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2008年 第28卷 第5期    刊出日期：2008-05-31

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论文

B6-Co小鼠角膜病的细菌学因素探讨

邵义祥1，殷小敏2，王春中1，蒋荧梅1，管怀进2

2008, 28(5):  277-281. 

摘要 ( 833 )   PDF (239KB) ( 736 )  

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目的 探讨B6-Co小鼠角膜浑浊形成的细菌学因素。方法 以正常B6和B6-Co小鼠为研究对象，从不同日龄组的小鼠眼部取角膜分泌物或角膜刮片，分别接种到血平板和营养肉汤上，恒温培养24h。挑取菌落或肉汤管内的悬浮液涂片，革兰氏氏染色，镜检，记录结果。将纯化培养获得的细菌进行鉴定。结果 正常B6小鼠与角膜浑浊小鼠存在角膜细菌学差异。结论 B6-Co小鼠角膜混浊与微生物感染有关。

雌性猕猴情绪与体内微观指标间非线性方程构建

张惠云，魏盛，乔明琦

2008, 28(5):  282-288. 

摘要 ( 828 )   PDF (406KB) ( 921 )  

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目的 构建雌性实验猕猴宏观情绪与微观指标间非线性方程，为揭示中医肝主疏泄理论提供实验材料支撑。方法 采用猴群不同地位层级模式判别标准化方案筛选不同地位猕猴进入实验，应用《雌性实验猕猴情绪评价量表》对猕猴情绪变化予以量化，采集猕猴血尿指标进行神经介质及性激素及其调节激素检测，通过数学建模手段构建宏微观指标非线性方程。结果 肝气逆证猕猴模型5-HT含量与愤怒情绪呈非典型负相关，随5-HT含量增加，愤怒情绪积分呈下降趋势，但当5-HT含量上升到一定程度时，愤怒情绪积分反而上升。P含量增加，愤怒情绪积分呈下降趋势，前期下降较快，后期下降较慢。结论 情绪与体内微观指标间关系复杂，情绪变化波动可能与体内P、PRL、5-HT等含量变化关系密切。

长爪沙鼠载脂蛋白E4外显子的克隆初报

刘月环，石巧娟，郭红刚，马伟峰

2008, 28(5):  289-298. 

摘要 ( 948 )   PDF (1555KB) ( 966 )  

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目的 克隆并获得长爪沙鼠载脂蛋白ApoE基因E4外显子的序列。方法 根据Genbank中的相关序列，用自行设计的引物，通过常规的RT-PCR方法，从长爪沙鼠肝脏中克隆及测序得到所需要的基因序列。结果 长爪沙鼠载脂蛋白ApoE基因E4外显子长约987bp，经比较发现最终测序的结果与大小鼠ApoE基因的同源性达到了73%-74%，与人ApoE基因的同源性达到了62%，与猪、牛ApoE基因的同源性达到了60%以上，与非人灵长类ApoE基因的同源性达到了57%，用DNAstar进行编码氨基酸预测，基因共编码263个氨基酸，已向genbank提交，登录号码EU780067。结论 利用基因进化的保守性通过PCR方法可以得到长爪沙鼠载脂蛋白E4基因的序列，本实验为筛选长爪沙鼠高脂血症模型的遗传多样性标记，为培育长爪沙鼠的血脂代谢新品系打下基础。

华东地区第十届实验动物科学学术交流会会议纪要

2008, 28(5):  298-298. 

摘要 ( 525 )   PDF (62KB) ( 617 )  

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四种群东方田鼠线粒体DNA

谢建云1，2，冯洁1，柏熊3，胡建华1，高诚1

2008, 28(5):  299-303. 

