利用高压水动力法建立乙型肝炎病毒转染小鼠模型及初步评价

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.001

实验动物与比较医学 ›› 2015, Vol. 35 ›› Issue (1): 1-5.DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.001

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利用高压水动力法建立乙型肝炎病毒转染小鼠模型及初步评价

彭秀华¹, 陈丽香¹, 任晓楠¹, 施碧胜¹, 徐春华¹, 周文江¹, 周晓辉^1,2

1.上海市公共卫生临床中心,上海 201508;
2.复旦大学上海医学院教育部分子医学重点实验室, 上海200032

收稿日期:2014-06-30 出版日期:2015-02-25 发布日期:2015-02-25
作者简介:彭秀华(1973-), 女, 兽医学本科, 从事感染性疾病动物模型研究, E-mail:pengxh1973@sina.com
基金资助:
上海市科委实验动物研究专项(13140902200)

Establishment and Preliminary Evaluation of Hepatitis B Virus Transfection Mouse Model by Using Hydrodynamic Injection

PENG Xiu-hua¹, CHEN Li-xiang¹, REN Xiao-nan¹, SHI Bi-sheng¹, XU Chun-hua¹, ZHOU Wen-jiang¹, ZHOU Xiao-hui^1,2

1. Shanghai Public Health Clinical Center, Affiliated to Fudan University, Shanghai 201508, China;
2. Key Laboratory of Medical Molecular Virology, Ministry of Education and Health, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China

Received:2014-06-30 Published:2015-02-25 Online:2015-02-25

摘要/Abstract

摘要： 目的利用高压水动力法建立C57BL/6小鼠乙型肝炎病毒(HBV)转染模型,并对其进行初步的观察及药物评价。方法将10 μg腺病毒相关病毒载体(pAAV)-HBV1.2质粒采用高压水动力法尾静脉注入 C57BL/6小鼠体内, 连续5周观察小鼠血清中的HBsAg、HBV DNA等表达情况,并利用该模型初步评价拉米夫定的抗病毒效果。结果 pAAV-HBV1.2质粒高压水动力法注射C57BL/6小鼠后,在小鼠体内分泌HBV的抗原及病毒颗粒。尾静脉注射2周内小鼠血清中HBsAg阳性率为100％,连续观察至第5周,22.2%小鼠血清中HBsAg有持续表达。小鼠血清中HBV DNA水平在1~4周时含量明显高于≥10³拷贝/mL(临床患者阳性标准)。肝组织病理学观察(HE染色)可见不同程度肝细胞炎性改变,肝组织免疫组化可见到HBsAg和HBcAg表达。另外,使用抗病毒药物拉米夫定干预该小鼠模型, 其血清中HBV DNA水平明显下降。结论初步建立的C57BL/6小鼠HBV转染模型, 是一个适用于药物筛选及疫苗研究的有效模型, 为抗病毒治疗研究奠定了一定基础。

关键词: 高压水动力法, 乙型肝炎病毒(HBV), 小鼠转染模型, 抗病毒药物

Abstract: Objective To construct a hepatitrs B Virus (HBV) transfection model in C57BL/6 mice with hydrodynamic injection and to further confirm the effectiveness of this mouse model for anti-HBV drug evaluation. Methods C57BL/6 mice were injected hydrodynamically via the tail vein with 10 μg of pAAV-HBV1.2 plasmid in 2 mL PBS. Results The serum level of HBsAg and HBV DNA level were monitored every week. Two weeks after the hydrodynamically injection (HI), all the mice were HBsAg positive while 22.2 % of the mice were still positive five weeks after HI. HBV DNA levels in the serum persisted higher than 10³ copies/ml for four weeks after HI. Histopathological analysis showed inflammatory infiltration and high expression of HBcAg and HBsAg in the transfected mouse liver tissue. In addition, Lamividine were applied for the evaluating the potential of this mouse model for anti-HBV drug evaluation, and data showed significant down regulation of HBV DNA level in the Lamividine treated mice. Conclusion This HBV transfection mouse model maybe effective in screening efficient anti-virus drugs targeting HBV polymerase and in evaluating HBV therapeutic vaccines, and thus promoting the development of novel treatment strategies against chronic hepatitis B infection.

Key words: Hydrodynamic injection, Hepatitis B Virus(HBV), Transfection mouse model, Anti-virus drug

中图分类号:

Q95-33

彭秀华,陈丽香,任晓楠,等. 利用高压水动力法建立乙型肝炎病毒转染小鼠模型及初步评价[J]. 实验动物与比较医学, 2015, 35(1): 1-5. DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.001.

PENG Xiu-hua,CHEN Li-xiang,REN Xiao-nan,et al. Establishment and Preliminary Evaluation of Hepatitis B Virus Transfection Mouse Model by Using Hydrodynamic Injection[J]. Laboratory Animal and Comparative Medicine, 2015, 35(1): 1-5. DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.01.001.

