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2010年 第30卷 第1期    刊出日期：2010-01-31

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论文

实验动物与比较医学促进生物医药的发展——全球化趋势

高诚

2010, 30(1):  1-1. 

摘要 ( 941 )   PDF (59KB) ( 590 )  

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GFP和Luc双标技术在小鼠肿瘤模型建立中的应用

王晓敏1，闫明霞1，梁琳慧1，李金枝2，朱淼鑫1，吴一迁1，姚明1

2010, 30(1):  2-7. 

摘要 ( 3302 )   PDF (547KB) ( 834 )  

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目的 建立GFP（绿色荧光蛋白）/Luc（荧光素酶）双标高效表达的人肺癌细胞系和人肝癌细胞系，利用活体成像系统观察裸小鼠肺原位移植瘤和肝原位移植瘤的生长情况.方法 应用慢病毒转染的方法建立GFP/Luc双标的SPC-A-1和SMMC-7721细胞系，结合流式细胞分选技术使GFP/Luc双标表达率接近100%，分别接种于裸小鼠肺原位和肝原位，采用活体成像技术监测各稳定转染细胞在小鼠体内深部组织的表达情况.结果 成功建立了GFP/Luc双标表达率接近100%的SPC-A-1-GFP/Luc和SMMC-7721.GFP/Luc细胞系，进行裸小鼠肺原位移植和肝原位移植后，应用活体成像系统观测到裸小鼠肺原位和肝原位早期的微小病灶和晚期移植瘤的生长情况，而且，随着肿瘤移植时间的延长，移植瘤体积的增大，活体成像检测到的发光面积逐渐增大，发光强度也逐渐增加.结论 所建立的稳定表达GFP/Luc的细胞系，结合活体成像技术，能够对动物模型深部的肿瘤病灶进行活体、实时、定量检测，且灵敏度极高，为进一步研究肿瘤的发生及发展提供了理想的技术手段.

感染型脑室周围白质软化新生大鼠模型的建立

何亚芳，陈惠金，钱龙华，陈冠仪

2010, 30(1):  8-11. 

摘要 ( 1094 )   PDF (399KB) ( 965 )  

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目的 建立感染型2日龄大鼠脑室周围白质软化（PVL）动物模型.方法 48只2日龄SD大鼠随机分为假手术组和PVL模型组.脑立体定位仪下对PVL组大鼠经侧脑室注入细菌脂多糖（LPS）1μg/g，假手术组注入相同体积的无菌PBS.于造模后第5天处死取脑，进行光镜下脑白质病理评估及免疫组织化学染色检测O4阳性少突胶质细胞前体（OL）.结果 光镜下病理学观察以及免疫组化分析显示，LPS诱导引起大鼠脑白质结构明显的病理学改变以及白质内O4阳性OL前体的大量丢失.结论 经侧脑室注入LPS可建立近似人类早产儿PVL病理学特征的大鼠感染型PVL动物模型.

MNU灌肠诱导大鼠原位结肠癌及远处转移的模型建立

唐茂盛，胡志前，王伟军，姚厚山，彭欢，王强

2010, 30(1):  12-16. 

摘要 ( 1070 )   PDF (483KB) ( 1087 )  

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目的 以MNU灌肠方式建立大鼠原位结肠癌及远处转移模型，实时观察大鼠结肠癌的发生、发展及转移过程.方法 应用MNU（N-甲基-N-亚硝基脲）对SD大鼠进行灌肠，观察大鼠摄食、活动、排便等临床表现及成瘤时间、肿瘤生长、转移情况，分别于8、12、16周进行解剖，观察结肠原位肿瘤的生长及远处转移情况，通过病理分析，综合评价该模型.结果 实验大鼠未发生死亡，灌肠8周后，大鼠即可出现大便性状改变、便血、淋巴结肿大等临床症状，灌肠后12周后，75%的SD大鼠发生了结肠癌，并同时发生了多处淋巴结转移，16周后大鼠结肠原位肿瘤诱导成功率达到91.7%，病理学证实了原位结肠癌及远处淋巴结转移.结论 MNU能够通过灌肠方式有效地在SD大鼠上诱导出结肠癌及远处转移，诱导过程方便有效，贴近结肠癌的自然发生、发展过程，该模型淋巴结转移成功率较高，为结直肠癌原位生长及淋巴道转移机制，寻找新的治疗方案以及抗转移治疗等提供了理想的动物模型.

