存在着显著差异（P＜0.05，P＜0.01），而对凝血功能无明显影响（P＞0.05）；（2）与WHBE兔比，WHBE兔血液流变学指标与日本大耳白兔无明显差异（P＞0.05），但雌性WHBE兔PT、PT/R、PTINR明显高于雌性日本大耳白兔（P＜0.05），PT%显著低于雌性日本大耳白兔（P＜0.05）；而雄性新西兰白兔全血粘度低切、Fbg和TT明显低于雄性WHBE兔（P＜0.05），且红细胞压积显著高于雄性WHBE兔，另外，雌性新西兰白兔全血粘度高切、中切、低切、毛细管血浆粘度、全血还原粘度低切、高切、红细胞变形指数、红细胞电泳指数和卡松粘度、PT%均显著低于雌性WHBE兔（P＜0.05，P＜0.01），而红细胞压积、血沉方程K值，PT、PT/R、PTINR均显著高于雌性WHBE兔（P＜0.01）；（3）WHBE兔的血液流变学及凝血指标与人类较为接近。结论 血液流变学特性和凝血功能的测定，可为WHBE兔在生物医学领域的应用提供参考数据。

麻醉状态下 WHBE免的心电图观测

陈亮，潘永明，陈民利，张利棕，徐孝平，应华忠

2009, 29(6):  419-423. 

摘要 ( 1160 )   PDF (216KB) ( 788 )  

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目的 探讨WHBE兔作为实验性心电图观察的应用前景。方法 取成年WHBE兔、日本大耳白兔和青紫兰兔，经戊巴比妥钠溶液耳静脉注射麻醉后固定，应用多道生理记录仪描记了实验兔的心电图。结果 WHBE兔心电图的基本波形与人类相似，均为窦性心律。其心率较快，288.89±28.14次/min；P波通常出现在T波的降支上；其Q-T间期，K值较日本大耳白兔和青紫兰兔小；心电轴为40.00±36.93度。结论 WHBE兔胸导联的波形明显而有规律，所测得的电压比较高，因此胸导联在临床上实际意义较大，提示它适于做临床心电图的实验研究。

转基因RNA干扰小鼠的制备及应用

林菊芳1，施惠娟2，赵健1

2009, 29(6):  424-428. 

摘要 ( 947 )   PDF (336KB) ( 727 )  

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RNA干扰作为一种有效的工具用来产生基因转录后沉默的效果,从而抑制特定基因的表达,已经得到成功应用.转基因RNAi小鼠的出现,使得该技术在哺乳动物中研究靶基因的敲低成为可能.本文综述了转基因RNAi小鼠的制备方法,转基因RNAi小鼠的应用并展望了转基因RNAi小鼠对功能基因组研究的贡献以及应用前景.

结核分枝杆菌动物模型及其应用

刘芳1，杨华1，周文江2，范晓勇1

2009, 29(6):  429-429. 

摘要 ( 990 )   PDF (401KB) ( 624 )  

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随着WHO 2009年全球结核控制报告的发布，结核病的深入研究迫在眉睫。传统的研究已经不能满足当今世界结核病形势的需要，诸如耐多药/广泛耐药结核病问题成为人们关注的焦点。理想的结核分枝杆菌（MTB）动物模型，对研究结核病的免疫发病机理，评估抗结核新药、疫苗和诊断试剂效价具有重要的意义。根据不同的研究目的和应用，现仅就已建立的各种结核分枝杆菌动物模型及其评价展开综述，并对结核动物模型的未来与发展作一展望。