摘要 ( 903 )   PDF (382KB) ( 733 )  

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目的探讨我国不同地区东方田鼠线粒体DNA D-loop多态性。方法对四个种群东方田鼠线粒体DNA（mt DNA）D-loop片段进行测序，并对测序结果用Clustal W软件进行比对，通过MEGA Version 3.1软件构建基于平均遗传距离的NJ（neighbor-joining，邻接法）分子系统进化树，用Dnasp 4.0分析所有序列的多态位点、核苷酸多样性、单倍型数目、单倍型多样性以及进行Tajima’s中性显著性检验。结果四个种群34个东方田鼠个体的mt DNA D-loop区全序列共发现19个单倍型，单倍型比例为55.88%，单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0.934±0.024和0.04334±0.00285。以台湾田鼠（Microtus kikuchii）线粒体全序列（GenBank登录号AF348082）为对照，共检测到核苷酸变异位点172个，约占核苷酸总数的18.66%。由分子系统进化树可发现所有34只东方田鼠分为两大类，小体型黑龙江东方田鼠为一类，其他三个种群东方田鼠为另外一类，在这一类别中，又有两个分支，其中所有宁夏种群鼠及3只大体型黑龙江种群鼠为一个分支，所有洞庭湖种群鼠和其他5只大体型黑龙江种群鼠为另一个分支。结论我国东方田鼠在mt DNA D-loop片段存在种内遗传多态性，种群内和种群间都存在一定的遗传变异，并且黑龙江小体型种群东方田鼠表现出与其他三种群东方田鼠更大的差异水平。

小鼠体外受精及其胚胎体外培养的比较研究

贾青1，2，高娟1，2，杨博2，3，刘丽均2，郁丽丽2，徐平2，芮荣1

2008, 28(5):  304-308. 

摘要 ( 1262 )   PDF (278KB) ( 764 )  

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目的 通过比较不同品系小鼠体外受精情况以及不同培养液对C57BL/6J小鼠胚胎体外培养效果的实验，进一步完善小鼠体外受精和早期胚胎体外培养体系。方法 对C57BL/6J、DBA/2、FVB/NJ、BALB/c、KM、ICR及BARRⅡ小鼠进行超排和体外受精，并对C57BL/6J小鼠体外受精后的2-细胞胚胎用HTF、CZB、KSOM、M16、HECM五种培养液在相同条件下进行体外培养到囊胚，计算4-细胞～囊胚的发育率。结果 各品系小鼠平均排卵数为13.0～38.7个（P＜0.01），体外受精率为70.2%～92.8%（P＜0.05）。不同培养液至4-细胞的发育率为60.3%～95.8%，其中KSOM的4-细胞发育率为95.8%，最适合2-细胞向4-细胞的发育。8-细胞发育率为52.8%～91.1%，桑椹胚发育率为40.6%～87.5%，囊胚发育率为5.1%～75.4%，各阶段胚胎发育率均差异显著。其中适合于金黄仓鼠桑椹胚、囊胚发育的HECM-2并不支持C57BL/6J囊胚的发育，其囊胚发育率只有5.1%，CZB最适合其囊胚的发育。结论 遗传背景是影响小鼠超排及体外受精效果的主要因素之一。葡萄糖的存在不利于克服2-细胞发育阻断，胚胎在8-细胞期以前，主要能源物质不是葡萄糖，直到桑椹胚后期，葡萄糖才是主要的能量物质。磷酸盐可引起胚胎发育阻断。氨基酸和EDTA有利于克服胚胎发育阻滞。

《人类疾病动物模型复制方法学》已经出版

2008, 28(5):  308-308. 

摘要 ( 480 )   PDF (54KB) ( 562 )  

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德国牧羊犬运动前后生理生化指标的比较

缪勤，张汇东，温海，顾劲乔

2008, 28(5):  309-312. 

摘要 ( 920 )   PDF (223KB) ( 1130 )  

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目的 比较德国牧羊犬运动前后生理生化指标的变化。方法 随意选取5头受训的德国牧羊犬进行1200m长距离奔跑，对奔跑前后的体温、心率、呼吸率等生理指标和葡萄糖、血尿素等生化指标进行测试，并对结果进行统计分析。结果 奔跑1200m后，体温升高、心率和呼吸加快，肌酸激酶、乳酸脱氢酶和尿素氮显著升高；血清葡萄糖、肌酐和血清钙显著下降；休息30min后，体温、心率和呼吸均恢复，而肌酸激酶、乳酸脱氢酶和尿素氮有所回降，血清葡萄糖、肌酐和血清钙则有所回升。结论 德国牧羊犬运动前后生理生化指标的变化规律有助于在德国牧羊犬的训练过程中，科学准确地掌握训练强度和运动量。

WHBE兔脾虚型肠易激综合征模型的建立

潘永明，张利棕，陈民利，徐剑钦，陈亮，彭定国，王德军，应华忠

2008, 28(5):  313-317. 

