当期目录

2018年 第38卷 第4期    刊出日期：2018-08-25

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专家论坛

畜禽疫病防控用SPF猪的开发

高彩霞, 辛畅, 陈洪岩

2018, 38(4):  245-249.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.001

摘要 ( 211 )   PDF (789KB) ( 253 )  

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本文就SPF猪在畜禽疫病防控研究中的重要性和国内外研究现状进行了阐述,分析了目前存在的问题,介绍了培育标准化SPF猪种群常用的方法,并探讨了SPF猪的应用前景,旨在为畜禽疫病防控研究用实验动物的开发提供一定的理论指导。

论著

七甲川菁荧光染料在肝细胞癌移植模型活体成像中的应用

王勤周, 张成, 李丽, 谭邓旭, 张彩勤, 师长宏

2018, 38(4):  250-254.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.002

摘要 ( 229 )   PDF (3654KB) ( 288 )  

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目的 探索七甲川菁近红外(NIR)荧光染料MHI-148在肝癌移植模型中的代谢特征,明确其识别肝细胞癌(HCC)细胞的特异性。方法 体外培养人HCC细胞系Hep3B,荧光显微镜下观察荧光染料MHI-148在肿瘤细胞中富集强度;裸小鼠皮下注射Hep3B细胞建立移植模型,2周后,荷瘤鼠腹腔注射MHI-148溶液,NIR荧光活体成像检测不同时间点肿瘤部位和裸小鼠脏器中荧光强度的变化;连续检测肿瘤部位荧光强度(tumor,T)和临近正常组织荧光强度(background,B),计算最大T/B值。结果 MHI-148染料可特异性集聚于体外培养的HCC细胞,识别绿色荧光蛋白(GFP)标记的Hep3B细胞;肝癌皮下荷瘤鼠注射MHI-148,24 h后肿瘤部位荧光强度可达8.35×10⁹/cm²,而小鼠其他脏器较少有荧光聚集;T/B值逐渐增加,并在24 h达到峰值。结论 七甲川菁染料MHI-148可特异性识别人HCC细胞系Hep3B,通过NIR荧光成像或可检测到肝癌的发生。



不同浓度四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的比较

孙家昌, 孙妩弋, 厉歆然, 彭文婷, 杜佳佳, 魏伟

2018, 38(4):  255-260.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.003

摘要 ( 739 )   PDF (5907KB) ( 591 )  

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目的 对比观察不同剂量四氯化碳(CCl₄)诱导小鼠肝纤维化模型的效果,探索一种稳定可行且较为高效的肝纤维化小鼠造模方法。方法 将60只C57BL/6J小鼠随机分为正常组和模型组,模型组小鼠分别腹腔注射体积分数10% 的CCl₄(5 mL/kg)以及体积分数20%的 CCl₄(1 mL/kg),每周2次,连续8周。分别在造模2周、4周、6周、8周注射后处死小鼠,进行HE染色和Masson染色,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,以及肝匀浆氧化/抗氧化指标,丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)和超氧化物岐化酶(SOD)变化,Western blotting法检测肝组织中胶原表达情况。结果 随着造模时间的延长,病理染色显示肝纤维化程度不断加重,胶原表达逐步增加,血清ALT、AST水平逐渐升高,肝匀浆SOD、GSH活性降低,氧化产物MDA含量升高。在造模的相同时间点,体积分数10% CCl₄、5 mL/kg剂量组相比于体积分数20% CCl₄、1 mL/kg剂量组,病理染色显示肝纤维化程度更加严重,血清ALT、AST水平明显升高,肝脏中SOD、GSH活性明显降低,氧化产物MDA含量明显升高,肝纤维化形成的时间更短,效果更好。结论 两种造模方法都能形成肝纤维化小鼠模型,但体积分数10% CCl₄(5 mL/kg)剂量组的纤维化形成时间更短且效果更好。因此,每周2次,连续8周腹腔注射10% CCl₄(5 mL/kg)可作为一种较为理想的纤维化小鼠造模方法。



不同部位注射6-羟基多巴胺建立帕金森病大鼠模型比较分析

黎民, 常学辉, 张良芝, 雷震, 罗申

2018, 38(4):  261-266.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.004

摘要 ( 305 )   PDF (7313KB) ( 173 )  

