2012年, 第32卷, 第3期　
刊出日期：2012-06-25

  

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论著
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  慢性不可预知轻度应激对大鼠旷场行为和糖水偏爱度影响的观察

  李霞, 吴程烨, 肖世富, 郑贤杰, 董晓蔚, 彭素芳, 王涛, 肖泽萍

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 175-181. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.001

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  目的 探讨慢性不可预知轻度应激对大鼠旷场行为的影响。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为3组: A为对照组、B为应激组、C为应激+用药组,每组8只。A组不予以刺激,B、C两组采用慢性不可预知轻度应激(CUMS)模型的实验方法,每日予以1~2种刺激; A、B两组每日腹腔注射生理盐水2 ml,C组每日腹腔注射西酞普兰2 ml(10 mg/kg)。实验为期6周,每周为大鼠称重,每3周测大鼠的糖水偏爱性、旷场试验评价大鼠行为,6周后施行安死术。结果 B组及C组与A组相比,体重增长明显较少(均值分别为153.05 g 、 127.69 g 、 232.57 g); B组与A组及C组比较,糖水偏爱度显著降低(均值分别为60%, 73%, 71%); 且B组大鼠在旷场中的总移动里程、总运动时间、越线次数等行为指标增大,而另两组在这些指标上均减小。结论 慢性不可预知轻度应激诱发大鼠抑郁症状的同时,可能导致其行为增多等类焦虑症状。
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  抑郁情绪大鼠模型中糖水偏好实验数据的聚合分析

  侯金良, 魏盛, 杜希扬, 张惠云

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 182-185. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.002

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  目的 探讨抑郁情绪大鼠模型糖水偏好实验(Sucrose preference test, SPT)中糖水偏好SP(Sucrose preference, sp) 系数的最佳聚合方式。方法 慢性温和刺激法复制抑郁情绪大鼠模型。4周造模过程中,每隔一周采集一次大鼠的行为学数据,并对糖水偏好实验数据采用两两聚合的分析方法处理。比对不同聚合手段对模型制备信度及相关性的影响。结果 ①一致性系数(Kappa)结果显示,只有第3种聚合方式能得到较高的可信度(Kappa=0.611),②组内相关系数(ICC)结果表明,聚合方式中TM的可信度最高(ICC=0.910)。结论 恰当的数据聚合方式可以大幅提升抑郁情绪大鼠糖水偏好实验中数据的可信度与稳定性。
  
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  BMP-2体外诱导OPG^-/-小鼠BMSCs向成骨方向分化的实验研究

  张春, 魏琴, 王雪梅, 匡颖, 段明军, 卓菲亚·克依木, 姜涛, 马嵋, 温浩

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 186-190. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.003

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  目的 探讨骨形成蛋白-2(BMP-2) 对OPG^-/-小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外定向诱导成骨的能力, 评价BMP-2 活性多肽的成骨诱导性及诱导成骨的剂量依赖性。方法 取OPG^-/-小鼠股骨, 分离骨髓基质细胞进行体外培养,传至P₁代时改用条件培养基,在15%FBS培养条件下培养基中分别加入浓度为0.3 μg、0.2 μg、0.1 μg、0.05 μg、0 μg的BMP-2, 并依次记为A、B、C、D 和E 组。细胞培养至1、3、5、7 d, PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)、钙试剂盒测定细胞钙含量、酶联免疫法测定细胞上清中抗酒石酸酸性膦酸酶5b(TRACP5b) 的表达, 检测不同浓度BMP-2 活性多肽体外诱导成骨的能力。结果 ALP活性和钙含量检测显示, A 组和B 组较其他组增加明显 (P<0.05), 但A、B 组间比较差异无统计学意义( P>0.05)。TRACP5b检测显示,A、B、C组第3、5和7 日 TRACP5b表达均低于D、E 组 (P<0.05), 但A和B组差异不显著 (P>0.05)。结论 BMP-2 活性多肽能有效地促进OPG^-/-小鼠BMSCs向成骨方向分化, 其诱导作用存在剂量依赖关系, 最佳诱导剂量为0.2 μg/ml。
  
