邹清雁, 张淑莲, 郑曲波, 孔祥平, 肖荣, 张宜俊
实验动物与比较医学. 2000, 20(4): 206-209.
采用孵化8~12d鸡胚,用胰酶消化,以含10%NBS的DMEM溶液为培养液,分离获得鸡胚成纤维细胞(CEF),建立了培养鸡ES细胞的饲养层细胞。经过CEF酶活力法筛选,建立了ES细胞的条件培养基,其组成配方为10%NBS、5%FBS、2.5%的鸡胚提取物,1×106/LmLIF,10μg/L人bFGF,40μg/L伴白蛋白,0.14mmolβ-ME的高糖DMEM。鸡类ES细胞(AKP阳性细胞,因未经遗传学和免疫组织化学鉴定,故称类ES细胞)在经丝裂霉素-C处理的饲养层细胞上和条件培养基中可传至9代仍保持良好的增殖能力和未分化状态。