摘要： 目的 比较改良精子冷冻液与传统冷冻液对cre转基因小鼠的精子冻存和体外受精率的影响,建立采用精子冷冻技术稳定保存两种cre转基因小鼠的方法。方法 以R18S3作为精子冷冻液和以R18S3作为基础液添加477 μmol/L 的硫代甘油(MTG)配成R18S3+MTG冷冻液,冻存Neurog3-cre和Itgax-cre雄鼠精子, 采用相同方法复苏精子。同时, 以两种cre小鼠的背景鼠C57BL/6J 作为对照组,另选用ICR和FVB小鼠用两种冷冻液冻存并复苏精子,进行体外受精,统计受精率来评价精子冷冻效果。结果 以R18S3冷冻并复苏的两种cre小鼠及野生型C57BL /6J的精子体外受精率分别为10.5%,11.6%和12.0%,无显著差异。以R18S3+MTG冷冻并复苏的精子体外受精率分别为66.4%,62.5%和67.6%,相对传统冷冻液有显著提高。ICR和FVB小鼠用改良精子冷冻液前后的体外受精率分别是34.1%,46.7%和65.7%和70.2%,后者都有所提高。结论 改良后的R18S3+MTG冷冻液能明显提高以C57BL/6J为背景的cre转基因小鼠冷冻后精子的体外受精率,对ICR和FVB品系的小鼠的体外受精率也有提高。

关键词: 精子冷冻, 传统冷冻液, 改良冷冻液, 体外受精率, cre转基因小鼠

中图分类号: 

• Q95-33