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  骨髓间充质干细胞对放射性回肠损伤的病理观察

  宋祥福, 孙冰雪, 张静春, 龚守良

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 191-194. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.004

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  目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在电离辐射诱发的空肠组织损伤中的迁徙、定居及修复作用。方法 大鼠5 Gy X线全腹部照射,每隔72 h照射1次,共5次,制备放射性回肠损伤动物模型。大鼠随机分成正常对照组、模型组及MSCs治疗组,在激光共聚焦显微镜下观察MSCs在回肠组织中富集情况。病理学观察MSCs对放射性回肠损伤的修复作用。结果 MSCs经尾静脉注入2 d即富集回肠组织内,7 d后广泛分布在肠系膜血管周围。正常大鼠回肠黏膜结构清楚,模型组黏膜上皮细胞坏死脱落,以3 d较重,累及全层细胞变性; 治疗组的黏膜较相应的模型组厚,7 d肠黏膜坏死较模型组轻。结论 MSCs可以迅速地富集在放射性损伤的回肠组织中,促进回肠再生与修复。
  
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  参芪扶心口服液对睡眠剥夺大鼠利钾尿肽和心功能的影响

  马路, 朱晓法, 钱彦方, 李秀玉, 赵美娜

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 195-198. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.005

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  目的 探讨参芪扶心口服液对睡眠剥夺(Sleep Deprivation, SD)大鼠心功能的影响。方法 利用“小平台水环境法”(flower pot) 建立大鼠睡眠剥夺模型, 采用左心室插管术测定血液动力学指标; 放免法测定血浆利钾尿肽(KP)、心钠素(ANP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及内皮素-1(ET-1)浓度。结果 与模型组相比, 高剂量组等容收缩末期心肌缩短最大速度（Vmax）、左心室舒张期压力下降最大变化速率(-dp/dtmax)及左心室内压峰值(LVSP)增加, 左心室舒张末压（LVEDP）降低, 血浆 KP、AngⅡ及ET-1浓度降低, 均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。中、低剂量组血浆ANP水平下降明显(P均<0.01)。结论 睡眠剥夺能够引起大鼠心功能障碍。参芪扶心口服液能降低睡眠剥夺引起心功能不全大鼠血浆KP、AngⅡ、ET-1浓度, 影响ANP分泌, 改善左室舒缩功能。
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  导管术致新西兰兔充血性心衰的心气虚模型研究

  王萧, 董浩然, 林传权, 许庆文

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 199-202. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.006

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  目的 运用导管术构建新西兰兔充血性心衰的心气虚模型。方法 运用导管术造成兔的超容量负荷型心衰模型,造模后15 d和30 d从动物的一般状态、饲料消耗指数、体重增加指数、心率、呼吸频率和心电图等指标进行量化观察。结果 与正常对照组比较,SBP、DBP和LVSP等血流动力学指标显著性下降,造模后15 d、30 d家兔活动明显减少、精神萎靡、抓起反抗力度减轻,饲料消耗指数与体重增加指数降低,呼吸频率和心率明显增加,且心电图出现异常Q波、ST段抬高。结论 以动物的一般状态、心率、呼吸频率、心电图表现、饲料消耗指数和体重增加指数等指标基本可以定性定量地反映出充血性心衰的心气虚模型特征。
  
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  激光打孔技术用于冷冻精子复苏后体外受精的研究

  刘丽均, 朱权凤, 郁丽丽, 张屹达, 施美莲

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 203-208. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.007