摘要 ( 1126 )   PDF (264KB) ( 877 )  

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目的 用WHBE兔建立脾虚型IBS模型，为脾虚型肠易激综合征（IBS）的药物开发和基础研究提供工具。方法 取WHBE兔和日本大耳白兔各18只，分别随机分成两组，即正常对照组6只，模型组12只，采用湿热应激加灌服番泻叶煎剂的方法造成脾虚证肠易激综合征（IBS）兔模型，其中模型组造模后处理6只，剩余兔自然恢复10d，观察实验兔的临床症状、体重、腹围指数、粪便含水量、胸腺指数、脾脏指数、内脏敏感性以及小肠推进率等变化。结果 与正常对照组比较，模型组实验兔体重、胸腺指数、脾脏指数均明显降低（P＜0.05，P＜0.01），腹围指数、粪便含水量、内脏敏感性以及小肠推进率明显升高（P＜0.05，P＜0.01），且恢复较为缓慢。结论 脾虚型IBS兔模型符合IBS临床发病特点，而WHBE兔是较适合于脾虚证IBS模型研究的理想的实验动物。

pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞的研究

朱靖1，窦如海1，金东庆1，杨娜娜2

2008, 28(5):  318-320. 

摘要 ( 923 )   PDF (249KB) ( 798 )  

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目的 研究pSecTag真核表达载体转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率，选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件，从而为研究目的基因在鸡胚胎成纤维细胞中成功表达奠定基础。方法 用PCR方法克隆得到EGFP基因，通过酶切、连接、转化的方法构建了pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体，设计优化试验，通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞，用Bradford检测法检测正交优化不同组合细胞培养液中所表达分泌的增强绿色荧光蛋白的相对含量。结果 成功构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体，并选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件，即脂质体加2μl、质粒加1.0μg。结论 脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞。

尿囊毒酸对大鼠血清尿酸水平的影响

张良，时乐，袁冬平，徐立

2008, 28(5):  321-323. 

摘要 ( 825 )   PDF (240KB) ( 953 )  

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目的 观察次黄嘌呤、尿酸酶抑制剂尿囊毒酸对大鼠血清尿酸水平的影响，拟建立一种新型实验性大鼠痛风病理模型。方法 采取合用次黄嘌呤和尿囊毒酸为造模药物，制备大鼠高尿酸血症动物模型，比较单用次黄嘌呤及合用尿囊毒酸对受试动物血清尿酸水平的影响，并对造模药物的量效、时效关系等因素进行了考察。结果 次黄嘌呤与尿囊毒酸合用并以适当的剂量和给药方式，可使受试动物血清尿酸稳定持续增高（≥1000μmol/L），造成实验性高尿酸血症动物模型。结论 实验证明单用次黄嘌呤不能升高大鼠的血尿酸水平，必须配合尿酸酶抑制剂尿囊毒酸，方可升高大鼠尿酸水平（P＜0.01）。采用连续给药方式，动物血清尿酸水平可大幅持续升高。

皖南山区猕猴实验动物化的初步研究

张卉1，2，6，李进华1，2，3，赵健元1，2，4，汪腾海5，胡子路5

2008, 28(5):  324-327. 

摘要 ( 1038 )   PDF (239KB) ( 623 )  

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随着生物医学研究的发展，实验用猕猴数量增加，出口需求也增多。皖南山区猕猴属于福建亚种，是具有潜在应用价值的实验动物种质资源，对皖南山区猕猴进行实验动物化，建立封闭群和普通级猕猴，可为生命科学研究提供数量与质量合格的实验猕猴。本文就皖南山区猕猴的野外分布、人工饲育、遗传特征及微生物学和寄生虫学等方面进行了初步研究，为皖南山区猕猴的实验动物化工作奠定科学基础。

两种人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较研究

何国平1，褚芳1，孙玉芳2，褚佳1，聂春莲2，余立群2

2008, 28(5):  328-330. 