本刊第四届编委会成立大会顺利召开

2010, 30(1):  16-16. 

摘要 ( 657 )   PDF (71KB) ( 448 )  

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斑马鱼正常肝脏显微形态和超微结构的初步观察

初晓红1，濮俊毅1，2，3，包慧君1，胡建华2，3，高诚2，3，姚一琳1，徐春生1，覃君慧1，陈秋生1

2010, 30(1):  17-23. 

摘要 ( 1174 )   PDF (852KB) ( 748 )  

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目的 观察与分析斑马鱼肝脏的显微和超微结构.方法 光镜和透射电镜观察组织切片.结果 斑马鱼肝脏没有典型的门管区，静脉和胆管随机地分布在肝实质中，很难观察到动脉.肝板由两层并列的肝细胞排列成双层板状结构，以中央静脉为中心呈放射状分布，在肝板（肝细胞索）之间是血窦，肝细胞索呈弯曲、分支和吻合状态.肝细胞核大而圆，核仁分区明显，核孔数目多，且密度大，呈现细胞代谢活跃旺盛的形态.胞质中粗面内质网（RER）既有管状结构也有扁平囊状结构，扁平囊状结构的RER呈区域化的层层排列，可达二十余层.线粒体成群分布，并且与RER紧密接触，为RER合成蛋白质提供能量.电镜观察发现当细胞质富含线粒体、RER、核糖体时，核孔的数目多，细胞质内出现一定量的溶酶体，糖原在细胞质内有少量的聚集.当细胞质内有大量的糖原分布时，则核孔的数目较少，且细胞器也较少.胆管系统在肝脏内呈树枝状分布，胆小管包括细胞内胆小管和细胞间胆小管，细胞内胆小管腔内的微绒毛明显多于细胞间胆小管.本文也对内皮细胞、贮脂细胞，红细胞和淋巴细胞进行了描述.并对斑马鱼肝脏的结构与其他硬骨鱼类进行了比较.结论 斑马鱼肝细胞排列方式与其他硬骨鱼类有一定差异，也与前人的报道并不完全相同，这种差异和不同与动物种类和研究方法有一定关系.肝细胞的超微结构特征，在形态学角度证明了其活跃的合成和代谢功能.

贵州小型猪幽门螺杆菌的分离及其鉴定

高正琴1，张强2，岳秉飞1，贺争鸣1

2010, 30(1):  24-28. 

摘要 ( 1179 )   PDF (314KB) ( 686 )  

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目的 对贵州小型猪幽门螺杆菌进行分离鉴定.方法 采集1只生长发育异常迟缓的小型猪标本，采用细菌学分离培养、生化鉴定、药敏试验、血清学试验、PCR检测等方法进行鉴定，并对细菌的分子生物学特征进行分析.结果 分离到1株细菌，经鉴定为幽门螺杆菌（HPp0812）.用螺杆菌属16S rRNA基因和幽门螺杆菌ure A基因特异引物对HPp0812细菌的PCR扩增为阳性，经核苷酸序列测定分析证实上述序列与幽门螺杆菌参考株基因序列同源性高达99%.结论 首次从中国小型猪中分离到了幽门螺杆菌，为进一步研究该菌及开展流行病学调查提供了科学依据.

HBV转基因和白内障小鼠胚胎玻璃化冷冻保存

孔德强1，孙兆增1，胡仲铭1，朱士恩2，赵彦斌1，张慧洋1，时彦胜1，花秀春1，曾林1

2010, 30(1):  29-32. 