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  目的 比较精子冷冻前后体外受精率的变化,以及卵子经过激光打孔后,与新鲜精子及冷冻复苏精子体外受精,比较受精率的变化。方法 冷冻2个近交系小鼠和5个品系的基因工程小鼠的精子,比较新鲜精子和冷冻复苏精子与C57BL/6J小鼠卵子做体外受精的结果; 然后对C57BL/6J卵子做激光打孔,再与新鲜及冷冻复苏精子体外受精结果进行比较。结果 (1)新鲜C57BL/6J精子受精率为50.4%,C57BL/6N的受精率为48.6%,远高于冷冻精子复苏后的受精率(17.7%和15.4%); 卵子打孔后,再与C57BL/6J及C57BL/6N的新鲜精子或冷冻复苏精子受精,受精率分别为64.6%,59.7%和60.4%,48.3%,冷冻精子复苏后的体外受精率提高显著; (2)5个基因工程小鼠新鲜精子和冷冻精子复苏后与C57BL/6J卵子的受精率分别为: 91.5% vs 28.6%, 77.4% vs 52.3%,40.7% vs 12.7%,56.5% vs 14.6%,65% vs 6.5%; 这5个品系的小鼠新鲜精子和冷冻精子复苏后与C57BL/6J打孔卵子的受精率分别为75% vs 50.8%,74.3% vs 35.6%,75.7% vs 32.7%,79.5% vs 48.9%,59.5% vs 46.3%,冷冻精子复苏后的受精率较之不打孔卵子,提高显著。结论 激光打孔技术用于冷冻复苏精子的辅助体外受精,可以显著提高冷冻精子复苏后的受精率,使得精子保种更加经济有效。
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  WHBE兔骨髓、外周血和脾脏来源树突状细胞的比较

  屠珏, 徐剑钦, 潘永明, 刘志华, 孔勤, 陈民利

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 209-214. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.008

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  目的 建立大耳白黑眼兔(WHBE兔)树突状细胞(DC)体外诱生培养的经济有效的方法,为进一步实验奠定基础。方法 分离WHBE兔骨髓、外周血和脾脏三种来源单核细胞分别作为DC的前体细胞,以 GM-CSF和IL-4联合诱生未成熟DC,并经LPS刺激分化成熟。通过DC形态学和超微结构观察、表型鉴定以及同种异体混合淋巴细胞反应检测,比较三种DC的生物学特征和免疫功能。结果 三种来源单核细胞经LPS刺激后其表面均显示出明显的树枝状突起,外周血和脾脏的DC分化速度较骨髓稍快,均能成功诱生出10⁶~10⁷数量级的DC,其中外周血来源获得的数量最多。CD86分子表达显著升高,脾脏来源DC的表达稍高于另外两组。具有显著刺激T细胞增殖的能力(P<0.05),但三组之间无显著性差异(P>0.05)。结论 采集外周血单核细胞体外诱导扩增DC是获得WHBE兔树突状细胞最简便经济的手段。
  
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  螺旋CT三维重建观察实验猕猴胸部大血管系统

  范春梅, 李志雄, 车敏

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 215-217. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.009

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  目的 利用256层螺旋CT三维重建观察实验猕猴胸部大血管,为猕猴血管系统的研究、数字化猴的建立及科学研究提供资料。方法 (1)选择实验猕猴10只, 雌雄各半, 年龄6~10岁, 进行胸部CT断层扫描试验。(2)动物全身麻醉后,采用平扫及增强扫描技术,进行容积数据采集,获取正常猕猴胸部CT横断面影像。(3)利用CT图像后处理技术对扫描获得的容积数据进行三维的图像重组处理。结果 获得了良好的主动脉、肺动静脉等胸部大血管三维重建的立体影像,本文展示了2幅三维重组图像。从比较解剖学的角度,观察到了猕猴胸部血管的结构特点及与人类的区别。结论 CT三维重建能很好地反映了猕猴胸部血管系统的解剖结构、走行及与周围结构的位置关系,它是有效的、无创伤性的、直观的观察血管系统的理想方法。
  
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  IL-12对辐射损伤后小鼠造血干细胞的修复作用

  王翠玲, 王增松, 夏书奇, 郭桂铃, 谢飞群, 李文棠, 牛丽红, 罗群芳, 张宜俊

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 218-221. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.010