摘要 ( 995 )   PDF (492KB) ( 759 )  

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目的 比较两种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型。方法 将1例人卵巢癌组织移植裸鼠，建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上，传代第十五代实体瘤细胞和人卵巢癌SKOV3细胞分别皮下移植裸鼠。观察两种人卵巢癌裸鼠肿瘤生长速度、存活时间、组织病理学检查、染色体。结果 实体瘤细胞皮下移植瘤生长速度高于SKOV3细胞皮下移植瘤（P＜0.05）。实体瘤细胞皮下移植瘤裸鼠可存活30～58d；SKOV3细胞皮下移植瘤裸鼠存活96～158d。病理检查：肉眼观察实体瘤瘤细胞皮下移植瘤：瘤为实体，血性少量腹水，有肝、脾转移；SKOV3细胞皮下移植瘤呈囊形，肿瘤长大后可出现破溃，坏死、脱落，未见腹水及肝、脾转移。组织病理显微镜观察均呈乳头状生长，癌细胞生长活跃，细胞核大小不规则，核分裂多见与人癌组织一致。实体瘤细胞皮下移植瘤染色体多为亚二倍体和多倍体；SKOV3细胞皮下移植瘤多为三倍体或四倍体。结论 实体瘤细胞与SKOV3细胞皮下移植瘤有区别，实体瘤模型与人卵巢癌更为一致，并向肝、脾转移。

蜂胶对大鼠实验性牙周炎的治疗效果

刘志勇1，谢国秀1，刘昌英1，唐震2，曾志将3

2008, 28(5):  331-334. 

摘要 ( 864 )   PDF (505KB) ( 680 )  

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目的 较为全面的探讨蜂胶对牙周炎大鼠临床症状，血液等方面的影响。方法 78只诱导成功的牙周炎大鼠模型，随机分成6组：即口泰（阳性对照）组，溶剂对照组，模型组以及3个蜂胶剂量组，每组13只。另取同龄大鼠13只为正常对照组。在成功诱导牙周炎后各组处死1只作模型对照，每组12只动物进入正式实验，4周后，观察蜂胶治疗牙周炎效果。结果 用蜂胶治疗后，各实验组牙龈未见自发出血，其中蜂胶低剂量组应用蜂胶1周时，牙龈红肿消退，溃疡愈合，萎缩修复；蜂胶三剂量组的探诊出血阳性率SBI，菌斑指数PLI，探诊深度PD，牙槽骨吸收值ABL和牙齿松动度TM显著低于模型组，表明蜂胶有较强的抗炎消肿、止血作用，并且能明显改善大鼠牙周炎临床症状；蜂胶低剂量和中剂量治疗组白细胞数与模型组比较，差异显著；中性粒细胞与模型组比较，阳性对照组和三个蜂胶治疗组均表现出极显著差异，表明蜂胶对炎性反应具有控制作用。结论 蜂胶可以明显改善大鼠牙周炎的临床症状，尤其以低剂量效果显著。

氟马西尼注射液过敏性、溶血性和局部刺激性实验研究

徐丽瑛1，丁琦1，肖小华1，饶华2

2008, 28(5):  335-337. 

摘要 ( 905 )   PDF (175KB) ( 1107 )  

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目的 评价氟马西尼注射液的安全性。方法 采用豚鼠全身用药的过敏试验、被动皮肤过敏试验、溶血试验、局部血管刺激性试验、肌肉刺激性试验考察氟马西尼注射液的安全性。结果 氟马西尼注射液全身用药的过敏试验，被动皮肤过敏试验，溶血试验、局部血管刺激性试验及肌肉刺激性试验均符合要求。结论 氟马西尼注射液的动物实验结果表明其安全可靠。

双相波体外除颤器对室颤幼猪除颤效果的试验研究

周正宇，王禹斌，周慧英，黄猛，刘慧婷，殷音，顾静，薛智谋

2008, 28(5):  338-340. 