摘要 ( 988 )   PDF (218KB) ( 703 )  

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目的 研究开放拉长塑料细管法（OPS）对HBV转基因小鼠（P₂₁^HBxPHBx）和白内障小鼠（cataract mice，CM）胚胎冷冻效果.方法 采用乙二醇作为冷冻保护剂，以昆明小鼠为对照，用OPS法对CM及P₂₁^HBxPHBx两种小鼠3.5 d的胚胎进行玻璃化冷冻，并比较KM、CM及P₂₁^HBxPHBx获得胚胎数，解冻后胚胎的复苏率及发育率.结果 KM、CM及P₂₁^HBxPHBx小鼠平均获得胚胎数分别为31.12、19.32、9.14枚；解冻后的复苏率分别为95.6%、79.3%、80.3%；发育率分别为94.7%、73.8%、56.6%.表明HBV转基因小鼠的获得胚胎数明显低于昆明小鼠，解冻后三种小鼠的胚胎复苏率之间无显著差别，而解冻后发育率，P₂₁^HBxPHBx小鼠要明显低于KM小鼠.结论 转基因小鼠超排数及解冻后发育率低于昆明小鼠，而白内障模型小鼠和昆明小鼠比较不显著.

《人类疾病动物模型复制方法学》

2010, 30(1):  32-32. 

摘要 ( 476 )   PDF (53KB) ( 516 )  

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自发性Ⅱ型糖尿病模型db/db小鼠生物学特性研究

李娜，张周，冯颖

2010, 30(1):  33-38. 

摘要 ( 2285 )   PDF (497KB) ( 1088 )  

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目的 以C57BL/KsJ-db,+表型正常小鼠为对照组,研究自发性Ⅱ型糖尿病动物C57BL/KsJ-db/db小鼠的体生长曲线、糖代谢曲线、血清胰岛素水平变化,主要脏器重量、脏器系数等部分生物学特性,并探讨其肝脏、肾脏和胰腺等组织病理学变化.方法 实验为期20周,从第4周开始,每周测定db/db以及db/+小鼠体重、血糖,每2周测定血清胰岛素水平,20周龄处死,脏器、脂肪称重,部分组织用10%中性甲醛固定,制作病理切片.结果 ①db/db小鼠体重、血糖和血清胰岛素水平比同龄对照组高(P＜0.01);②db/db小鼠各脂肪系数明显大于db/+小鼠(P＜0.01),而脾脏、胰腺以及肾脏则相对萎缩,特别是脾脏和雌性小鼠的胰腺与对照组相比差异极显著(P＜0.01);③db/db小鼠肝细胞大片坏死、脂肪变性、炎细胞浸润、纤维组织增生:肾间质组织充血、水肿,肾小管内见蛋白管型、上皮细胞脂肪变性;胰岛数量明显减少、体积缩小,岛内细胞数量也相对减少.结论 db/db小鼠是一种肥胖的,伴有高血糖、高度胰岛素抵抗,肝脏、肾脏病变和胰岛功能不足的适用性Ⅱ型糖尿病动物模型.

犬心心腔主要结构的形态学观测

卫科科1，申彪2，张海涛1，张森林1，叶彬1，朱华南1，张姣3，崔小芝3，程霄4

2010, 30(1):  39-43. 

摘要 ( 985 )   PDF (312KB) ( 632 )  

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目的 观测犬心心腔主要结构，为心脏比较解剖学积累一定的资料.方法 10%甲醛固定犬心45例，一周后解剖并观测二尖瓣复合体、三尖瓣复合体、肺动脉瓣环、主动脉瓣环、肺静脉、前后腔静脉、冠状窦和卵圆窝，统计学处理后与人的心脏进行比较分析.结果 ①犬心左心室呈圆锥形，分为左心室流入道及左心室流出道，其流入道主要结构为二尖瓣复合体.二尖瓣环周径为49.16±10.00 mm，腱索总数为16.72±2.76条，左心室流出道主要结构为主动脉瓣、主动脉窦、主动脉口.主动脉瓣环周径为34.55±8.00 mm;②犬心右心室主要结构有三尖瓣复合体、肺动脉瓣、假腱索、隔缘肉柱等.三尖瓣环周径为71.03±14.02 mm，肺动脉瓣环周径为35.97±8.17 mm;③犬心左右心房的主要结构有前后腔静脉、肺静脉、冠状窦和卵圆窝.前腔、后腔静脉口径分别为43.91±10.17 mm、37.67±10.54 mm.肺静脉平均为29.44±12.71mm.冠状窦口径平均为14.12±4.00 mm.其中冠状窦口呈圆形的占89.7%，唇形的占10.3%.卵圆窝发现率为100%.结论 犬心的主要结构与人类相似，但大小及假腱索、腱索总数有一定差异.