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目的 探索6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑内不同部位注射建立稳定、有效的帕金森病(PD)大鼠模型的方法。方法 SD大鼠随机分为中脑单点组、中脑双点组、纹状体单点双注组及对照组,将6-OHDA按照分组方案注入大鼠脑内,分别在注射后1周、2周、4周、8周观察大鼠的行为学变化;8周取大鼠脑组织进行病理学检测并对络氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学阳性细胞进行分析。结果 ①中脑单点组造模成功率为72.7%,中脑双点组为60.0%,纹状体单点双注组为47.6%,对照组为0% (P<0.05)。②中脑单点组第1周时PD模型大鼠平均旋转圈数为(7.3±0.2) r/min,2周时较前增加(P<0.05),4周时较前增加(P<0.05),8周时有所增加但无差别(P>0.05);中脑双点组和纹状体单点双注组平均旋转圈数亦有相似变化趋势,但相同时间点各组间平均旋转圈数无差异(P>0.05)。③中脑单点组、中脑双点组及纹状体单点双注组PD大鼠损毁侧TH阳性细胞平均积分光密度(IOD)明显比对照组小(P<0.01);中脑单点组PD大鼠损毁侧TH阳性细胞IOD比中脑双点组及纹状体单点双注组小(P<0.05)。结论 6-OHDA中脑黑质致密区单点注射法建立的PD大鼠模型成功率高,模型稳定,死亡率低。



小鼠特应性皮炎建模方法的改进

纪莲, 马铁, 狄正鸿, 刘冬妍

2018, 38(4):  267-271.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.005

摘要 ( 1635 )   PDF (5342KB) ( 534 )  

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目的 用卵清蛋白(OVA)致敏小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),建立一种更为简便、稳定的小鼠AD模型。方法 采用6周龄BALB/c雌性小鼠,第1日腹腔注射200 µg/mL OVA溶液0.5 mL系统致敏,第6日皮下注射100 µg/mL OVA溶液0.5 mL再次致敏。并于第18、39日背部局部贴含50 µL,1 000 µg/mLOVA的1.5 cm²的无菌纱布,每日更换,分2次局部致敏,各持续1周。第46日,观察小鼠皮肤及其病理学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中总IgE水平,统计成模率及动物死亡情况。结果 AD模型小鼠皮肤肉眼可见潮红、脱屑、偶见结痂等皮炎改变;病理可见表皮细胞增厚,过度角化,真皮内淋巴细胞等浸润。模型组小鼠血清总IgE水平为(6 296.17±1 021.28) ng/L,显著高于空白对照组的(1 280.97±501.24) ng/L和生理盐水组的(1 327.57±629.71) ng/L(均P<0.01)。成模率为94%,死亡率6%。结论 该方法可以成功建立小鼠AD模型,造模方法简单,成模率高。



不同途径感染小鼠诺如病毒对小鼠抗体水平和病毒复制的影响

罗银珠, 张钰, 袁文, 何丽芳, 黄碧洪, 吴瑞可, 闵凡贵, 王静, 潘金春, 黄韧

2018, 38(4):  272-277.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.006

摘要 ( 302 )   PDF (1171KB) ( 332 )  

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目的 探讨小鼠诺如病毒(MNV)不同接种途径对小鼠血清抗体水平和病毒复制的影响。方法 MNV(4×10⁴ 拷贝/µL)分别以静脉、腹腔联合注射(iv+ip)、饮水(dw)、灌胃(ig) 3种不同途径接种ICR小鼠,各组于感染前(0 d)、感染后3 d、6 d、14 d、25 d、34 d、51 d随机剖检2~3只小鼠,收集血清和心、肝、脾、肺、肾、脑、胃肠内容物,利用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时定光定量(qRT-PCR)方法分别检测血清抗体和病毒载量。结果 所有感染小鼠均无明显临床症状。3种途径接种的小鼠在感染后25 d均可检测到特异性抗体。抗体产生初期以ig接种组抗体水平最高,随后iv+ip 接种组抗体水平上升幅度最大并在51 d高于其它接种组。小鼠接种MNV 3 d可在3组接种鼠的胃肠道、脾、脑中检测到病毒核酸,各组的组织脏器病毒载量有差异,其中iv+ip接种组盲肠内容物(3~51 d)、脾(6 d) 和肝(14 d)病毒载量高于其它两组。结论 不同接种途径对MNV在小鼠抗体水平和病毒载量影响较大。iv+ip感染效果较好,可作为MNV病毒感染模型的有效接种方式。血清抗体ELISA检测结合盲肠内容物核酸检测有利于MNV早期监测。



慢性疲劳综合征大鼠模型相关指标观测

饶子亮, 冯学轩, 黄小红, 黎莉斯, 李金凤, 邝少松, 王刚

2018, 38(4):  278-283.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.007

摘要 ( 239 )   PDF (730KB) ( 317 )  