参考文献

[1] 刘大斌, 童贻刚. HBV的小鼠模型研究进展[J]. 世界华人消化杂志,2008, 16(34):3859-3864.
[2] Wolff JA, Malone RW, Williams P, et al.Direct gene transfer into mouse muscle in vivo[J]. Science, 1990, 247(4949):1465-1468.
[3] Liu F, Song Y, Liu D.Hydrodynamics-based transfection in animals by systemic administration of plasmid DNA[J]. Gene Ther, 1999, 6(7):1258-1266.
[4] Budker V, Zhang G, Knechtle S, et al.Naked DNA delivered intraportally expresses efficiently in hepatoeytes[J]. Gene Ther, 1996, 3(7):593-598.
[5] 张亚兰, 袁维峰, 史利军. 抗乙型肝炎病毒药物评价用实验动物模型现状[J]. 生物技术通讯, 2011, 1(22):107-109.
[6] Yang PL, Althage A, Chung J, et al.Hydrodynamic injection of viral DNA: A mouse model of acute hepatitis B virus infection[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99(21):13825-13830.
[7] Huang LR, Wu HL, Chen PJ, et al.An immunocompetent mouse model for the tolerance of human chronic hepatitis B virus infection[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2006, 103(47):17862-17867.
[8] Lin YJ, Huang LR, Yang HC, et al.Hepatitis B virus core antigen determines viral persistence in a C57BL/6 mouse model[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2010, 107(20):9340-9345.
[9] Zhao ZF, Yang H, Han DW, et al.Inhibition of hepatitis B virus expression and replication by RNA interference in HepG2.2.15.[J]. World J Gastroenterol, 2006, 12(37):6046-6049.
[10] Shlomai A,Shaul Y.RNA interference-small RNAs effectively fight viral hepatitis[J]. Liver Int, 2004, 24(6):526-531.
[11] 南大航, 潘宁, 张建琼. 乙型肝炎动物模型研究进展[J]. 东南大学学报: 医学版, 2012, 31(4):504-507.
[12] Zhao T, Li X, Yin W, et al.Establishment of an HBV chronic hepatitis B infection mouse model by vivo transduction of HBV cccDNA[J]. Gan Zang Bing Za Zhi, 2014, 22(4):260-265.
[13] Brown JJ, Parashar B, Moshage H, et al.Along-term hepatitis B viremia model generated by transplanting nontumorigenic immortalized human hepatocytes in Rag-2-deficient mice[J]. Hepatology, 2000, 31(1):173-181.
[14] Tsuge M, Hiraga N, Takaishi H, et al.Infection of human hepatocyte chimeric mouse with genetically engineered hepatitis B virus[J]. Hepatology, 2005, 42(5):1046-1054.

[1]	焦青贞, 吴桂华, 唐雯, 樊帆, 冯凯, 杨春响, 乔建, 邓素芳. 暖通系统暂停送风下实验动物设施氨浓度的动态监测与分析[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 490-495.
[2]	刘文涛, 罗艳红, 龙永霞, 罗启慧, 陈正礼, 刘丽达. 四川省实验动物设施常见环境问题及检测经验[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 483-489.
[3]	赵鑫, 王晨曦, 石文清, 娄月芬. 斑马鱼在炎症性肠病机制及药物研究中的应用进展[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 422-431.
[4]	贡磊磊, 王晓霞, 封学伟, 李心蕾, 赵涵, 张雪艳, 冯欣. 不同浓度环磷酰胺诱导早发性卵巢功能不全小鼠模型及作用机制研究[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 403-410.
[5]	林振华, 褚祥宇, 魏振西, 董传俊, 赵增琳, 孙晓霞, 李庆雨, 张琪. 椎体成形术用于实验猪体内骨水泥安全性及有效性评价[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 466-472.
[6]	姜娟, 宋宁, 连文博, 邵丛丛, 顾文文, 石燕. 两种浓度乙醇溶液灌注建立小鼠宫腔粘连模型的组织病理和分子病理表型比较[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 393-402.
[7]	刘月琴, 薛卫国, 王淑友, 申耀华, 贾术永, 王广军, 宋晓晶. 探头式激光共聚焦成像技术用于小鼠消化道组织形态特征分析[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 457-465.
[8]	郑卿勇, 杨冬华, 马智超, 周姿余, 陆洋, 王晶宇, 邢丽娜, 康迎英, 杜莉, 赵春香, 狄宝山, 田金徽. 动物实验系统评价与Meta分析报告的规范撰写建议[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 496-507.
[9]	王庭君, 罗浩, 陈琦. 基于人工智能的实验动物中心信息化升级及应用实践[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 473-482.
[10]	王娇祥, 张璐, 陈姝含, 角德灵, 赵恒, 魏太云, 郭建雄, 徐凯祥, 魏红江. GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪的构建及功能验证[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 379-392.
[11]	秦超, 李双星, 赵婷婷, 蒋晨晨, 赵晶, 杨艳伟, 林志, 王三龙, 文海若. 药物安全评价用SD大鼠90 d喂养试验的背景数据研究[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 439-448.
[12]	刘鹍, 兰青, 易兵, 谢晓婕. 药物非临床生殖毒性试验中动物妊娠的主要难点及应对方法[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 449-456.
[13]	孙强. 非动物实验替代知多少[J]. 实验动物与比较医学, 2025, 45(4): 508-514.
[14]	陈子宜, 孙红燕, 康品方, 武文娟. 肺动脉高压动物实验模型的研究进展[J]. 实验动物与比较医学, 2025, (): 1-12.
[15]	徐英韬, 王蒙蒙, 林平, 迟海涛, 王怡, 白鹰. 外泌体通过NRF2/SLC7A11/GPX4通路调控铁死亡治疗小鼠缺血性脑卒中[J]. 实验动物与比较医学, 2025, (): 1-11.

利用高压水动力法建立乙型肝炎病毒转染小鼠模型及初步评价

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