WHBE兔的血液学指标测定与比较

应华忠，寿旗扬，陈民利，潘永明，王辉，林琳，朱科燕，王德军，徐孝平

2010, 30(1):  44-47. 

摘要 ( 882 )   PDF (232KB) ( 833 )  

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目的 测定和比较分析WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔的血液学指标，揭示WHBE兔的血液学特性.方法 选择WHBE兔、日本大耳白兔、新西兰白兔各40只，雌雄各半，耳动脉采血，应用Bayer ADVIA 120五分类血球分析仪测定红细胞、白细胞、血小板等血液细胞参数.结果 ①性别因素对WHBE兔的%NEUT、%LYMP、MCH、MCHC、RDW等有显著差异(P＜0.05，P＜/i>＜0.01)，其它指标雌雄性别间均无显著差异(P＞0.05);②WHBE兔的白细胞参数和红细胞参数与日本大耳白兔和新西兰白兔存在着显著差异，如白细胞数目明显低于日本大耳白兔(P＜/i>＜0.01)，淋巴细胞和血红蛋白含量均明显高于日本大耳白兔和新西兰白兔(P＜/i>＜0.01).结论 WHBE兔有其自身的特性，也有其兔种群的共性，WHBE兔的血液学生理指标与人类较为接近.

替米考星口服后在肉鸭体内的生物利用度研究

张楠，王春梅，吴海港，祝艳蕾，刘丽娜，刘运平，操继跃

2010, 30(1):  48-51. 

摘要 ( 1005 )   PDF (190KB) ( 890 )  

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目的 为了解替米考星在肉鸭体内的药代动力学特性及生物利用度，为替米考星在临床应用作出正确评价与指导.方法 8只健康成年北京肉鸭，采用静脉注射和口服两种途径分别以替米考星5mg/kg和20mg/kg体重剂量给药，进行体内药代动力学研究，计算其生物利用度.动物给药后72h内分点采血，用反相高效液相色谱法测定不同时间点血浆中的药物浓度.采用3p97药代动力学软件处理数据，替米考星两种给药途径的药时数据均符合二室开放模型.结果 静脉注射给药(5 mg/kg体重)的主要药代动力学参数:t_1/2α为0.076±0.0098 h、t_1/2β为7.31±0.63 h、AUC为4.50±0.30/μg·ml^-1·h^-1、CL(s)为1.12±0.069/L·kg^-1·h^-1;口服给药(20 mg/kg体重)的主要药代动力学参教:t_1/2α为1.76±0.49 h、t_1/2β为25.70±4.74 h、t_1/2ka为0.090±0.0092 h、AUC 为14.03±2.54/μg·ml^-1·h^-1、CL(s)为1.46±0.22/L·kg^-1·h^-1、t_max为0.47±0.035 h、C_max为0.75±0.056μg/ml、F为78.47%±0.15%.结论 通过剂量较正法计算出口服给药后在肉鸭体内的生物利用度为78.47%±0.1483%，表明替米考星口服给药在肉鸭体内吸收良好.

WHBE兔用于热原检查试验的初步探讨

吕建敏，陈民利，张利棕，彭定国，徐剑钦，潘永明

2010, 30(1):  52-54. 

摘要 ( 938 )   PDF (182KB) ( 826 )  

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目的 探讨WHBE兔用于热原检查试验适用性.方法 按照2005年版中对热原检测的要求，对WHBE兔进行测温.结果 WHBE兔筛选一次性合格率为74.91%，与日本大耳白兔相当，但略高于普通级新西兰兔，且WHBE兔初筛体温分布频率呈正态分布，以38.5～9.5℃居多，且体重大小对WHBE兔合格率影响不明显.结论 WHBE兔体温稳定，重复性好，适合用于热原检查试验.

两种繁殖方式对SD大鼠生产性能的比较

赵伟健，刘科，夏冠玲，张富发，王刚

2010, 30(1):  55-57. 