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目的 采用拥挤等复合应激制作慢性疲劳综合征(CFS)大鼠模型,并观测相关指标。方法 综合运用不定期的拥挤、噪音和昼夜颠倒等不同的应激因子长期温和刺激大鼠,造模持续64 d。观察大鼠精神状态、皮毛色泽,每周测体质量,每月进行半定量评分和摄食量测定,采血检测血常规、免疫球蛋白G(IgG)及血乳酸的含量,试验期末强迫游泳测定不动时间。结果 与正常对照组比较,造模大鼠自主活动减少、精神萎靡、皮肤松弛、毛发变黄、耳尾颜色淡红少泽,半定量评分值升高;体质量、摄食量下降;白细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞比容等下降;强迫游泳后不动时间、血乳酸和IgG上升。结论 采用拥挤、噪音和睡眠紊乱成功构建CFS大鼠模型,半定量评分、大鼠体质量、摄食量、白细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞比容、强迫游泳后不动时间、血乳酸和IgG可以作为参考指标。

栀子苷类药物引起SD大鼠胆红素沉着的案例分析

周飞, 王浩安, 陈涛, 邱爽, 陈珂, 岑小波

2018, 38(4):  284-287.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.008

摘要 ( 242 )   PDF (4863KB) ( 332 )  

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目的 鉴别诊断栀子苷类药物引起的大鼠肝肾中细微的色素颗粒。方法 对经口灌胃给予栀子苷类药物SD大鼠的肝脏和肾脏进行大体解剖观察,常规HE染色镜检,结合临床血液生化及尿液指标进行分析,并利用特殊染色方法进行鉴别诊断。结果 与对照组相比,各剂量组SD大鼠肝脏和肾脏均出现灰绿色改变,血清总胆红素(TB)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)显著升高。并且,剂量组大鼠尿液中尿胆素原(URO)和尿液胆红素(BIL)含量呈剂量相关性增加。组织病理学检查见所有剂量组大鼠的肝脏和肾脏出现与受试物相关的微小棕黄色色素颗粒。这些色素颗粒对Fouchet染色呈阳性反应,而对Perls blue染色呈阴性。结论 确诊了栀子苷类药物引起的大鼠肝肾中沉着的色素为胆红素,阐释了肝肾的组织病理改变与临床病理学的联系,为今后毒性病理工作中色素鉴别诊断提供理论及方法。



SCID小鼠脏器质量和部分血液生理生化及免疫指标测定

袁水娟, 施国君, 唐慧青, 施美莲

2018, 38(4):  288-292.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.009

摘要 ( 336 )   PDF (578KB) ( 355 )  

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目的 测定SCID小鼠主要脏器质量、血液生理生化、免疫球蛋白、补体及免疫细胞数据。方法 选择4周龄、8周龄、16周龄的SCID小鼠20只(雌雄各半),测定主要脏器质量、血液生理生化、免疫球蛋白、补体数据;选择8周龄的SCID小鼠20只(雌雄各半),测定T细胞及亚群、B细胞、NK细胞免疫指标。结果 SCID小鼠的胸腺质量与性别、周龄均无关,各数据间无显著差异。4周龄SCID小鼠的红细胞(RBC)、淋巴细胞(LYM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)水平显著大于8周龄、16周龄的SCID的小鼠。用脾脏采样分离的T细胞、B细胞、NK细胞在性别上无显著差异,CD3+在整体免疫细胞占比最小,B220+占比最大。结论 SCID小鼠表现为T、B细胞免疫缺陷,本实验测定的生理生化数据与国外SCID小鼠数据基本符合,表明该品系自引种以来未发生生物学特性明显改变。

基于药效评价的主成分分析法对不同规格鹿茸差异性研究

曲雷鸣, 李峰, 龚伟, 刘威

2018, 38(4):  293-298.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.010

摘要 ( 266 )   PDF (1026KB) ( 384 )  

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目的 考察8种不同规格鹿茸含药血清对骨髓间质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化的影响,并对8种不同规格鹿茸进行主成分分析(PCA),揭示不同规格鹿茸的相似性和差异性。方法 雌性SD大鼠72只,随机分为9组,按鹿角的生长特点、加工方式等筛选8种不同规格的鹿茸药材,分别制得不同规格鹿茸的大鼠含药血清,以上述血清对BMSCs细胞进行培养,MTT法检测成骨细胞的增殖情况,ELISA法检测碱性磷酸酶(ALP)、骨形成蛋白2(BMP-2)、骨钙素(BGP)分泌量,以测定结果作为PCA数据源进行统计分析。结果 吸光度(A)值,ALP值的PCA能将鹿茸蜡片与骨片、血片区别开来,正确率为100%。结论 本方法及模型可用于鹿茸药材质量评价。



层次分析法在实验动物生物安全管理中的运用

徐庆华, 童琳

2018, 38(4):  299-303.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.011

摘要 ( 275 )   PDF (644KB) ( 309 )  