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  目的 研究重组小鼠白介素12(rmIL-12)对经辐射损伤后小鼠骨髓造血干细胞的修复作用。方法 选用SPF级BALB/c鼠,直接取骨髓造血干细胞或小鼠本身在辐照前后用rmIL-12处理后,检测造血干细胞的数量和凋亡细胞数,探讨rmIL-12对辐射损伤后骨髓造血干细胞的修复功能。结果 不论是直接辐射细胞或小鼠本身,在辐照前后用rmIL-12处理后,rmIL-12具有提高受损骨髓造血干细胞的数量增加,细胞凋亡率减少。结论 rmIL-12对辐射损伤后的造血干细胞具有明显的促进修复作用,这为临床上治疗造血细胞受损提供实验依据。
  
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  APPswe/PS1dE9转基因小鼠繁殖性能及生长发育观察

  李娜, 王维, 黎陈静, 张颖妍, 张晟, 章海燕, 张周

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 222-227. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.011

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  目的 为建立阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9转基因小鼠生物学特性标准化资料提供实验依据。方法 APPswe/PS1dE9转基因小鼠杂合子交配繁殖,建立基因型鉴定方法, 选择160窝次的1158只小鼠分别统计4胎内不同胎次、不同基因型的繁殖性能及生长发育指标。结果 ①APP/PS1片段大小为600 bp; ②第2胎和第3胎的仔鼠数量及阳性数量均大于第1胎(P<0.05), 阳性率则无明显差异(P>0.05); ③第1、2胎之间的胎间隔天数较短(P<0.05),第2、3胎的窝产仔数、离乳仔数及离乳率均高于其它两胎(P<0.05); ④第3胎和第4胎的初生窝重、泌乳力和离乳个体重较为稳定; ⑤雌雄APP/PS1小鼠的最高体重分别为24.45±0.92 g和30.21±2.53 g; ⑥该转基因小鼠的基因型不影响其体重(P>0.05)。结论 建立了APP/PS1小鼠的基础生物学特性资料; 为科学研究提供基础数据
  
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  实验动物学自助学习软件的研发

  胡樱, 杨斐, 俞伊军, 高诚

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 228-233. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.012

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  目的 研发一种基于计算机辅助学习技术的实验动物学自助学习系统软件。方法 采用基于动物种类的设计构建软件框架,通过两级主题组织实验动物学科知识点,运用Microsoft Visual Studio 2010和 Microsoft.NET Framework 4.0以及C#语言编程,对专业资料进行整合与匹配。结果 建立了从动物种类出发的软件入口以及分别对应一级主题和二级主题的各级学习界面,由此构成整个软件,并完成实验动物学资料库和软件流程的对接。结论 研发了实验动物学自助学习系统软件,可作为实验动物学自助学习和培训以及资料查询的工具,并初步构建实验动物学的计算机辅助学习环境。
  
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  浅谈动物实验规范化操作技术与视听教育

  潘华, 张秀英, 宗启伟, 邱卫平, 蒋国珍, 乔伟伟, 赵先哲, 陈雪雨, 周光兴

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 234-237. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.013

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  有效推动规范化的动物实验操作技术,并使之应用于教学和培训工作实践中,是实验动物标准化工作的重要环节,是生物医学研究的可靠保证,也是实现动物福利的重要内容。生物医学教学中,视听教材是学生获得知识和技能的重要教学手段。我们结合自己的教学实践,在制定常用实验动物操作技术规范的基础上,应用视听技术开发制作了一套包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、猴等实验动物的规范化动物实验操作技术视听教材。希望通过本视听教材的推广使用,有效提高动物实验教学和培训工作的质量和效率,并对提高广大科研人员的规范化动物实验操作技能产生积极作用。
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  小鼠植入RFID芯片生理生化值的测定

  刘雄伟, 沈志敏, 魏晓锋, 胡建华, 俞伊军

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 238-240. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.014