摘要 ( 931 )   PDF (176KB) ( 790 )  

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目的 研究SD大鼠两种繁殖方式对生产性能的影响，提供客观、科学的数据，为大鼠的规模化生产，选择合适的繁殖方法.方法 在SPF级屏障设施饲养环境下，对SD大鼠的雌雄6:1循环交配法和雌雄1:1长期同居法进行比较，对妊娠率、初生仔鼠重、平均窝产仔数、离乳仔鼠均重，离乳存活率和胎次问隔等生产性能指标的统计分析.结果 SD大鼠两种不同繁殖方法的同胎次间的比较:离乳存活率呈极显著性差异(P＜0.01);初生仔重，窝产仔数，离乳仔重，胎次间隔没有显著性差异(P＞0.05).结论 雌雄6:1循环交配法，可有效提高离乳存活率，提高种鼠的生产效率;同时，能有效控制动物种群数量和生产数量，适宜于大鼠的规模化生产.

《实验动物学教程》

2010, 30(1):  57-57. 

摘要 ( 518 )   PDF (71KB) ( 522 )  

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高胆固醇血症模型大鼠性别间血脂指标的比较

施志冲1，顾坚忠2

2010, 30(1):  58-59. 

摘要 ( 1047 )   PDF (124KB) ( 664 )  

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目的 探讨高胆固醇血症大鼠不同时期性别间血脂指标的变化趋势.方法 将20只SD大鼠，体重为160～180 g，雌雄各半，饲喂高脂饲料，经血液生化检测CHO1、TG、HDL、LDL指标，确认高胆固醇血症模型成功后再给予正常饲料，观察其血脂指标的变化.结果 发现成模后饲喂正常饲料的大鼠血脂指标随时问的增加趋于正常，但两性之间存在较大差异(P＜0.01)，雄性动物高胆固醇血症的维持时间比雌性动物要超出4周.结论 成功地建立了类似人类高胆固醇血症的动物模型，雄性动物在患有高血脂疾病后预后情况比雌性动物要差，高血脂疾病相关研究方面要注意性别差异.

结直肠肿瘤模型研究进展及其药物评价系统

周卫民1，盛弘强2，陈文斌3，蔡月琴1，陈民利1

2010, 30(1):  60-67. 

摘要 ( 810 )   PDF (492KB) ( 734 )  

相关文章 | 计量指标

本文较系统地阐述了常见结直肠肿瘤模型小鼠的制备方法、实验观察手段以及相关药物评价系统，分析了国内结直肠肿瘤相关动物模型研究不足的缺陷.该文将对结直肠肿瘤机制研究、化疗预防、药物评价开发等起到积极的参考作用.

《常用实验动物解剖病理取材图谱》

2010, 30(1):  67-67. 

摘要 ( 411 )   PDF (47KB) ( 491 )  

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哺乳动物呼肠孤病毒外壳蛋白和受体研究进展

宋宇1，2，3，4，周洁2，3，4，高诚2，3，4，胡建华1，2，3，4

2010, 30(1):  68-72. 

摘要 ( 850 )   PDF (297KB) ( 622 )  

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哺乳动物呼肠孤病毒吸附和侵入宿主细胞是感染启动的关键一步，包括病毒表面蛋白的不同区域同细胞表面不同的受体发生相互作用.病毒表面蛋白包括三种:s1、s3和m1，这三种蛋白在与受体的结合上具有不同的作用.细胞表面的受体包括唾液酸、JAM-1，未知的碳水化合物等，这些受体在病毒吸附和侵入细胞时能特异性的与病毒表面蛋白结合，被认为是病毒宿主范围和组织嗜性的一个决定因素，因此，受体与表面蛋白的相互作用的研究有助于揭示病毒的感染途径及细胞内的复制过程.本文简要介绍近年来在这方面的研究进展.

镉对斑马鱼胚胎发育毒性的研究进展

胡晓晴1，2，李卫华1，金泰廙2，丁训诚1

2010, 30(1):  73-76. 

摘要 ( 1238 )   PDF (272KB) ( 618 )  

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镉是一种广泛存在于生产和生活环境中的非必需重金属元素.镉染毒动物可出现多器官损害作用.本文综述了镉对斑马鱼胚胎体轴和肌节、血管、脑部及神经系统的发育的影响及可能机制,为深入研究镉对其他高等脊椎动物生长发育的影响提供了参考依据.