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目的 确定实验动物生物安全管理综合评价指标权重系数,从而客观、科学地综合评价实验动物生物安全管理质量,建立科学合理的评价指标体系。方法 筛选11项综合评价指标,运用层次分析法(AHP)确定指标体系中各指标的权重系数,并进行应用。结果 所有综合评价指标中,以环境设施检测符合要求和实验动物有质量合格证所占权重系数最大,均为0.2157,一致性比率(CR)为0.0209<0.1。结论 各评价指标权重系数间无逻辑混乱,该研究的指标体系及权重系数可用于综合评价不同单位、不同地区生物安全管理质量。

不同来源垫料中几种重金属和有害化学物的调查

赵维波, 闵凡贵, 潘金春, 梅一多, 黄海燕, 黄韧

2018, 38(4):  304-306.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.012

摘要 ( 177 )   PDF (488KB) ( 284 )  

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目的 对广东省实验动物机构使用的不同来源、不同材质的10份实验动物垫料进行检测,了解垫料中几种重金属和有害化学物污染水平,为使用者提供借鉴。方法 按照现行方法,检测垫料中5种重金属和3种有害化学物污染水平。结果 不同来源和材质的实验动物垫料质量存在差异;黄曲霉毒素B1在所有样品中检测出,但未超过标准要求;3份刨花垫料中铅含量检测超过标准要求;9份垫料中检测出重金属铬污染。结论 实验结果可作为垫料采购和使用参考,也可为地方标准制定提供参考。

经验交流

动物实验教学中贯彻动物福利理念措施分析

金成文, 陆洪英, 王建英, 王忠伟, 郭顺生, 成敏

2018, 38(4):  307-309.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.013

摘要 ( 243 )   PDF (520KB) ( 309 )  

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动物实验是医学教育基本技能培训的重要内容,是医学教育不可或缺的主要手段。在动物实验教学中涉及到很多动物福利问题,但在以往的动物实验教学中,我们多注重专业知识和操作技能的培训,而较少涉及实验动物福利理念相关内容的传授。随着医学与人文越来越紧密的结合,如何将动物福利理念贯穿于整个实验过程,实现动物福利,达到医学人文教育目的 ,是实验教学需要面对的课题。

大鼠脾脏切除开放性实验教学探讨

杨国淋, 魏玲

2018, 38(4):  310-313.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.014

摘要 ( 249 )   PDF (8356KB) ( 208 )  

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动物实验对于培养医学生临床技能和科学研究思维具有重要意义。近年来,随着医学实验动物学的发展,许多医学院校已经将实验动物和动物实验作为必修课程。开放性动物实验可以培养临床医学学生的动手操作能力、思维能力和科研素养。本文以SD大鼠脾脏切除开放性动物实验开展研究探索,为医学院校开展此类动物实验外科教学提供一定的参考依据。



1例SD大鼠自发性肾母细胞瘤肾脏的病理形态学观察

邱波, 王艳, 胡建廷

2018, 38(4):  314-317.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.015

摘要 ( 265 )   PDF (10503KB) ( 142 )  

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在试验周期为26周的SD大鼠灌胃重复给药毒性试验结束后,溶媒对照组(0.9%生理盐水)中出现1例肾母细胞瘤病例。肉眼形态学观察,该动物右腹部膨大,剖检该患病动物见整个右肾为一包块,部分区域呈灰白色,部分区域明显出血呈黑褐色,肾脏体积较大,形状不规则,表面见假囊性包裹,包块质地软硬兼有。左肾较为正常。HE染色显示较大的包块组织占据整个肾脏,周围被挤压的具有假被膜的肾实质所包围。该包块组织由肾脏不同发育阶段的组织所构成,细胞成分包括间叶组织、上皮样细胞和深的嗜碱性胚基幼稚细胞三种。包块内上皮成分往往表现为不同成熟程度的器官样分化的原始肾小球和/或肾小管。结果表明其符合肾母细胞瘤的病理形态学特点。



雄性猕猴去势操作技术

谢金东, 周建华, 李志雄, 杨燕燕, 俞春英, 王训立

2018, 38(4):  318-319.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.016

摘要 ( 3061 )   PDF (2814KB) ( 294 )  

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因科研需要,对12只雄性猕猴实施了睾丸切除手术。其中3只猴术后第2日出现阴囊肿胀,经适当处理恢复良好;其余猴术后恢复正常,手术成功。



综述

卡氏肺孢子菌的生物学特性简述

冯洁, 林金杏, 高诚

2018, 38(4):  320-324.  DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.04.017

摘要 ( 385 )   PDF (709KB) ( 332 )  

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卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii)是一种人兽共患的机会性致病病原体,呈世界性分布。可感染多种哺乳动物和人类,严重危害人类和动物健康,对公共卫生构成重大威胁。本文就其分类学进展、检测方法进展等进行综述,并对实验动物国家标准中相关内容进行介绍并提出修改建议。