中西医病证结合的痔疮动物模型研究现状与评价
卜瑜, 候金婷, 李媛媛, 沙静涛, 解晨露, 王文刚, 孙兴伟

A Review and Evaluation of Integrated Disease and Syndrome Animal Models for Hemorrhoids in Traditional Chinese and Western Medicine
BU Yu, HOU Jinting, LI Yuanyuan, SHA Jingtao, XIE Chenlu, WANG Wengang, SUN Xingwei
表4 复合造模法痔疮动物模型与临床吻合度
Table 4 Hemorrhoid animal models established by combined modeling methods and their clinical consistency

造模原理

Modeling principle

实验动物(性别)

Laboratory animal(sex)

造模方法

Modeling method

临床吻合度

Clinical

consistency

模型特点

Model

characteristic

模型优势

Model

advantage

模型不足

Model

limitation

联用多种药物试剂的综合诱导模型

Comprehensive induction model with combined use of multiple pharmaceutical reagents

SD大鼠

(雄性)

大鼠连续7 d进行实验,每日固定时间。实验组1于肛门内0.2 cm处,黏膜下浆肌层注射1%角叉菜胶溶液100 μL+0.5%脂多糖溶液10 μL+1%山莨菪碱注射液20 μL+25%酚磺乙胺注射液30 μL;实验组2用相同方法注射1%角叉菜胶溶液100 μL+0.5%脂多糖溶液10 μL+1%溴丙胺太林溶液40 μL+25%酚磺乙胺注射液30 μL[43]

西医符合核心症状指标为③,核心体征指标为①②③;吻合度为60%。

中医符合主症为③,次症为②③;吻合度为40%。

中西医综合吻合度为50%

根据痔病的主要病理机制,即静脉曲张和微循环阻滞,可使用作用于血管平滑肌、血流及神经的药物进行新型造模方法的探索符合痔疮发病机制,有效避免单一药物试剂作用片面的弊端,显著降低其带来的特定刺激及严重不良反应,同时能最大程度克服单一药物试剂模型与痔疮一般病理生理偏离的问题可控性、伦理风险及成本较高

化学试剂联合简单的物理干预

Combination of chemical reagents with simple physical interventions

SD大鼠

(雌雄各半)

用浸吸0.16 mL改良巴豆油混合液(蒸馏水、吡啶和6%巴豆油按1∶4∶10的比例混合)的棉签插入大鼠肛门内约1 cm处,轻轻捻转并向肛门外稍作牵扯,10 s后拔出棉签;接着取20 mL无菌注射器,去除针头后,在注射器前端套接一小段橡胶软管。对大鼠肛缘至肛门内1 cm处的12、3、6、9时钟位共4个点位进行负压吸引。吸引时轻轻向肛门外牵拉,每点持续5 s。连续造模3 d,每日1次[44]

西医符合核心症状指标为①②③,核心体征指标为①②③;吻合度为90%。

中医符合主症为①②③,次症为②③;吻合度为80%。

中西医综合吻合度为85%

联合化学及物理刺激,从临床症状及发病机制方面考虑造模模拟了痔疮炎症和淤血2大核心病机,具有成模快、病变典型、可重复性好的特点不便对单个造模方式的作用做出明确评价

创伤诱导结合巴豆油化学刺激

Trauma induction combined with croton oil chemical stimulation

日本大耳白兔(雌雄各半)+KM小鼠(雄性)将家兔两侧皮肤用剪刀造成直径1.8 cm、深达筋膜的全层皮肤创面模型+巴豆油致大鼠肛门肿胀模型[45]

西医符合核心症状指标为②③,次要症状指标为①,核心体征指标为①②③;吻合度为85%。

中医符合主症为②③,次症为①②③④;吻合度为80%。

中西医综合吻合度为82.5%

结合物理诱导+化学诱导较好地模拟了痔疮急性发作的炎性机制及术后创面愈合的生长机制未涉及痔疮发病的病理机制

巴豆油化学刺激联合细菌感染

Croton oil chemical stimulation combined with bacterial infection

SD大鼠

(雄性)+新西兰白兔

(雌雄皆有)

采用巴豆油诱导雄性SD大鼠肛门局部肿胀,模拟痔疮早期充血水肿的病理状态;采用冰醋酸诱导肛门黏膜溃疡,模拟痔疮进展期黏膜糜烂破损的病理改变;采用大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌混合感染构建细菌性溃疡模型,模拟痔疮继发感染的病理过程[46]

西医符合核心症状指标为①③,次要症状指标为①,核心体征指标为①③;吻合度为70%。

中医符合主症为①③,次症为①②③;吻合度为70%。

中西医综合吻合度为70%

化学诱导联合生物学诱导能模拟痔疮合并感染、炎症的复杂病理。造模速度较快,联合作用下,1~2周内可见明显的血管淤血、组织肿胀,适合短期药效实验通过强刺激造模,与静脉淤血、肛垫下移的自然发病机制差异大

巴豆油化学刺激+强迫站立+游泳试验

Croton oil chemical stimulation + forced standing + swimming test

SD大鼠

(雄性)

用移液管吸取0.05 mL的巴豆油混合液,滴入大鼠齿状线以上的黏膜处。固定大鼠10 s后,轻揉肛周区域10 s,上述操作重复3次,再将大鼠放回笼中。进行站立实验(取一塑料圆柱体,其长度约为大鼠体长的3倍,直径5 cm,长度35 cm。将大鼠头朝上、尾朝下,垂直置于筒内,露出双后肢,将圆筒垂直固定,使大鼠呈站立静止状态6 h)。进行游泳实验(将站立状态下的大鼠置于20~25 ℃的温水中1 h。1 h后,大鼠出现毛发呈缕状,表现出精力不足,对外界刺激反应迟钝,后肢无力、颤抖、疲惫。再将大鼠置于室温为25 ℃的房间中,让其毛发自然干燥)[47]

西医符合核心症状指标为①②③,次要症状指标为①,核心体征指标为②③;吻合度为85%。

中医符合主症为①②③,次症为①②③;吻合度为90%。

中西医综合吻合度为87.5%

通过增加站立、游泳等方法,建立了大鼠内痔模型,模拟了巴豆油混合物急性痔疮发作的大鼠模型通过长期施加腹压(强迫站立法)模拟慢性腹压增高的致病诱因,使病理过程更接近自然发病状态;同时联合化学刺激诱导急性发作症状,兼顾发病机制与临床症状的双重模拟,更贴合临床实际发病过程造模周期长,动物依从性相对较差