摘要 ( 999 )   PDF (217KB) ( 897 )  

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目的 遵循《指南2005》以50J-70J-70J能量的双相波对室颤幼猪进行点击除颤，研究其除颤效果。方法 太湖猪经5mA电流诱导室颤后，50J的能量进行除颤后立即CPR（心肺复苏术），不能成功复律者能量增加至70J并继续CPR，计算成功率，心电监护、多普勒超声及血液分析测定心功能及心肌酶谱。结果 一次除颤成功率达100%，射血分数（EF）、左心室面积变化率（FAC）4h内均显著降低（P＜0.05），K⁺在除颤成功4h内显著升高（P＜0.05），72h后恢复正常，而BE在成功后3、4h明显降低（P＜0.05），72h巨检未件异常。结论 以50J-70J-70J能量电击加CPR的方案可有效的对室颤幼猪进行除颤，且无不可逆性损伤，是切实可行的。

保温措施对小鼠麻醉效果的影响

严国锋，张健，周勇，姚一康，杨伟敏，陈学进

2008, 28(5):  341-342. 

摘要 ( 842 )   PDF (108KB) ( 629 )  

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目的 研究动物实验中保温措施对小鼠麻醉效果的影响。方法 实验分为戊巴比妥钠40mg/kg、水合氯醛400mg/kg及氯胺酮100mg/kg与咪唑安定5mg/kg复合麻醉三个麻醉药物组，每组各设常温（20-22℃）和保温2个组（37-40℃），各组C57BL/6小鼠雌雄各10只，腹腔麻醉后观察各组麻醉效果。结果 各麻醉药物组内同性别比较，保温状态下的深度麻醉和麻醉后恢复自主期相对常温状态比较均有极显著差异。结论 在手术麻醉中，经保温措施可以明显缩短深度麻醉期和麻醉后恢复自主期的时间，对选择性使用短效麻醉及动物的顺利安全苏醒有实际意义。

不同月龄SD大鼠IL-2及细胞免疫水平的测定

陈冠敏，陈润，黄佳宁，张荣标，陈秀锦

2008, 28(5):  343-344. 

摘要 ( 966 )   PDF (110KB) ( 664 )  

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目的 通过不同月龄清洁级SD大鼠血清IL-2及细胞免疫水平的测定，了解大鼠机体的免疫状况。方法 选用2、5、8、11、14月龄清洁级SD雄性大鼠，采用双抗夹心ELISA法测定血清白细胞介素2（IL-2）水平；进行T淋巴细胞转化实验，采用MTT法测定OD差值a判定淋巴细胞的增殖能力；常规病理方法测量胸腺厚度。结果 各月龄大鼠血清IL-2含量、淋巴细胞的增殖能力、胸腺厚度随着大鼠月龄的增大而降低，其中11、14月龄的IL-2含量与2月龄相比降低显著（P＜0.05）；8、11、14月龄淋巴细胞的增殖能力与2月龄相比降低显著（P＜0.05）；5、8、11、14月龄的胸腺厚度与2月龄相比降低显著（P＜0.01）。结论 各月龄大鼠机体的免疫水平随月龄的增大而下降，8月龄大鼠细胞免疫水平下降显著。

国内与山东SPF鸡(蛋)生产现状、存在问题与对策

金东庆1，徐凯勇2，单忠芳3，朱果4，窦如海1，冯墨竹1

2008, 28(5):  345-348. 

摘要 ( 1026 )   PDF (258KB) ( 1089 )  

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系统阐述了山东乃至全国SPF鸡（蛋）生产现状和本行业中存在问题及解决办法；并介绍山东省SPF鸡（蛋）在国内生产的前景，并建议在山东建立SPF鸡（蛋）种子中心及相应标准化检测机构，从而提高我国SPF鸡（蛋）生产水平，加快与国际接轨的步伐。