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  目的 测定两品系小鼠植入RFID电子芯片后血常规和血清生化的数据。方法 采用SYS MEX XT2000五分类血液测定仪和HITACHI 7100全自动生化分析仪对BALB/c-nude裸小鼠和ICR小鼠血液及血清生化指标进行测定。结果 小鼠植入电子芯片后均正常生长, 血液及血清生化值正常。结论 与本中心2个品系正常小鼠生理生化数据库数据比较,植入电子芯片小鼠的血常规和血清生化指标没有显著变化。
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  树鼩与大、小鼠胃肠排空时间的比较

  陈丽玲, 刘汝文, 何保丽, 李波, 李进涛, 角建林

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 241-242. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.015

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  目的 通过不同形态食物灌胃予树鼩、大、小鼠, 观察排泄时间及解剖消化系统各器官的解剖学特点,了解树鼩消化特点。方法 给空腹12 h的大、小鼠、树鼩灌不同食物, 观察排泄时间; 麻醉后解剖观察树鼩胃、小肠、大肠、总消化道全长并与大、小鼠相比较。结果 同龄动物树鼩与大、小鼠消化道比较, 树鼩消化道较短差异极显著(P<0.01), 同一食物树鼩排粪便的时间最快 (P<0.05)。同食物在树鼩体内消化吸收的时间最短; 不同形态的食物: 食物糊、牛奶、油, 树鼩对油类排泄最快差异极显著(P<0.01)。结论 树鼩的胃肠解剖及功能与大、小鼠有显著差异。
讲座
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  体外重建人体皮肤模型刺激试验的验证

  程树军, 秦瑶, 步犁

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 243-246. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.016

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  科学验证是替代试验方法从开发到接受之间的必然过程,近年来,用于代替体内皮肤刺激或腐蚀试验的体外重建皮肤替代物的技术发展很快,出现了各种不同的皮肤模型和检测方法。在遵循验证的基础上,结合皮肤模型及预期毒性终点的特点,有必要建立统一的验证标准,以规范皮肤模型和体外方法的开发、标准化和比对验证,推动替代方法的认可和应用进程。
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  SPF级实验动物环境设施净化空调设计要点简介

  杨五强

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 247-249. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.017

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  为保证动物科学实验的可靠性,对SPF级实验动物设施的净化空调系统设计要围绕对实验结果的可追溯性及有效性展开。需要满足系统连续运行、温湿度、压力指标维持在有效合理范围。同时SPF级实验动物设施的投资高、能耗大,通过合理的节能设计降低系统的运行费用。
  
综述
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  无菌动物在人类健康和疾病研究中应用

  曾本华, 魏泓

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 250-253. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.018

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  随着肠道菌群与人类疾病及健康的关系研究的深入, 已证实肠道菌群不仅构成黏膜屏障、参与食物消化、刺激免疫及胃肠功能发育,而且作为内化的环境因素参与肥胖、糖尿病、IBD、肿瘤等多种疾病的发生,肠道菌群与人类疾病及健康关系研究的深入对动物模型提出了新要求。无菌动物作为微生物背景最清晰的动物,可有效地对菌群、基因及其它环境因素进行控制,是研究肠道菌群对人类疾病及健康的影响的最有效的动物模型。利用无菌动物构建的悉生动物模型及菌群人源化动物(HHA动物)模型已在肠道菌群对宿主生理功能的影响、代谢性疾病发生、药物代谢等研究领域广泛应用。
  
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  长爪沙鼠在幽门螺杆菌、听觉和焦虑症等研究领域的进展

  谢欣昱, 杜小燕

  实验动物与比较医学. 2012, 32(3): 254-258. https://doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2012.03.019

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  长爪沙鼠是一种正在开发的、具有广泛应用前景的“多功能”实验动物。本文对长爪沙鼠的几项新的医学领域的研究进展进行简要的综述,其中包括长爪沙鼠在听觉,幽门螺杆菌,焦虑等研究领域的应用。